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免疫荧光法前沿信息_免疫荧光法是金标法吗(2024年12月实时热点)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：教程更新日期：2024-11-28

免疫荧光法

细胞凋亡与硫化氢：H2S的双重角色揭秘 𐟔 凋亡缺陷小鼠的 H2S 水平变化通过醋酸铅形成试验，我们发现雌性 MRL/lpr 和 Bim−/− 小鼠的血液中 H2S 浓度显著降低。这一现象在肝脏中同样存在，而肺、脾、肾等器官则未显示明显变化。进一步分析表明，这些小鼠的 PBMC（外周血单核细胞）中凋亡细胞和 H2S 水平均有所下降。 𐟒Š STS 与 Z-VAD 对 H2S 浓度的影响 STS（磺基丙酸）处理显著提高了 MRL/lpr 小鼠的血液和肝脏中的 H2S 浓度，而 Z-VAD（一种凋亡抑制剂）则抑制了这一过程。在 PBMC 中，STS 促进细胞凋亡和 H2S 的生成，而 Z-VAD 则减轻了这种效果。 𐟔젥‡‹亡细胞体外释放 H2S 通过体外实验，我们发现凋亡诱导（如 STS 和 UV 处理）后，不同细胞上清液中的 H2S 浓度显著增加。而添加 Z-VAD 则降低了 H2S 的浓度。这一结果表明，凋亡过程中会释放 H2S，且其浓度受到凋亡抑制剂的影响。 𐟓‰ H2S 通过 Sep15/STAT1/STAT3 信号轴抑制 Th17 细胞分化当 STAT1 被 siRNA 敲低时，H2S 未能抑制 Th17 细胞中的 p-STAT3 表达。这一发现表明，H2S 通过 Sep15/STAT1/STAT3 信号轴抑制 Th17 细胞的分化作用。 𐟒‰ H2S 在 apoV 介导的 SLE 治疗中的重要性通过蛋白质印迹和免疫荧光法评估，我们发现 apoV 中 CBS、CSE 和 3-MST 的表达。H2S 微电极显示 apoV 产生 H2S，而 HA 和 PAG 处理则抑制了 H2S 的生成。此外，apoV 抑制 IgG 在脾脏和皮肤中的沉积，而 CBS−/− 和 CSE−/− 的功能受损。这些研究结果揭示了凋亡与 H2S 的复杂关系，以及 H2S 在细胞凋亡和免疫调节中的重要作用。

抗核抗体阳性？别慌，先搞清楚这些事儿最近不少朋友拿着“抗核抗体1:80”或者“抗核抗体100+”的报告单来咨询，看得出来大家都很焦虑。其实，抗核抗体阳性到底代表什么呢？今天咱们就来聊聊这个话题。抗核抗体是什么？𐟤” 抗核抗体（ANA）是针对细胞内各种成分的自身抗体。简单来说，它就像是检测你体内有没有自身免疫病的初筛。一般来说，ANA应该是阴性的。如何解读报告单？𐟔 首先，看报告单一定要认准国际金标准——间接免疫荧光法！规范的报告单会显示滴度和核型，比如1:320，均质型。如果看到其他类型的报告单，建议去正规医院重新检测。比如我们医院的风湿科实验室，他们的检测技术员都是专业的，结果也会更可靠。高滴度才有临床意义𐟓ˆ 抗核抗体中高滴度（比如1:320以上）才有临床意义。通常1:80或者1:100的阳性结果在健康人中也很常见，所以意义不大。如果检测结果中高滴度阳性，建议进一步检查抗核抗体谱，看看具体是哪一种自身抗体阳性。结合临床表现𐟏劊所有的检验结果都要结合临床表现才有意义。比如慢性感染性疾病、肿瘤性疾病、老年人等情况都可能出现抗核抗体阳性，并不一定就是自身免疫病。别过度焦虑𐟘Œ 最后，不要过度查询网上信息，避免对号入座。如果有不适，最好去综合医院的风湿专科就诊，听取专业医生的意见。希望这些信息能帮到大家，别慌，先搞清楚状况再说！𐟒ꀀ

今日科普：流感和普通感冒是一样的吗流感是流行性感冒的简称，对人体的影响比较大，通常流感和感冒是不一样的。 𐟙‹流感是身体受到流行性感冒病毒侵入出现的症状，会有乏力、食欲下降、鼻塞、咽喉痛等症状出现，通常使用羚羊感冒片、连花清瘟胶囊等药物进行治疗。普通感冒是受到了细菌、病毒、支原体感染导致的，通常会有流鼻涕、打喷嚏的症状出现，一般使用磷酸奥司他韦胶囊、复方氨酚烷胺片等药物进行治疗。当身体出现感冒的症状，可以前往医院，在医生的指导下进行以下检查，检查出现的病因。 𐟒Š血常规检查：在医生的指导下进行血常规检查，能够显示身体中的白细胞计数，根据其他的检查数据判断出现的是哪种类型的感冒。 𐟒Š病毒学检查：可以通过免疫荧光法、血清学诊断法等方式，进一步判断病毒的类型，对治疗比较有益。 𐟒Š细菌培养检查：出现感冒导致继发性细菌感染的情况，可以通过痰、咽部的细菌培养，诊断出细菌的类型，对于选用药物有较好的效果。出现感冒的症状之后，一定要及时前往医院进行治疗，以免对身体造成危害，影响健康。#领航计划#

病原学检查在大多数情况下并非必需。因为普通感冒通常具有自限性，能够在一段时间后自行痊愈。但在某些特殊情况下，比如病情危重，或者不能排除流感等其他疾病时，就需要明确病原体。这时候，可以采用免疫荧光法、酶联免疫吸附检测法、血清学诊断法以及病毒分离和鉴定方法来确定。不过，这些检测手段大多存在报告时间较长的问题，所以更多是用于回顾性诊断。而对于怀疑有合并细菌感染的患者，则可以进行细菌培养，包括痰等分泌物以及血的培养，同时进行药物敏感试验。这有助于为后续调整抗菌药物提供有价值的参考。

寄生虫实验报告 𐟐›𐟔슥ꌥ：溶组织内阿米巴 𐟐𞊊目的与要求：掌握溶组织内阿米巴的形态特征并加以鉴别；熟悉粪便检查阿米巴包囊的方法；了解溶组织内阿米巴体外培养方法及苏木精染色法。实验内容：观察标本：患者新鲜粪便中的脓血涂片、大肠壁溃疡病理切片标本、阿米巴肝脓肿病理标本。染色观察：溶组织内阿米巴滋养体和包囊（铁苏木素染色）、结肠内阿米巴包囊（铁苏木素染色）。病原诊断方法：生理盐水直接涂片法；碘液染色溶组织阿米巴包囊；铁苏木精染色法；体外培养法。实验十：鞭毛虫 𐟐ž 目的与要求：掌握杜化利什曼虫无鞭毛体和鞭毛包的形态特征与寄生部位；熟悉阴道毛滴虫滋养体的形态特征；了解鞭毛虫的病原诊断方法。实验内容：观察标本：杜化利什曼原虫无鞭毛体及前鞭毛染色切片、阴道毛滴虫滋养体姬染色片、蓝压贾第虫滋养体及包囊铁苏木精染色切片。病原诊断方法：骨髓和淋巴结穿刺法检查杜化利什曼原虫；阴道分泌物生理盐水直接涂片法检查阴道毛滴虫；粪便、腹泻粪便直接涂片法检查贾第虫；十二指肠液或胆汁检查；小肠洗液组织检查；血清抗体检测、PCR、间接免疫荧光法等。思考题：简述溶组织内阿米巴的致病及其防治方法。分析鞭毛虫的感染途径和防治措施。

流感确诊的手段全知道流感，这个在冬春季节常常“兴风作浪”的病魔，给人们的健康带来了不小的威胁。当临床考虑为流感后，准确的确诊手段就显得至关重要。下面，我们就来详细了解一下流感确诊都有哪些有效的手段。首先，流感病毒核酸检测阳性是确诊流感的重要方法之一。通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR），尤其是实时-定量 RT-PCR 法，对呼吸道标本（比如鼻咽拭子）中的流感病毒核酸进行检测。这种方法具有很高的敏感性和特异性，能够准确地检测出病毒的存在，为诊断提供可靠的依据。其次，流感病毒快速抗原检测也是常用的手段。利用单克隆抗体来区分甲、乙型流感，一般在数小时内就能得出结果。不过，需要注意的是，这一检测结果需要结合患者的流行病学史进行综合判断。如果患者近期接触过流感患者，或者处于流感高发地区，那么阳性结果的可靠性就更高。再者，流感病毒分离培养阳性也是确诊的依据之一。从呼吸道标本中分离出流感病毒，这是一种较为直接的方法。特别是在流感流行季节，对于那些流感样病例快速抗原诊断和免疫荧光法检测阴性的患者，进行病毒分离更是有必要的，以免漏诊。最后，还有一种方法是检测急性期和恢复期双份血清的流感病毒特异性 IgG 抗体水平。当抗体水平呈 4 倍或 4 倍以上增高时，可确诊流感。但这种办法通常只具有回顾性诊断意义，也就是说，它更多地是用于对已经发生的感染进行追溯和确认，对于疾病的早期诊断帮助相对较小。

免疫荧光染色全攻略：从原理到操作步骤免疫荧光染色（Immunofluorescence, IF）是一种利用抗原抗体特异性结合来显示目标蛋白的技术，主要分为直接法和间接法。直接法是将蛋白与标记荧光素的一抗结合，而间接法则是蛋白先与一抗结合，然后再与带有荧光基团的二抗识别，最后在荧光显微镜下观察荧光。 𐟧꠨‰‚与材料生长于盖玻片的贴壁细胞封闭液（5% BSA/PBS）、抗体稀释液（1% BSA/PBS）固定剂：冰甲醇和冰丙酮，-20℃放置1小时以上 3%-4%多聚甲醛/PBS和0.5% Triton X-100/PBS 3%-4%多聚甲醛/PBS和冰丙酮，-20℃放置1小时以上一抗、荧光素标记二抗封片介质、湿盒、组化笔、荧光显微镜 𐟔젦“作步骤（间接法）细胞制备：从细胞培养箱取出细胞爬片，在光学显微镜下观察细胞生长成单层，弃去上清液，用PBS洗1次。细胞固定：根据抗原和组织细胞特点选择以下一种固定方法：甲醇/丙酮固定法：冰甲醇-20℃固定10分钟，弃去多余甲醇，冰丙酮-20℃透化细胞1分钟。多聚甲醛/Triton固定法：3%-4%多聚甲醛/PBS固定10分钟，PBS冲洗，0.5% Triton X-100透化细胞2-10分钟。多聚甲醛/甲醇固定法：3%-4%多聚甲醛/PBS固定10分钟，PBS冲洗，冰甲醇-20℃透化细胞5-10分钟。洗涤：用PBS浸洗3次，每次5分钟，去除多余的PBS。封闭：用5% BSA/PBS室温封闭30分钟。一抗孵育：在湿盒中滴加适当浓度的一抗，室温孵育1小时或4℃过夜。然后用PBS浸洗3次，每次5分钟。二抗孵育：加适当稀释的荧光素标记二抗，使其覆盖细胞，置于黑色湿盒内室温孵育30分钟以上。然后用PBS浸洗3次，每次5分钟。封片：滴加抗荧光衰减封片剂封片。观察：在荧光显微镜下观察结果。通过以上步骤，你可以利用免疫荧光染色技术来显示目标蛋白在细胞中的分布和定位。

在2011年底，2022年初我是被误诊过#红斑狼疮#的，我母亲是内科医生，1994年到1997年我也在河南某医学院学习过（函授大专）。对于红斑狼疮病变可能导致多个脏器损伤，比如伤及脑部、心脏以及肾脏等，严重时危及生命，等危害性、严重性我还是比较清楚的。 2011年9月起，我逐渐感觉浑身无力，本来就工作压力大睡眠时间少，经常彻夜无眠，第二天连路都走不成，同时饭量大减。但是体重还可以，160斤。我那会才35岁，应该是年富力强的时候，怎么会像是残疾了一样。吃了几个月保健品，毫无疗效。于是当年12月月底就去了西安市某家三级甲等综合医院（图一）。我口述身体状况后，医生很专业，很快开了检查单、化验单。我在西安那家医院对面酒店住了一晚，心情很好，心想只要知道得了什么病，就可以对症下药治疗了。第二天化验结果出来就去找医生，医生看完面部表情很凝重，“这个，你可能是患了红斑狼疮。”我当时就有五雷轰顶的感觉。没有再问太多，就去火车站回河南了。当时我认为红斑狼疮就是血癌，在火车上失魂落魄的几个小时还丢失了化验单，到了家人都瘫了，在电脑上查百度看病，越看越害怕。2012年元旦我体重下降到140斤。七八天时间吧，每天就是苦，不停的哭。还是要自己安慰自己，我想万一是西安医院误诊了呢？ 2012年1月6日，我鼓足勇气，到我们市里一家三甲医院看了医生，并告诉他西安医院给我一些说说，遗憾的是我把化验单丢在火车上了。医生是个科室副主任，很热情，说放心，有时候会误诊。又给我开了化验单。第二天化验结果出来后，（图二，图三，图四）去找医生是主任坐诊，是个女同志。她看了化验单说“按照化验结果基本确定你就是患了红斑狼疮！”。我已无力再说话，踉踉跄跄走出医院。我还是不服气，7号晚上，我通过几个医院的朋友，约了副主任，一个很简单的饭局喝的是啤酒，副主任看完化验单说不能完全确定，只能是高度怀疑是红斑狼疮。然后说:“兄弟，放宽心，明天先办住院手续，不管如何哥哥都会送你最后一程！”。玛德，当时我想死的心都有了。 1月11日晚上，我父母说不要轻信（80年代我爸是新疆生产建设兵团农八师某医院政委）你需要再做一个“抗核抗体”（间接免疫荧光法），如果是阳性才能确定或许是红斑狼疮，12号又去做了化验，结果是阴性，（图五）拿着化验单去找医生，医生说有这项化验，虽然不能排除，但是百分之五十可能不是红包狼疮。出了医院大门，轻松了太多了，现在只有一半可能性是“不死癌症”了。也许只能活一两年，那就舒舒服服过两年吧！从那天起，我做的第一件事就是放下所有工作，不再考虑赚钱的事，第二件事放开玩，不再拒接任何饭局，所有医嘱不能吃的饭菜，放开吃。反正快要离开这个世界了，就痛快几年是几年呗！ 2013年末我体重从新恢复到160斤，也没有去做化验。14年身体越来越好，15年恢复工作。16年朋友介绍一位老中医，听完我这几年的经历他哈哈大笑，问我“得病”前的生活时否规律，我说04年到11年创业期间没有啥规律，特别是09年后每天能睡三四个小时就不错了。老中医呡了一口茶，缓缓在我手心写了几个字:过度劳累而已。

四步搞定免疫荧光染色，简单又高效！想要做免疫荧光染色，但总觉得步骤太复杂？别担心，今天我来分享一个超级简单的四步免疫荧光染色法，让你轻松搞定！我们会在ibidi的Slide 8孔不可移除腔室载玻片中培养和染色贴壁细胞，以大鼠成纤维细胞为例，用多聚甲醛固定，再用线粒体染色MitoTracker对细胞核进行复染。当然，你也可以根据自己的需求使用其他固定技术和抗体染色。材料准备 Rat fibroblasts（细胞系） Slide 8 well, ibiTreat（ibidi, 80826） 2% Paraformaldehyde（PBS配制） 0.1% Triton⮠X-100（Fluka） 1% BSA in PBS（封闭液） 50 nM MitoTracker Green（Life Technologies） 0.1 /ml DAPI（Sigma）荧光显微镜（倒置），带有适当的滤光片组步骤一：培养细胞首先，在无菌条件下打开ibidi的Slide 8孔载玻片，放在Slide Rack或者适当的平面上。然后，准备细胞悬液（5 x 10 4细胞/ml），每个孔中加入300。盖上盖子后，把载玻片放入培养箱（37Ⰳ; 5% CO2），让细胞附着。培养至少3小时或者过夜。如果需要更长时间的细胞培养，建议几天后进行中等程度的交换。步骤二：固定、透化和封闭用细胞培养抽吸装置从孔中吸出细胞培养基。用Dulbecco PBS冲洗细胞，方法是将300缓慢加入每个孔。用约150 2% paraformaldehyde固定细胞20分钟。 20分钟后吸出液体，加入约150的0.1% Triton⮠X-100，10分钟后吸出液体，再用300 BSA封闭液洗涤细胞。步骤三：染色准备染色和抗体溶液。用150 DAPI溶液在室温下培养30分钟。用300 BSA封闭溶液洗涤细胞两次。用150 MitoTracker溶液培养45分钟。用300 BSA封闭溶液洗涤细胞两次。吸出溶液，逐滴添加约150的ibidi封片剂。步骤四：成像最后，在荧光显微镜下用合适的滤光片组观察细胞，你还可以选择用ibidi浸油来观察细胞。就这么简单！四步搞定免疫荧光染色，赶紧试试吧！𐟒ꀀ

𐟔찟窠物理实验的常用仪器与软件一览在基础物理实验室中，有许多常用的实验仪器和软件，帮助科学家们进行各种实验。以下是一些常见的实验方法和仪器：基因鉴定：包括DNA提取、PCR体系、电泳技术等，用于研究基因敲除鼠、基因敲入鼠和点突变鼠等。石蜡切片/冰冻切片：通过HE染色、免疫荧光和免疫组化等技术，观察细胞和组织结构。 qPCR：包括引物设计、RNA提取、逆转录和qPCR体系配置，用于定量分析基因表达。 Western blot (WB)：从组织样本中提取蛋白质，通过制胶、电泳、转膜、孵抗体和曝光等步骤，检测蛋白质表达。 Elisa：用于微量蛋白或物质的定量分析。细胞实验：包括细胞复苏、培养、传代、冻存、计数、转染以及细胞增殖/毒性实验、迁移实验、成管实验、免疫荧光染色、流式细胞术、细胞能量代谢实验、细胞周期检测实验和细胞凋亡实验等。常用仪器：如离心机、涡旋混匀仪、普通显微镜、荧光显微镜、共聚焦显微镜、酶标仪、PCR仪、荧光定量PCR仪、流式细胞仪和海马仪等。常用软件：包括统计软件如ImageJ、GraphPad Prism和SPSS，文献管理软件如EndNote和Zotero，绘图软件如Draw.io和PS，以及引物设计软件如Primer Premier 5和SnapGene。通过这些仪器和软件，科学家们可以进行各种物理实验，探索自然界的奥秘。

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