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云课堂直播回顾来啦! 网页链接 [星星]课堂主题:Cre-loxP原理及工具鼠应用要点 [纸飞机]与Cre病毒结合的病毒有哪些?能够结合的原理是什么? [纸飞机]Cre鼠不纯和也可以发挥作用吗? [纸飞机]Cre酶在繁育的过程中会不会降低活性? 就让小助理带大家一起回顾一下本次课程的精彩问答吧! 「科研超话生物医药超话」「动物模型」「cre」
샲e-loxp系统与敲除鼠模型 觔物学研究中,为了深入理解特定基因在组织中的功能,科学家们会利用组织特异性敲除鼠模型。这种模型通过Cre-loxp系统实现,它允许研究者精确控制基因敲除的时间和空间。튊 例如,有些基因在胚胎时期全身性敲除可能导致发育不良甚至胚胎死亡。为了避开这种风险,同时探究该基因在特定组织中的作用,科学家们会选择使用Cre-loxp系统来创建组织特异性敲除鼠。ኊ过这种系统,我们可以像春天欣赏盛开的玫瑰和牡丹一样,仔细观察生物体内的基因表达与调控,为科学探索带来新的视角。슊ᠦ示:探索生物学的奥秘,需要精细的实验设计和严谨的科学方法。Cre-loxp系统正是这一探索过程中的重要工具之一。
Cre-loxP:基因编辑神器 Cre-loxP系统是一种非常强大的位点特异性重组系统,它在基因打靶和基因编辑中有着广泛的应用。这个系统的工作原理其实并不复杂,但它的效果却非常惊人。 Cre-loxP系统在基因打靶中的应用 首先,让我们来看看Cre-loxP系统在基因打靶中的使用方法。通常,这个过程分为两个主要步骤。第一步是在胚胎干细胞的基因组中引入loxP序列。这个序列就像是一个标记,告诉细胞在哪里进行重组。接下来,通过Cre介导的重组来实现靶基因的遗传修饰或改变。 这个过程可以在细胞水平上进行。你可以通过转染Cre重组酶表达质粒到靶细胞中,让Cre酶识别并结合loxP位点,从而将抗性标记基因切除。也可以在个体水平上进行,通过将重组杂合子小鼠与Cre转基因小鼠杂交,筛选出删除外源标记基因的条件性敲除小鼠。还有一种更高级的方法,就是将Cre基因置于可诱导的启动子控制下,通过诱导表达Cre重组酶,将loxP位点之间的基因切除,实现特定基因在特定时间或组织中的失活。 Cre-loxP系统的分子机制 슊那么,Cre-loxP系统是如何工作的呢?它的分子机制主要包括Cre酶的识别与结合、分子重组与解旋。Cre酶能够识别并结合loxP位点,诱导位于这两个位点之间的DNA重组。这个过程导致两个loxP位点之间的DNA序列被删除、反转或易位。 Cre-loxP系统的优点 Cre-loxP系统的优点包括高效性、时空特异性和应用范围广。它不仅可以实现目的基因在特定组织中的改造,还可以实现目的基因在特定时间的表达。具体的方法就是更加精准的诱导型Cre-loxP系统。 总结 总的来说,Cre-loxP系统是一个非常强大且灵活的工具,它在基因编辑和基因打靶中有着广泛的应用。无论是在细胞水平还是个体水平,它都能帮助我们精确地操控基因,为科研和医学研究提供了无限可能。
Cre-LoxP:植物基因编辑神器 ### Cre-LoxP系统简介 𑊊Cre-LoxP系统是一种在基因编辑中非常强大的工具,它主要由两部分组成:Cre重组酶和LoxP位点。Cre重组酶是一种由噬菌体P1编码的38kDa的单体蛋白,而LoxP位点是该酶的特异性识别序列,由两个反向的13bp回文序列和一个8bp的间隔序列构成。这个系统可以在LoxP位点之间进行DNA切割和重连,从而实现精准的基因编辑。 基因敲除的原理 ꊊ基因敲除的原理就是利用Cre-LoxP系统对目的基因进行特异性重组。具体来说,研究人员会在目的基因的两端分别插入两个LoxP位点。当携带Cre重组酶的载体转染进入细胞或动物模型后,Cre重组酶就会在两个LoxP位点之间切割DNA,导致目的基因被删除或重排,从而实现基因敲除。 实验步骤 ꊦ建含有LoxP位点的基因序列:在体外构建一个基因序列,该序列在目的基因的两端分别含有一个LoxP位点。 将基因序列转入胚胎干细胞:将体外构建好的基因序列转入胚胎干细胞内,使其通过同源重组替代细胞基因组内原来的基因序列。 将处理后的胚胎干细胞植入假孕小鼠子宫:经过这样处理的胚胎干细胞被重新植入到假孕小鼠的子宫内,使其重新发育成为一个完整的胚胎,最终成为一只转基因小鼠。 获得Cre重组酶转基因小鼠:第二只转基因小鼠一般通过卵母细胞注射或胚胎干细胞技术获得,在这只小鼠中,Cre重组酶被置于某特定基因启动子的调控之下,使其能在特定条件下表达。 两只小鼠交配:让含有LoxP位点的转基因小鼠和Cre重组酶转基因小鼠进行交配,产生的子代小鼠会同时含有上述两种基因型。 注意事项 ⚠️ 这只是一个基本的实验流程,具体的实验步骤可能会因实验目的、实验条件和实验材料的不同而有所调整。同时,该实验涉及动物实验和基因操作,要遵守相关的伦理和法规。 希望这些信息对你有帮助!如果你有任何问题或需要进一步的指导,欢迎随时交流! 🀀
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