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湿热灭菌法前沿信息_湿热灭菌法中效果最好的是(2024年11月实时热点)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：教程更新日期：2024-11-28

湿热灭菌法

如何使用生物指示剂检测灭菌效果 𐟦 生物灭菌指示剂是一种常用的方法来检测灭菌效果，尤其是对于湿热灭菌法。这种方法主要利用嗜热脂肪地芽孢杆菌（也称为地芽孢杆菌）的芽孢来进行测试。市场上有很多品牌的灭菌指示剂，常见的有纸片形式和安瓿瓶（或其他玻璃管形状）的产品。生物指示剂的组成和制作 𐟧ꊊ嗜热脂肪地芽孢杆菌对热有很强的耐受性，尤其是它的芽孢体，因此常被用作生物指示剂。这种菌株的最适生长温度在55℃左右，大多数菌株的生长温度范围在40℃-65℃。它们能发酵葡萄糖产酸，所以常用溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水（BCP）来检测芽孢体是否存活。如果你在实验室里有嗜热脂肪地芽孢杆菌菌株，也可以自行制作生物指示剂。首先，将嗜热脂肪地芽孢杆菌接种到锰盐营养琼脂平板上（因为培养温度较高，培养时间较长，所以平板需要厚一些），55℃培养5-7天左右，形成丰富的芽孢。然后，用生理盐水或磷酸盐缓冲液将菌苔从平板上洗下，100℃加热30分钟杀死繁殖体，留下芽孢。稀释后，可以采用涂布或倾注法计数（通常使用DTA琼脂，如果没有使用TSA也可以），置55℃培养24-48小时，测定芽孢悬液浓度。将定量体积的芽孢悬液加入纸片上干燥处理，使纸片中的芽孢数大约在1-5X10^6CFU，搭配溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水即可进行灭菌效果测定。也可以将芽孢悬液加入定量体积的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水中（通常用0.5-2mL，含芽孢量10^6CFU），制备好的指示剂可在2-8℃冰箱内冷藏。灭菌生物指示剂的使用 𐟔劊对于纸片的生物指示剂，放入灭菌锅中按照固定程序灭菌后，将纸片放置于5mL的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水中，55℃培养不少于7天。若出现变黄反应，说明芽孢未被杀死，灭菌效果不达标。对于较大体积培养基的灭菌效果测试，应考虑使用密封的玻璃管装的灭菌指示剂放入培养基的内部进行监测，确认培养基的内部是否达到了相应的灭菌效果（特别是灭菌体积较大、容器密闭的情况下，更需要注意检测容器内部是否达到了相应的灭菌效果）。密封的玻璃管装灭菌指示剂使用后直接置于55℃培养不超过7天即可，观察是否有变黄现象出现。未使用的保存管应置于冷藏保存（若储存环境温度过高会导致芽孢萌发，培养基变黄）。通过这些步骤，你可以有效地检测湿热灭菌法的灭菌效果，确保你的实验和操作达到预期的效果。

干热灭菌法的四种类型及其应用干热灭菌法比湿热灭菌法需要更高的温度和更长的时间。以下是几种常见的干热灭菌方法： 1️⃣ 干烤：利用干烤箱，加热至160~180℃并保持2小时，可以杀死所有微生物，包括芽孢菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的灭菌。 2️⃣ 烧灼和焚烧：烧灼是直接用火焰杀死微生物，适用于微生物实验室的接种针等不怕热的金属器材的灭菌。焚烧是彻底的消毒方法，但只限于处理废弃的污染物品，如无用的衣物、纸张、垃圾等。焚烧应在专用的焚烧炉内进行。 3️⃣ 红外线辐射：红外线辐射是一种0.77~1000微米波长的电磁波，有较好的热效应，尤以1~10微米波长的热效应最强。红外线由红外线灯泡产生，不需要经空气传导，所以加热速度快，但热效应只在照射到的表面产生，因此不能使一个物体的前后左右均匀加热。红外线的杀菌作用与干热相似，利用红外线烤箱灭菌的所需温度和时间亦同于干烤。多用于医疗器械的灭菌。 4️⃣ 微波：微波是一种波长为1毫米到1米左右的电磁波，频率较高，可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属表面。微波能使介质内杂乱无章的极性分子在微波场的作用下，按波的频率往返运动，互相冲撞和磨擦而产生热，介质的温度可随之升高，因而在较低的温度下能起到消毒作用。一般认为其杀菌机理除热效应以外，还有电磁共振效应，场致力效应等的作用。消毒中常用的微波有2450MHZ与915MHZ两种。微波照射多用干食品加工。在医院中可用于检验室用品、非金属器械、无菌病室的食品食具、药杯及其它用品的消毒。注意：微波长期照射可引起眼睛的晶状混浊、睾丸损伤和神经功能紊乱等全身性反应，因此必须关好门后才开始操作。

微生物实验室消毒，这几招必备！微生物实验室是进行微生物研究的重要场所，环境洁净度要求极高。严格的消毒灭菌工作不仅影响实验的顺利进行，还能为实验室工作人员提供一个清洁安全的工作环境。以下是一些常用的消毒灭菌方法：干热灭菌法 𐟔加利用恒温干燥箱，在120℃-150℃的高温下，保持90-120分钟，通过热力作用杀死细菌和芽孢。湿热灭菌法 𐟒犠压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常见的方法。利用高压蒸汽和潜热作用，使菌体蛋白质凝固变性而死亡。过滤除菌法 𐟧𜊠 通过有微孔的滤膜过滤液体或气体，使大于滤膜孔径的微生物颗粒阻留，适用于遇热易分解的试剂、酶液等。射线灭菌法 𐟌ž 利用紫外线灯进行照射灭菌。紫外线通过破坏微生物的核酸及蛋白质，使其灭活。化学消毒剂消毒法 𐟧𔊠 使用化学消毒剂，适用于不能利用物理方法进行灭菌的物品、空气、工作面、操作者皮肤等。此外，针对空间环境的灭菌，过去一般采用臭氧熏蒸或甲醛熏蒸的方法。目前，微生物实验室消毒灭菌的最佳方法是使用过氧化氢干雾灭菌设备。这种方法采用了全球最先进的雾化技术，雾化颗粒小于3微米，能迅速弥漫充满整个密闭空间，不留死角，灭菌效果显著。通过这些方法，可以有效保证微生物实验室的环境洁净和安全，为实验研究提供有力支持。

消毒剂 vs 喷火枪：哪种消毒方法更好？消毒是确保环境卫生和预防疾病传播的重要步骤。选择合适的消毒方法至关重要。以下是常见消毒方法的详细介绍，帮助你做出最佳选择。 𐟔堧‰駐†消毒灭菌方法：高温消毒：包括干热灭菌和湿热灭菌。干热灭菌法通过火焰直接烧灼来杀死微生物，而湿热灭菌法则通过煮沸等方式进行。紫外线消毒：利用紫外线波长为253.7nm的杀菌灯进行消毒。超声波消毒：利用频率在20000~200000Hz的声波来裂解细胞，提取细胞组分。微波消毒：通过微波炉进行消毒，所需时间短且加热均匀。滤过除菌：通过机械阻留去除液体或空气中的细菌，但不适用于病毒、支原体等小颗粒。干燥及低温抑菌法：利用干燥和低温来抑制微生物的生长繁殖。 𐟧𔠥Œ–学消毒灭菌方法：消毒剂：用于杀灭病原微生物的化学药物。防腐剂：用于抑制微生物生长繁殖的化学药物。常用消毒剂包括碱类（如烧碱、石灰乳）、卤素类（如次氯酸钠、漂白粉）、酚类（如菌毒敌、碘制剂）、氧化剂（如高锰酸钾、过氧乙酸）等。 𐟒Š 其他消毒灭菌方法：抗生素：某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死其他微生物的物质。植物杀菌素：某些植物中存在的杀菌物质，如黄连、大蒜、板蓝根等。细菌素：某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与它同种不同菌株的细菌。噬菌体：细菌的病毒，可以用作消毒剂，甚至可以直接用于食品。选择合适的消毒方法时，应考虑消毒效果、操作简便性以及对环境的影响。在面对不同场景和需求时，物理消毒和化学消毒各有优势，选择最适合的方法是关键。

消毒灭菌法揭秘：速掌握技巧 𐟌€ 物理消毒灭菌法 𐟌€ 物理消毒灭菌法是利用物理因素如热、光、电等来杀灭微生物的方法。它适用于医院获得性感染的预防和控制。 𐟔堥†…源性感染：是指病原体来自患者自身的感染。 𐟔 外源性感染：是指病原体来自外界环境的感染。 𐟛 ️ 操作步骤：不需要保护的物品：可以直接进行物理消毒。耐用的物品：如刀具等，如果在使用期内，可以继续使用。不耐用的物品：如一次性手套、口罩等，建议更换。 𐟕’ 灭菌时间：干热灭菌法：150-250分钟。湿热灭菌法：162小时。 𐟒砦𓨦„事项：使用水开始消毒时，建议再次用清水冲洗。使用NaHCO3等碱性物质可以增强消毒效果。沸水消毒时，建议使用冷水干锅或热水干锅。 𐟔砥Ž‹力蒸汽灭菌法 𐟔犥Ž‹力蒸汽灭菌法是利用高压蒸汽来杀灭微生物的方法。它适用于医院内各种物品的消毒和灭菌。 𐟓Š 压力参数：预排式蒸汽灭菌法：121-134℃，压力144-217kPa。下排式蒸汽灭菌法：121-134℃，压力2017-212kPa。 𐟓 注意事项：操作前请检查设备是否正常。操作过程中注意安全，避免烫伤。操作后请及时清理设备，保持清洁。

口腔器械消毒全流程详解，确保无菌操作！ 𐟔 口腔器械消毒流程概览：处理步骤：回收-冲洗-洗涤-漂洗-终末漂洗-检查干燥-保养-包装-干燥 𐟒砥™覢𐦸…洗流程：冲洗：将器械置于流动水下冲洗，去除污染物，水温控制在15-30℃。洗涤：使用酶清洗剂刷洗器械，操作时将器械放于水面下，防止气溶胶产生。干固的污渍需用尼龙刷子清洗，避免器械磨损。空腔器械应用高压水枪冲洗后高压气枪吹干。漂洗：酶清洁剂洗涤后，再用流动水冲洗或刷洗。终末漂洗：使用软水、纯净水或蒸馏水进行冲洗。 𐟔 日常检测方法：目测法：通过目视检查清洗后的质量。放大光源灯检查。清洗消毒器物理检测。 𐟓栥Œ…装材料选择：牙科小器械可选用器械盒盛装。口腔诊疗器械选用塑封纸袋包装。手术包可选用两层包布包装。 𐟔– 封包要求：包装应有灭菌化学指示袋，灭菌编号，灭菌批次，灭菌日期及失效日期。塑封袋密封宽度6mm，包内器械距包装袋封口处>2.5mm。管腔器械应盘绕，避免折叠。剪刀等轴节器械不能完全锁扣，精细器械、锐器等应采取保护措施。 𐟔堧‰饓灭菌方式：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌法）：134℃，灭菌6分钟，压力202.8kpa。牙科手机应当放在第一层，放置时纸面朝上，有一定间隙（有利于蒸汽穿透及干燥）。化学灭菌剂浸泡灭菌：不耐热、不耐湿的器械首选。 ⚠️ 注意事项：灭菌完成后应充分冷却，检查有无湿包、油包、破损、有效期是否完整再分类放置。一次性灭菌物品的保管：如一次性注射器、一次性治疗盘等，拆开外包装后同灭菌物品，应当储存在无菌室，储存要求同灭菌物品（离地面20CM，离墙面5CM，离天花板50CM）。灭菌袋的包装要求：无纺布用于无菌器械的包装，需包装2层，每层分开包装不能一起包。灭菌袋包括无妨布都属于一次性用品，不能重复使用。灭菌包的封口需大于6MM即0.6CM，器械距封口处大于2.5CM。纸塑灭菌袋的灭菌有效期为6个月。包内的精密器械、锐利器械等如剪刀需采取保护措施，如用无纺布或是纱布包起来，以免损坏。包内有轴承的器械需打开轴承消毒。纸塑包装袋上面需有变色标签（自带方块变色方块），无纺布上面需贴3M指示带。灭菌包的重量：器械包不超过7公斤，敷料不超过5公斤。湿包、油包以及包里面有明显水蒸汽的包都需重新消毒，不能作为无菌包保存。 𐟔젦𖈦�Œ监测：生物监测时间：中心供应室需每周监测一次，口腔门诊每月监测一次。凡新的消毒锅使用前以及消毒锅维修后都需进行生物监测，合格后才能启用。物理监测即工艺监测：灭菌包的包装是否合格，灭菌的压力、温度以及时间，消毒锅的装载方式。化学监测：3M指示带，化学指示卡生物监测：芽孢监测。

一、生物灭菌指示剂化验员资格证书检验员培训stspx134张是常用来检测灭菌效果的方法之一，对于湿热灭菌法，一般常用啫热脂肪地芽孢杆菌(也可使用其他等效耐热的菌株)的芽孢进行测试。目前市场上已有多种品牌和形式的灭菌指示剂，常见的一般有纸片形式的和安瓿瓶(或其他玻璃管形状)的产品。嗜热脂肪地芽孢杆菌(原名嗜热脂肪芽孢杆菌，后重新划分归属于地芽孢杆菌属，因此改名为嗜热脂肪地芽孢杆菌)对热有很强的耐受性，芽孢体耐热性更强，因此常用其芽孢制作生物指示剂。嗜热脂肪地芽孢杆菌最适生长温度在55℃左右，大多数菌株生长温度范围在40℃-65℃，能发酵葡萄糖产酸，因此常用溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水(BCP)检测其芽孢体是否存活。二、生物指示剂的组成和制作若实验室中有嗜热脂肪地芽孢杆菌菌株，也可自行制作生物指示剂进行测试。首先将嗜热脂肪地芽孢杆菌接种至锰盐营养琼脂平板(因培养温度较高，培养时间较长，平板需厚一些，也可使用锥形瓶做大斜面)，55℃培养5-7天左右，可形成比较丰富的芽孢，将菌苔从平板上用生理盐水或磷酸盐缓冲液洗下，100℃加热30min可杀死繁殖体留下芽孢，稀释后可采用涂布或倾注法计数(通常使用DTA琼脂，若没有使用TSA也可以，置55℃培养24-48h)，测定芽孢悬液浓度。将定量体积的芽孢悬液加入至纸片上干燥处理，使纸片中含有的芽孢数大约在1-5X10^6CFU即可，搭配溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水管即可进行灭菌效果测定了。也可以将芽孢悬液加入至定量体积的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水中(通常可以用0.5-2mL，含芽孢量10^6CFU)使用。制备好的指示剂可在2-8℃冰箱内冷藏。三、灭菌生物指示剂的使用对于纸片的生物指示剂，放入灭菌锅中按照固定程序灭菌后，将纸片放置于5mL的溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水管(通常商品化培养基已配备)中55℃培养不少于7天，若出现变黄反应，说明芽孢未被杀死，灭菌效果不达标。对于较大体积培养基的灭菌效果测试，则应考虑使用密封的玻璃管装的灭菌指示剂放入培养基的内部进行监测，确认培养基的内部是否达到了相应的灭菌效果(特别是灭菌体积较大、容器密闭的情况下，更需要注意检测容器内部是否达到了相应的灭菌效果)。密封的玻璃管装灭菌指示剂使用后直接置于55℃培养不超过7天即可，观察是否有变黄现象出现。未使用的保存管应置于冷藏保存(若储存环境温度过高会导致芽孢萌发，培养基变黄)。

无菌技术：实验室中的微生物控制艺术 𐟧슦— 菌技术，简单来说，就是防止外界微生物侵入，并保持已灭菌物品和无菌区域不被污染的方法。它的主要目的是保护实验室的培养物不被其他微生物污染，同时避免操作者被微生物感染。核心思想就是确保实验的纯度和安全性。消毒的那些事儿 𐟧𜊦𖈦˜隸…洁的升级版，主要目的是杀死或去除有害微生物。常见的方法有：煮沸消毒法：把东西放在100℃的沸水里煮5-6分钟，适用于一般物品。巴氏消毒法：在70-80℃的温度下煮30分钟，适用于一些不耐高温的物品。化学药剂消毒法：用酒精、氯气等化学物质擦拭或浸泡，适用于表面或内部的消毒。紫外线消毒法：用紫外线灯照射30分钟，适用于接种室、接种箱等。灭菌的多种方式 𐟔劧�Œ是更彻底的消毒方法，主要目的是杀死所有微生物，包括芽孢和孢子。常见的方法有：灼烧灭菌：用酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧接种环、接种针等金属用具。干热灭菌：在160-170℃的温度下加热1-2小时，适用于玻璃器皿、金属用具等。湿热灭菌：利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌，其中高压蒸汽灭菌是在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30分钟。实用小贴士 𐟒ኧ”詅’精消毒时，体积分数为70%的酒精效果最好，因为浓度过高会形成保护膜，酒精无法渗入；浓度过低则杀菌力减弱。在使用前，可以用紫外线照射接种室、接种箱和超净工作台，以杀死物体表面或空气中的微生物。适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等可以加强消毒效果。高压蒸汽灭菌前，一定要排尽锅内的冷空气，因为含有空气的蒸汽温度低于饱和蒸汽的温度。灭菌完毕后，要待压力降到0时才可打开排气阀，否则会导致容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，从而造成污染。通过这些方法和技术，我们可以确保实验室的清洁和安全，保护我们的实验结果不受污染的影响。无菌技术不仅是实验室的必备技能，也是科学研究的基础保障。𐟧찟’ꀀ

实验室制备培养基的基本要求与步骤培养基的实验室制备是微生物检验的基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分时，尤其是含有毒物质（如胆盐或其他选择剂）的成分，必须遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。以下是制备培养基的一般要求和具体步骤。水的要求 𐟒犥ꌧ”覰𔧚„电导率在25℃时不应超过25/cm（相当于电阻率>0.4Mm），除非另有规定要求。水的微生物污染不应超过103CFU/mL，应按GB 4789.2，采用平板计数琼脂培养基，在36℃ⱱ℃培养48hⱲh进行定期检查微生物污染。称重和溶解 ⚖️ 称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末），先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。 pH的测定和调整 𐟌᯸ 用pH计测pH，必要时在灭菌前进行调整，除特殊说明外，培养基灭菌后冷却至25℃时，pH应在标准pHⱰ.2范围内。一般使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度约为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调整培养基pH。如需灭菌后进行调整，则使用灭菌或除菌的溶液。分装 𐟓报𐆩…好的培养基分装到适当的容器中，容器的体积应比培养基体积最少大20%。灭菌方法 𐟔劥Ÿ𙥅𛥟𚥺”采用湿热灭菌法或过滤除菌法。某些培养基不能或不需要高压灭菌，可采用煮沸灭菌；有些试剂则不需灭菌，可直接使用（参见相关标准或使用说明）。湿热灭菌 𐟧Š 湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行，高压灭菌一般采用121℃ⱳ℃灭菌15min，具体培养基按食品微生物学检验标准中的规定进行灭菌。培养基体积不应超过1L，否则灭菌时可能会造成过度加热。所有的操作应按照标准或使用说明的规定进行。加热后采用适当的方式冷却，以防加热过度。这对于大容量和敏感培养基十分重要，例如含有煌绿的培养基。过滤除菌 𐟧𜊨🇦𛤩™䨏Œ可在真空或加压的条件下进行。使用孔径为0.2的无菌设备和滤膜。消毒过滤设备的各个部分或使用预先消毒的设备。一些滤膜上附着有蛋白质或其他物质（如抗生素），为了达到有效过滤，应事先将滤膜用无菌水润湿。检查 𐟔 应对经湿热灭菌或过滤除菌的培养基进行检查，尤其要对pH色泽、灭菌效果和均匀度等指标进行检查。

常见灭菌消毒方法及适用场景灭菌消毒是确保医疗安全和卫生的重要环节，以下是几种常见的灭菌方法及其适用场景： 𐟔堩똥Ž‹灭菌 - 适用于大多数医用物品，如手术器械、消毒衣巾及布类敷料等。 𐟧ꠥŒ–学气体灭菌 - 适用于不耐高温、湿热的材料，如电子仪器、光学仪器、导管等橡胶制品。 𐟍𒠧…𘦳• - 适用于金属器械、玻璃制品及橡胶类物品。 𐟒‰ 药液浸泡法 - 用于锐利手术器械、内镜等。 𐟌᯸ 干热灭菌法 - 适用于耐热、不耐湿，蒸汽或气体不能穿透的物品，如玻璃、粉剂、油剂等。 ☢️ 电离辐射法 - 应用于无菌医疗耗材（如注射器、丝线等）以及某些药品。这些方法各有特点，选择合适的灭菌方法可以有效确保医疗设备和物品的清洁和安全。