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ph标准缓冲液在线播放_ph标准缓冲液怎么配置(2024年12月免费观看)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：导读更新日期：2024-12-02

ph标准缓冲液

如何测量和校正QC-pH值？𐟌᯸ 今天我们来聊聊pH值测量的一些基本知识，特别是关于QC-pH的部分。pH值的测量在药品研发和质量控制中非常重要，涉及到的样品包括工艺用水（如注射用水）、某些原辅料（如氢氧化钠）、注射液、口服液以及疫苗等。测量pH值通常使用pH计，操作过程与渗透压测量类似，需要先进行校正再进行实际测量。校正过程中需要用到标准缓冲液，这些缓冲液可以通过标准物质管理部门购买，或者按照特定方法自行配制。校正过程有两种主要方法，我们重点介绍其中一种。首先，需要准备三种不同的标准缓冲液。先用两种缓冲液进行自动校正，获取斜率和漂移值（设备上通常有对应的按钮，按照提示将电极放入对应的缓冲溶液中，设备会自动给出结果）。结果符合要求后，用第三种缓冲液进行验证。这个过程类似于样品检验，但已知“样品”的具体pH值，通过读取的pH值与已知值对比，符合要求则校正通过。例如，如果已知样品pH值大约在6.5左右，可以选择pH值为4.01和9.18（25℃时）的缓冲液进行自动校正，然后用pH值为6.86（25℃时）的缓冲液进行验证。验证通过后，再读取样品的实际pH值。需要注意的是，不同温度下的标准缓冲液的真实值有所不同。如果使用的pH计有温度补偿功能，可以忽略标准缓冲液的温度。如果没有温度补偿功能，应尽量将标准缓冲液的温度控制在室温，并用设备读取出来的pH值与读取出来的温度对应图三中的真实值进行对比确认。例如，用pH值为6.86（25℃时）的缓冲液进行验证，读数结果pH值为6.82，缓冲液温度为20.0℃，那么此时该缓冲液理论pH值为6.88，6.82-6.88＞0.05pH，则验证未通过。此外，还有一些注意事项，例如为了除去二氧化碳和温度对标准缓冲液配制和样品检测的影响。希望这些信息对大家有所帮助！如果有任何疑问或需要进一步解释的地方，欢迎在评论区留言。

pH计使用指南：正确校正与操作步骤嘿，朋友们！有没有遇到过pH计读数飘忽不定的情况？别担心，我们一起来解决这个问题吧！其实，只要按照正确的步骤来操作，就能避免很多麻烦。下面我来详细讲解一下pH计的使用方法和注意事项。了解pH计的工作原理 𐟌𑊊首先，我们先来了解一下pH计的工作原理。pH计实际上是利用原电池的工作原理来工作的。简单来说，就是由参比电极和指示电极构成一个原电池。参比电极的电极电位保持不变，而指示电极的电极电位会随着溶液pH值的变化而变化。为了将这个变化转化为pH值，我们需要用到标准缓冲溶液来进行标定。使用步骤 𐟓 打开后盖，装入一块电池。安装复合玻璃电极时要注意以下几点：复合电极的下端是易碎玻璃泡，使用和存放时要小心，防止碰撞。复合电极内有KCl饱和溶液作为传导介质，要随时观察液体是否充足。如果发现液体剩余少量，应及时补充。复合电极的仪器接口不能有污染或水珠。复合电极的连线不能强制性拉动，防止线路接头断裂。打开电源开关，并调到pH测量档。用温度计测量pH6.86标准液的温度，然后将pH计温度补偿旋钮调到所测的温度值下。用去离子水冲洗干净复合电极，并用滤纸擦干。将2~5mL的pH6.86标准溶液倒入已用水洗净并擦干的塑料烧杯中，洗涤烧杯和复合电极后倒掉，再加入20mL的pH6.86标准溶液于塑料烧杯中，将复合电极插入溶液中，用仪器定位旋钮调至读数6.86，直到稳定。注意以下几点：必须用pH6.86标准溶液调定位。调完后，不能再动定位旋钮。用去离子水洗净复合电极，用滤纸擦干，再用温度计测量pH4.00溶液的温度，并将仪器温度补偿旋钮调到所测的温度值下。将2~5mL的pH4.00标准溶液倒入另一个塑料烧杯中，洗涤烧杯和复合电极后倒掉，再加入20mL的pH4.00标准溶液，将复合电极插入溶液中，读数稳定后，再用斜率旋钮调至pH4.00。（PS：斜率钮调完后，不能再动！）用温度计测定待测液温度，并将仪器温度调至所测温度。将复合电极插入待测溶液中，读取pH值。注意以下几点：测定时温度不能过高，如超过40℃，测定结果将不准，需用烧杯取出并冷却。复合电极应避免和有机物接触，一旦接触或沾污，需用无水乙醇清洗干净。温馨提示 𐟌Ÿ 在使用前必须进行校准，即以上步骤4~8的操作。如果仪器不关机，可以连续测定，一旦关机就要进行校准。（PS：12小时内，即使不关机也必须校准一次）注意事项 𐟓‹ 一般情况下，pH计在连续使用时，每天要标定一次；一般在24小时内仪器不需要再标定。使用前要拉下pH计电极上端的橡皮套使其露出上端小孔。标定的缓冲溶液一般先用pH6.86的溶液，再用接近被测溶液pH值的缓冲液。如被测溶液为酸性时，应选pH4.00的缓冲液；如被测溶液为碱性时，则选pH9.18的缓冲液。测量时，电极的引入导线应保持静止，否则会引起测量不稳定。电极切忌浸泡在蒸馏水中。pH计所使用的电极如为新电极或长期未使用过的电极，则在使用前必须用蒸馏水进行数小时的浸泡，这样pH计电极的不对称电位可以被降低到稳定水平，从而降低电极的内阻。在进行pH值测量时，要保证电极的球泡完全进入到被测量介质内，这样才能获得更加准确的测量结果。使用时，要拿掉参比电解液加液口的橡皮塞，这样参比电解液就能够在重力的作用下，持续向被测量溶液渗透，避免造成读数不稳定。希望这些步骤和注意事项能帮到你！如果你还有其他问题或需要更多帮助，欢迎随时留言哦！𐟘Š

实验室设备使用，必看攻略！ ### 天平使用前检查水平泡：确保天平的水平泡在中间位置。药品称量：不要直接在天平上称量药品，特别是含结晶水的药品，要放入玻璃仪器中称量。使用称量纸时要对角折叠，换称不同药品时要清洁药匙，以免污染。精密天平：使用时关上两面的窗口读数。清零和清理：称量完毕后清零天平，清理内部及周围的药品，将用过的称量纸放入废纸篓，保持环境整洁。定期校准：定期使用标准砝码进行校准，如半年或一年，移动后也宜校准，校准方法参考说明书。酸度计标定：使用前需标定酸度计，一天只需标定一次。温度控制：待测溶液温度不要过高，加热后的溶液需冷却后测量pH。标准缓冲液：定期更换标准缓冲液，一般2-3个月。超声洗涤器清洗和装水：使用前将超声洗涤器洗干净，装上干净的自来水。设置时间和功率：设置好超声时间和功率，超声洗涤器在20℃以上才开始工作。盖好盖子：使用完毕后将盖子盖好。水浴锅检查水和水温：使用前检查水浴锅中的水是否充足和干净，设置使用温度，最高加热温度不得高于95℃。夜间使用：夜间使用时，加入足量的水并盖上封口盖。溶剂蒸干：溶剂蒸干时，将水浴加热的容器固定，以免液体蒸干后重量变轻导致翻转。使用磁力搅拌时随时检查搅拌情况，防止液体喷溅。关闭加热器：使用完毕后关闭加热器，避免干烧。通风橱有毒物质：涉及有毒或挥发性物质时请打开通风橱。窗户关闭：打开通风橱时关闭实验室窗户，防止气体通过窗口回到实验室。关闭通风橱：实验完毕后及时关闭通风橱，风机长时间运转会影响寿命。烘箱烘箱内物品：烘箱内不得烘干易燃易爆的物质，如含有乙醇、乙醚等的样品。玻璃器皿干燥：干燥玻璃器皿时，先将器皿中的水尽量除干，以免水淋下导致烘箱损坏，之后将口朝下放置，尽量放在下层。特定温度干燥：如需要特定温度干燥，请使用个人烘箱，并注明使用时间，防止其他同学影响实验。样品取出：样品干燥完毕后及时取出，烘箱一个半年做一次清理。

pH计使用与保养全攻略：从零到高手 𐟓– 首先，阅读仪器的使用说明书是必不可少的。接通电源，安装好电极。在小烧杯中加入pH值为7.0的标准缓冲液，将电极浸入，轻轻摇动烧杯，使溶液均匀。按照不同pH计的说明书操作，读取溶液的pH值，校对pH计，使其读数与标准缓冲液的pH7.0的实际值相同并稳定。然后，将电极从溶液中取出并用蒸馏水充分淋洗。接着，将小烧杯中的标准缓冲液换为pH4.01或0.01的标准缓冲液，重复上述步骤使其读数稳定。这样就完成了二重点校正。校正完毕后，用蒸馏水冲洗电极和烧杯。注意，校正后不要旋转定位调节器，否则需要重新校正。 𐟔砰H计的使用测量前，确保所测溶液的温度与标准缓冲液的温度相同。使用前必须调节温度调节器或斜率调节旋钮。先进的pH计在线路中安插有温度补偿系统，仪器经初次校正后，能自动调整温度变化。测量时，先用蒸馏水冲洗两电极，用滤纸轻轻吸干电极上残余的溶液，或用待测液洗电极。然后，将电极浸入盛有待测溶液的烧杯中，轻轻摇动烧杯，使溶液均匀。按下读数开关，指针所指的数值即为待测溶液的pH值。重复几次，直到数值不变。数字式pH计在约10秒内数值变化少于0.01pH值时，表明已达到稳定读数。测量完毕后，关闭电源，冲洗电极，玻璃电极要浸泡在蒸馏水中。 𐟛 ️ pH计的保养玻璃电极在初次使用前，必须在蒸馏水中浸泡一昼夜以上。平时也应浸泡在蒸馏水中以备随时使用。玻璃电极不要与强吸水溶剂接触太久，在强碱溶液中使用应尽快操作，用毕立即用水洗净。玻璃电极球泡膜很薄，不能与玻璃杯及硬物相碰。玻璃膜沾上油污时，应先用酒精，再用四氯化碳或乙醚，最后用酒精浸泡，再用蒸馏水洗净。如测定含蛋白质的溶液的pH时，电极表面被蛋白质污染，导致读数不可靠，也不稳定，出现误差，这时可将电极浸泡在稀HCl（0.1mol/L）中4-6分钟来矫正。电极清洗后只能用滤纸轻轻吸干，切勿用织物擦抹，这会使电极产生静电荷而导致读数错误。甘汞电极在使用时，注意电极内要充满氯化钾溶液，应无气泡，防止断路。应有少许氯化钾结晶存在，以使溶液保持饱和状态。使用时拨去电极上顶端的橡皮塞，从毛细管中流出少量的氯化钾溶液，使测定结果可靠。 𐟌᯸ pH测定的准确性取决于标准缓冲液的准确性。酸度计用的标准缓冲液，要求有较大的稳定性，较小的温度依赖性。

pH计校准步骤与注意事项详解 𐟛 ️ pH计校准所需工具和材料标准缓冲液：选择与待测溶液pH值接近的标准缓冲液。我国常用的标准缓冲液有3种，分别是：邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4），pH 4.003，0.05M 混合磷酸盐（Na2HPO4），pH 6.864，0.025M 硼砂（Na2B4O7ⷱ0H2O），pH 9.182，0.01M 𐟓 标准缓冲液的配置方法邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液（pH 4）：精密称取在115Ⱶ℃干燥2～3小时的邻苯二甲酸氢钾10.12g，加水溶解并稀释至1000mL。磷酸盐标准缓冲液（pH 7）：精密称取在115Ⱶ℃干燥2～3小时的无水磷酸氢二钠4.303g与磷酸二氢钾1.179g，加水溶解并稀释至1000mL。磷酸盐标准缓冲液（pH 6.8）：精密称取在115Ⱶ℃干燥2～3小时的无水磷酸氢二钠3.533g与磷酸二氢钾3.387g，加水溶解并稀释至1000mL。硼砂标准缓冲液（pH 9）：精密称取硼砂3.80g（注意避免风化），加水溶解并稀释至1000mL，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免与空气中二氧化碳接触。 𐟔砰H计校准步骤校准前的准备：将实验室用的pH计仪器斜率调至最大。拨开电极上部的橡胶塞，使小孔露出。校准基准点：将电极从装蒸馏水的烧杯中取出，用滤纸吸干残留的蒸馏水。将电极放入装有混合磷酸盐的烧杯内，等待15分钟以上。调整仪器上的定位旋钮，使仪器显示6.86pH。清洗电极：将电极从装有混合磷酸盐的烧杯内取出，用蒸馏水洗净。将电极放入装有蒸馏水的烧杯内，等待3分钟左右。校准斜率：将电极从装蒸馏水的烧杯内取出，用滤纸吸干残留的蒸馏水。将电极放入装有邻苯二甲酸氢钾或硼砂的溶液中，等待15分钟以上。观察仪器显示是否为4.00或9.18pH。如果不是，调节仪器上的斜率旋钮，使仪器显示为4.00或9.18pH。三点校正：如果需要进行三点校正，将另一种溶液按上述步骤操作一遍即可。 𐟓Œ 注意事项在进行校正时，确保电极上的小孔露出，否则会产生负压，导致溶液不能正常进行离子交换，影响测量数据。校正过程中，使用滤纸吸干电极上的残留液体，避免影响测量结果。

𐟌🰟Œ🩅𖦴𛦵‹定实验记录𐟌🰟Œ🊦1.9 𐟍ƒ𐟍ƒDNS法测定还原糖: 将粗酶液稀释一定倍数后，取3只比色管标号1,2,3，加入稀释的发酵液0.5ml，加入DNS试剂0.5ml混匀，沸水浴5min，冷却后加入4ml蒸馏水混匀，540nm处测OD值。 𐟍ƒ𐟍ƒ滤纸酶活力（FPase）的测定：取适量稀释的粗酶液0.5ml于试管中，加入1.5ml柠檬酸缓冲液（PH4.5、0.05mol/L），再加入滤纸条50mg，50℃水浴1h后取出，按DNS法测定还原糖。 𐟍ƒ𐟍ƒ葡萄糖标准液的测定：分别取葡萄糖标准液（1mg/ml）0、0.2、0.4、0.6、0.8、1ml于15ml试管中，用蒸馏水补足至1.0ml，分别准确加入DNS试剂2ml，沸水浴加热2min，流水冷却，用水补足到15ml刻度。在540nm波长下测定吸光度。以葡萄糖含量（mg）为横坐标，光吸收值为纵坐标。图: 三组对峙实验图图一: E对C 图二: B对C 图三: A对C

pH计校准与使用全攻略 𐟌ˆ pH计的校准步骤打开仪器电源，将模式切换为pH。取出电极，清洗并擦干，放入pH值为1.68的标准缓冲液中。按下Cal键，等待读数稳定，仪器会自动校准。将电极清洗干净，擦干，放入pH值为4.00的标准缓冲液中。再次按下Cal键，等待读数稳定，仪器会自动校准。将电极洗干净，擦干，放入pH值为6.86的标准缓冲液中。按下Cal键，等待读数稳定，仪器会自动校准。将电极洗干净，擦干，放入pH值为9.18的标准缓冲液中。按下Cal键，等待读数稳定，仪器会自动校准。校准标准范围：斜率应在95%～105%之间。 𐟔젰H样品测定将电极洗干净，擦干，放入样品溶液中。按下Read键，等待读数稳定，仪器会自动读取。 𐟒砰H计电极的保存溶液：3mol/L的KCl溶液理由：保持电极的pH电势平衡。增加导电性。消除对电极的噪音反应。 𐟔„ pH计的原理 pH计用于测量溶液中的氢离子活度（即pH值），pH值是氢离子浓度的对数的负数。主要测量部件包括：玻璃电极：对pH敏感，其电位取决于周围溶液的pH值。参比电极：电位稳定，作为测量各种偏离电位的对照。电流计：将电位放大若干倍，放大的信号通过电表显示。将pH计的两个电极一起放入同一溶液中，就构成了一个原电池。 𐟌Š pH计电极为什么要浸泡？因为pH球泡是一种特殊的玻璃膜，在玻璃膜表面有一层很薄的水合凝胶层，只有在充分湿润的条件下H+离子有很好的响应。同时，玻璃电极经过浸泡可以使不对称电势大大下降并趋向稳定。 𐟧𜠧Ž𛧒ƒ球泡污染老化如何处理？将电极用0.1mol/L的稀盐酸浸泡清洗。或将电极下端浸泡在4%氰氟酸中3～5秒，用蒸馏水洗净。然后在氯化钾溶液中浸泡使其恢复。 𐟓Š pH计读数不稳定、跳动原因检查电极是否损坏或是否接触不良。查看玻璃球是否污染，如有机物的累积导致不灵敏。用饱和的KCl溶液浸泡探头，保持润湿状态。使用离子强度调节剂：如KCl，增加溶液离子强度及导电性。温度补偿：读数会受温度影响，需测定时进行温度补偿。

微生物实验室质量控制指南 1. 𐟔堩똥Ž‹灭菌锅的温度控制温度校准：使用参考温度计进行测试。温度要求：160Ⱶ℃或180Ⱶ℃，前者灭菌2小时，后者30分钟。校准时间：每年一次。 𐟌᯸ 干燥灭菌箱的温度控制工作记录：包括开始时间、到达灭菌温度时间、取出时间。温度校准：用参考温度计进行测试。温度要求：160Ⱶ℃或180Ⱶ℃。校准时间：每年一次。 𐟒砨’𘩦水的控制清洁离子交换器：按设备说明定期清洁，更换离子交换材料。检测标准：西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率＜0.5ms/m，细菌数＜50cfu/ml。日常标准为＜10ms/m，未见有细菌指标。检测频率：每月一次。 ⚖️ 天平的管理放置要求：无振动、无气流影响及水平台面上。使用及运行检查记录：每次使用后进行记录。检定：每年一次。运行检查频率：按运行计划或按产品给出的标准重量单位进行对照。 𐟌𑠰H计校准：使用前用标准液进行校准。缓冲液有效期：PH4.00约1年，PH7.00约6个月，PH9.00约6个月。维护：定期清洗电极外表，检测电极敏感性及极性恢复。 𐟌쯸 净化工作台控制洁净度要求：水平流净化工作台工作区域为100级，垂直流净化工作台细菌数＜0.49个/皿。运行检查频次：每月一次，主要是细菌沉降检测。高效过滤膜更换：每年一次，并进行粒子与细菌沉降检测。 𐟒ᠧ𔫥䖧𚿧栗„控制检测方法：仪器测试法和生物测试法。仪器测试法通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度，要求在距离照射无1米处，强度为90/cmⲣ€‚生物测试法采用一定的菌培养物，经一定比例稀释，菌量控制在200-250个/0.5mL，涂布平板在紫外灯光下照射2分钟，同时设置普通光源的对照组，后置37℃48小时，计算其杀灭率，要求杀灭率达99%。 𐟔젦˜𞥾œ的控制作业指导书：制定显微镜作业指导书，记录日常维护和自校记录。环境要求：显微镜应置于无振动、避免灰尘、防潮等要求的环境。 𐟔砥…𖥮ƒ微生物检测专用仪器的控制设备自校：细菌鉴定仪、酶标仪等设备，工作中常用阳性对照检测其功能正常性。仪器检定：按有关的部门检定或按自校作业指导书进行。使用登记：仪器使用登记、校准计划、校准记录等文件存档。专人使用：仪器专人使用，操作者应取得相应的岗位培训合格，持证上岗。

如何在标准品上做标记 𐟌Ÿ 抗体预处理 𐟌Ÿ 将待交联的抗体（浓度≥1mg/mL，推荐2-5mg/mL）在4℃下透析三次，使用交联反应液（配制方法：7.6g NaHCO3，1.06g Na2CO3，7.36g NaCl，加水定容至1L），直至pH=9.0。 𐟒砩…制荧光染料溶液 𐟒犥𐆆ITC溶于DMSO中，浓度为1mg/mL。每次使用时需新鲜配制，避光保存。 𐟔„ 添加荧光染料 𐟔„ 按P:F（蛋白质：FITC）=1mg:150的比例，将FITC缓慢加入抗体溶液中，边加边轻轻晃动，使其均匀混合，暗处4℃反应8小时。 ❌ 终止反应 ❌ 加入5mol/L的NH4Cl至终浓度50mmol/L，4℃下终止反应2小时。 𐟚🠥Ž𛩙䥤š余荧光染料 𐟚🊥𐆤𚤨”物在PBS中透析四次以上，直至透析液清亮。 𐟔젤𚤨”物鉴定 𐟔슨›‹白浓度（mg/mL）= [A280 - 0.31 㗠A495] / 1.4 F/P比例：3.1 㗠A495 / [A280 - 0.31 㗠A495]，该值应介于2.5~6.5之间。 𐟛᯸ 加入保护剂 𐟛᯸ 将FITC交联的蛋白置于pH7.4的磷酸盐缓冲液中，加入0.1% NaN3、1% BSA，4℃避光保存。 𐟓Œ 注意事项 𐟓Œ FITC在处理过程中应尽量避免暴露在光下，因为FITC对光敏感。正确的抗体浓度和FITC的添加量至关重要，如果FITC添加过多，可能导致非特异性结合；如果添加不足，可能不会得到足够强的荧光信号。确保在处理过程中使用纯净无菌的工具和试剂，以避免抗体被污染。反应后要立即进行纯化处理，否则FITC可能会对抗体造成氧化损害。标记完成后，应立即应用或冷冻保存，避免长时间储存。 𐟛 ️ 快速离心脱盐柱的使用方法 𐟛 ️ 在抗体预处理时，如果没有透析袋或嫌透析麻烦，可以直接使用快速离心脱盐柱。配制交联反应液后，用该反应液平衡快速离心脱盐柱。将样本上柱离心，离心后的样本与透析后的样本液相同。在去除多余荧光染料时，也可以使用快速离心脱盐柱，方便快捷。在加入磷酸盐缓冲液时，同样可以使用快速离心脱盐柱来置换缓冲液。

HTRF试剂盒：生物分子检测的利器 𐟌ˆ HTRF（Homogeneous Time-Resolved Fluorescence，均相时间分辨荧光）试剂盒是一种高灵敏度的生物分子检测工具。以下是关于HTRF试剂盒的详细介绍：一、检测原理 𐟔슈TRF技术基于时间分辨荧光（TRF）和荧光共振能量转移（FRET）原理。在HTRF检测中，使用一对荧光标记的探针，一个是供体荧光分子，另一个是受体荧光分子。当供体被特定波长的激发光激发时，它会发射出荧光。如果供体和受体分子在空间上足够接近（通常在10nm以内），供体的荧光能量可以通过FRET转移到受体分子上，使受体分子也发出荧光。通过测量受体分子的荧光强度，可以确定供体和受体分子之间的FRET效率，从而推断出目标生物分子的存在和浓度。由于HTRF采用了时间分辨荧光技术，可以有效地消除背景荧光的干扰，提高检测的灵敏度和特异性。二、试剂盒组成 𐟧ꊨ祅‰标记的探针：根据不同的检测目标，提供特定的供体和受体荧光标记的探针。缓冲液：用于调节反应体系的pH值、离子强度等条件。标准品：用于制作标准曲线，确定目标生物分子的浓度。说明书：详细介绍试剂盒的使用方法、注意事项、实验步骤等。三、主要参数 𐟓Š 检测范围：不同的HTRF试剂盒具有不同的检测范围，通常可以检测从皮摩尔到微摩尔级别的目标生物分子浓度。灵敏度：HTRF技术具有很高的灵敏度，可以检测到非常低浓度的目标生物分子。具体的灵敏度取决于试剂盒的设计和目标分子的性质。特异性：由于采用了特定的荧光标记探针和FRET原理，HTRF试剂盒具有较高的特异性，可以区分目标生物分子和其他类似分子的干扰。准确性：通过与标准方法对比或多次重复实验，可以验证HTRF试剂盒的准确性。标准曲线的线性回归系数（r值）通常要求大于等于0.99。精密度：包括批内和批间变异系数。批内变异系数一般小于10%，批间变异系数小于15%，说明试剂盒在重复检测同一样本以及不同批次间的稳定性和一致性较好。 #htrf试剂盒 #ELISA试剂盒

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