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ncbi最新视觉报道_ncbi官网(2024年12月全程跟踪)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：热点更新日期：2024-12-04

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载体构建攻略𐟔犰Ÿ”젨𝽤𝓦ž„建全流程目的基因的扩增首先，从NCBI上找到目的基因的核苷酸序列，利用Snapgene设计引物。通常在序列的前后各选20-25bp作为上下游引物。先用普通MIX进行退火温度优化，然后使用高保真酶（如诺维赞的2X Phanta⮠Max Master Mix）进行50uL体系的扩增。若需要高浓度，可扩增两管。连接连接目的基因与载体可选择T4连接酶，需在目的基因两端设计酶切位点和保护碱基（注意这些位点不能出现在片段内，以免片段被内部切开）。也可选择无缝克隆方式，利用同源重组原理，在引物5'端加入载体的同源臂，引物顺序为同源臂+酶切位点+基因引物。我个人偏爱这种方式，省时方便。本次使用的是诺维赞的ClonExpress⮠II One Step Cloning Kit连接酶，9个片段一次性连接成功。20uL的连接体系在37℃作用30 min，取10 uL用于转化。目的基因与载体的比例本次使用的载体是PcDNA3.1(5500bp)，基本50ng的载体就足够了。ClonExpress⮠II One Step Cloning Kit试剂盒推荐的载体和片段的摩尔比为1：2，例如片段500bp，浓度5ng/uL，载体5000bp，浓度25ng/uL。则片段摩尔数是载体的2倍，片段需要2㗵=10ng，即2uL。转化取10 uL连接产物转化DH5a。阳性克隆的筛选在1.5mL的EP管中加入800 uL的氨苄LB，用10uL的枪头把单个菌落全部占走，打入EP管中，震荡培养4h。一般选择8个克隆。4h后进行菌液PCR鉴定阳性克隆，选择2个送测序。注意事项移码问题：选择酶切位点时注意是否会引起目的基因的移码，可用Snapgene模拟。感受态：购买的商品化感受态可一支当两用，否则太浓不好挑选。自制的感受态在使用前需设置阳性对照，排除感受态质量问题。终止密码子和起始密码子：用于蛋白表达的目的基因需从ATG开始，以终止密码子结尾。 𐟔砦ž„建小贴士退火温度优化：对于高保真酶，退火温度至关重要，可通过梯度PCR找到最佳温度。引物设计：选择合适的引物长度和位置，确保扩增效率和特异性。连接效率：优化连接体系，确保目的基因与载体的高效连接。筛选策略：通过多个克隆的筛选，提高阳性克隆的比例。通过以上步骤，你可以顺利构建出含有目的基因的载体，为后续实验打下坚实基础。

Primer6.0引物设计，7步搞定！ Primer6.0是一款专业的引物设计软件，相较于NCBI，它更加准确、高效和便捷。以下是详细操作步骤：点击File菜单，选择New，然后选择Sequence。在白色框中粘贴CDS序列。选择Analyze菜单，点击Primer Search。点击Primer Parameters，调整TM、length和amplicon length，最后点击Search（还可以进行Advanced搜索）。点击All Primers，查看6对引物的评分、产物大小、Tm和GC含量等信息。点击All Structures，查看引物的二级结构、交叉配对和重叠等情况。选择评分为Best或Good的引物，这些引物即可使用。最后导出设计的引物相关信息。通过以上步骤，你就可以轻松设计出高质量的引物啦！

如何从单个基因入手进行深入分析？ 1️⃣ 首先，我们可以对基因编码的蛋白质进行结构域分析。通过结构域的初步判断，可以推测该基因的基本功能。 2️⃣ 接下来，利用NCBI等数据库搜索该基因的相关信息、相关文献等，看看是否有其他研究已经涉及类似基因或蛋白质的研究。 3️⃣ 构建该基因的载体并进行异源表达。例如，利用大肠杆菌、酵母、细胞等异源表达系统来表达这个基因，观察会出现什么现象。或者利用异源表达系统表达蛋白质，从蛋白质水平上进一步验证该基因的功能。 4️⃣ 最后，基因的功能在体内往往比体外更重要。因此，需要在个体水平上进行功能验证。例如，通过敲除、敲低、过表达等转基因改造方法，观察并统计其表型变化。基因功能研究是一个充满挑战和机遇的方向，希望大家的实验能够顺利进行！𐟒갟”쀀

Pubmed无法访问？原因竟是它！最近发现Pubmed突然不能用了，真是让人头疼𐟘㣀‚无论是挂梯子还是直接访问，都显示无法连接到SOLR服务器。这到底是怎么回事呢？经过一番搜索，发现并没有关于Pubmed要维修或停用的官方消息。NCBI的其他数据库都能正常访问，看来问题可能出在Pubmed本身的服务器上。可能是为了进行维护或升级，服务器暂时不可用。大家可以耐心等待一下，相信很快就能恢复正常访问。𐟙 如果你也在使用Pubmed时遇到类似问题，不妨检查一下网络连接，或者稍后再试。希望这篇文章能帮到你们！

「十四行诗」「重返未来1999」「维尔汀」探索时间缝隙，犹如十四行诗点燃梦境，维尔汀的每一步，都是时空的惊艳绝伦！有人准备好跟上这趟超维旅程了吗？𐟚€时空旅人们，留言区见！.ncbi.gov.cn电竞赛事大围观的微博视频

「游戏悬赏令」【传说延续，泪点揭晓】《王国之泪》的每一瞬，都是玩家心海的涟漪。 Switch上的旷世冒险，等你揭开新篇章！𐟧𖢜覎⩙饮𖤻쯼Œ准备好感动了吗？在游戏中寻找那份触动吧！.ncbiンbnSwitch小达人的微博视频

WB分子量不对？7个原因帮你找出问题 𐟔 蛋白翻译后修饰如何判断蛋白是否被修饰？可以在 NCBI 或 Uniprot 上查询。例如，PD-L1经过N端糖基化修饰后，分子量会增加到45-55KDa。 𐟔꠨›‹白水解与剪切蛋白在翻译后可能会被水解或剪切，这会影响其分子量。 𐟑堥Œ源蛋白异构体可以通过查询 Uniprot 来确定一个蛋白是否存在不同的 isoform。 𐟔„ 多聚形式如果检测到的分子量是理论分子量的倍数，可能是多聚形式。 𐟓‰ 蛋白样本降解蛋白样本存储不当或提取操作不当可能导致分子量降低。记得加入蛋白酶抑制剂。 𐟌ˆ 非特异性条带一抗或二抗的浓度过高可能会导致非特异性条带。通过以上几点，你可以找出WB分子量不对的原因，并进行相应的调整。

如何用生物信息学鉴定木薯成分 𐟌🊥œ觔Ÿ物信息学领域，鉴定物种的亲缘关系和相似性是必备技能。𐟔 想要知道木薯和红薯之间的关系？这里有一个简单的方法：下载数据：首先，从NCBI（美国国立生物技术信息中心）获取木薯和红薯的基因组序列。𐟓劦𕋥𚏤𘎦﹯𜚥﹥𞅦𕋧‰饓进行测序，然后使用BLAST工具进行基因组比对。𐟔슊通过这种方式，你可以确定待测物品中是否含有木薯成分。𐟌𑊊但请注意，待测物必须能够提供基因组序列。如果你一直吃食堂，不知道粉条的制作流程，可能会影响基因组的提取。𐟍œ 如果有相关经验，欢迎分享你的提取方法！𐟑颀𐟏밟‘袀𐟎“

如何设置PubMed自动推送最新文献 𐟓砦𓨥†ŒPubMed账号首先，点击“Login”按钮开始注册。如果你已经有NCBI的账号，可以直接点击“NCBI account”登录；如果没有，点击“Signup”进行注册。在注册页面，按照提示填写相关信息。注意，PubMed会默认使用你填写的邮箱地址来接收推送文章。 𐟔 设定推送方法在这里，我们使用自由词检索，虽然这种方法有时不太准确，但可以根据个人习惯来制定。点击“Advanced”按钮，可以设定多个布尔逻辑运算、截词检索、主题词检索、限制字段检索等方式。完成检索后，点击检索框下面的“Create alert”。 𐟓‹ 填写推送设置 Name of search：这是检索结果的名称，默认是检索内容，但你可以根据个人习惯更改。 Search terms：这是你的检索式，一般不需要更改。 Would you like E-mail updates of new search results：默认选项是“No, thanks”，一定要更改为“Yes, please”。 E-mail：当有新的文献时，PubMed会将内容推送到这个邮箱。邮箱一般默认为注册邮箱，但你也可以根据自己的习惯更改。 Schedule：表示推送频率，一般建议选择“daily”，每天推送。如果没有文献更新，PubMed当天不会推送相关内容。 Format：推送格式，一般选择“Summary”，只推送标题、杂志名、作者等内容。当然，也可以选择“Medline”格式，此时会推送摘要。 Number of items：这个比较关键，每次推送的条目数，一般建议设置为200（最大）。如果设置为5条，而当天PubMed有10条更新，则其只会推送前5条。因此建议设置为最大。 𐟒𞠤🝥혨𝮊设置完成后，点击“Save”按钮，就完成了推送的相关设置。之后，一旦有相关的更新，PubMed会在24小时内向订阅者的邮箱发送相关文献。如果想退订相关内容，可以直接点击邮件中的“Unsubscribe”按钮。当然，也可以通过PubMed中的MyNCBI进行退订。

生物数据库整理指南：从零开始到进阶嘿，大家好！作为一个刚开始接触生物信息学的萌新，我整理了一份简单的生物数据库指南。希望对你们有帮助，如果有任何问题，欢迎随时留言哦！𐟍𕊦 𘩅𘥺列数据库 𐟓‘ 首先，我们来看看一些重要的核酸序列数据库。NCBI的Genbank和EMBL-EBI的ENA都是非常经典的数据库。除此之外，还有DDBJ、SIB、EMBnet、AGRIS、PKU-CBI等。这些数据库主要存储FASTA格式的核酸序列。参考序列数据库 𐟓š 接下来是参考序列数据库，比如NCBI的RefSeq和dbEST。RefSeq主要提供参考序列，而dbEST则包含表达序列标签。还有一些二级核酸序列数据库，比如ncRNAdb（非编码RNA数据库）和miRBase（microRNA数据库）。基因组站点 𐟌 基因组站点也是非常重要的资源，比如Ucsc的基因组浏览器、Ensembl和JCVI（微生物宏基因组数据库）。这些工具可以帮助你浏览和下载基因组数据。蛋白质序列数据库 𐟍— 蛋白质序列数据库主要包括SWISS-PROT、TrEMBL和PIR。SWISS-PROT是人工注释的，而TrEMBL则是计算机注释的。这些数据库都包含在一级蛋白质序列数据库UniProt中。UniProtKB是一个非常重要的数据库，可以与其他站点链接。蛋白质结构数据库 𐟏‹️‍♂️ 如果你对蛋白质结构感兴趣，那么PDB（蛋白质数据银行）是一个不错的选择。PDB包含一级、二级和三级结构信息，你可以通过旋转来查看蛋白质的三维结构。功能数据库 𐟌 最后，一些功能数据库也非常重要，比如KEGG（京都基因和基因组百科全书）、GO（基因本体数据库）、TCGA（癌症基因组图谱）、ENCODE（DNA元素百科全书）和OMIM（人类孟德尔遗传在线）。这些数据库提供了各种功能注释和基因组信息。希望这份指南能帮到你，如果有任何问题，随时欢迎留言哦！𐟍𕀀

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