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细胞因子流式测定新上映_细胞因子流式测定结果怎么看(2024年12月抢先看)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：导读更新日期：2024-12-02

细胞因子流式测定

流式检测必备细胞标志物清单 𐟧𛊥䩧𛙥䧥ˆ†享一些流式检测中常用的细胞标记物，特别适合科研小伙伴们哦！𐟓š 肿瘤细胞大多数肿瘤都是上皮来源的，常见的标记物有 pan-ck（广谱角蛋白）和 EPCAM（上皮细胞粘附分子）。免疫细胞免疫细胞包括 T 细胞、巨噬细胞、B 细胞、自然杀伤细胞（NK）和肿瘤相关中性粒细胞等。这些细胞参与肿瘤免疫反应，影响肿瘤微环境，调控肿瘤的生长和转移。 T 细胞 T细胞是细胞免疫的主要执行者，它们的正常功能对人类抵御疾病非常重要。常见的 T 细胞标记物有： CD3：通用 T 细胞标志物 CD8+ T 细胞（细胞毒性 T 细胞） CD4+ T 细胞（调节辅助性 T 细胞） Foxp3 Treg（调节型 T 细胞） B 细胞 B细胞在受到病原体侵入时，会分化为浆细胞，浆细胞可合成和分泌抗体，执行体液免疫。常见的 B 细胞标记物有： CD19 CD20 CD21 巨噬细胞巨噬细胞是促进炎症反应的关键细胞之一，分为 M1 和 M2 两种类型。常见的巨噬细胞标记物有： CD68（泛指所有巨噬细胞） CD80（M1 型巨噬细胞） iNOS（M1 型巨噬细胞） CD206、CD204、CD163（M2 型巨噬细胞） NK 细胞 NK 细胞是一类固有淋巴样细胞，无需抗原预先致敏，就能自发地杀伤靶细胞。常见的 NK 细胞标记物有： CD16 CD56 CD57 CD59 CD11b CD94 免疫靶点一些重要的免疫靶点包括： PD-1 PD-L1 CTLA-4 TIM3 LAG3 内皮细胞肿瘤血管内皮细胞受到肿瘤细胞分泌的多种细胞因子及信号通路的调控，为肿瘤提供生长所需的氧气和营养，也为肿瘤转移提供了途径。常见的内皮细胞标记物有： CD31 CD146 CD105 肿瘤成纤维细胞癌症相关成纤维细胞（CAF）通常被认为是在肿瘤组织内部和周围发现的所有成纤维细胞。常见的 CAF 标记物有： SMA FAP Vimentin S100A4 希望这些标记物能帮到大家在做流式检测时的实验设计哦！𐟒ꀀ

中文名：AF488-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L) 激发波长(nm)：499 发射波长(nm)：520 AF488-标记羊抗鼠免疫球蛋白(H+L)是一种荧光标记的二抗，具有特定的激发波长499nm和发射波长520nm，呈现出明亮的绿色荧光。该抗体能够与多种鼠来源的蛋白结合，包括免疫球蛋白、细胞因子等，常用于免疫荧光实验和流式细胞术中，用于目标分子的定位、定量和定性分析。该抗体由羊抗鼠免疫球蛋白与AF488荧光染料偶联而成，具有高荧光强度、稳定性好和背景信号低等优点。

医学生的科研之路：从基础到临床最近，我一直在思考基础研究的分类，觉得有必要和大家分享一下。毕竟，对于医学生来说，科研是一条必经之路。现象型科研：从临床到实验室 𐟏尟”슧Ž𐨱ᥞ‹科研，简单来说，就是从临床中发现一些有趣的现象，然后通过实验来探索这些现象背后的机制。举个例子吧，我们在临床上发现某种药物对某种疾病的治疗效果特别好，那么我们就会想进一步了解为什么这个药这么有效。于是，我们会取患者的组织或外周血进行检测，比如用多组学手段或者流式细胞术来分析这些现象背后的原因。可能你会发现某些细胞、某个通路或者某些细胞因子是这个疗效的关键。这种科研的难点在于，你需要从多个角度、大量的样本和多种实验层面来证明这个现象是普遍存在的，而不是某个患者特有的。现象型科研非常适合临床医生来做，因为它最符合从临床出发再回归临床的路径。通过这种方式，我们可以更好地训练自己从临床中发现问题并解决问题的能力。而且，这种研究还可以引导基础研究者们进一步探索这些现象背后的深层机制。应用型科研：转化医学的起点 𐟚€𐟔슥𚔧”襞‹科研则更注重某个应用型产物（比如某种材料、细胞或药物）在某种疾病中的应用效果和安全性。最常见的论文设计是这样的：先得到这个应用型产物，然后建立疾病小鼠模型，再用这个产物去治疗小鼠模型，看看能不能改善疾病症状、病理改变或者细胞水平上的变化。这种研究的难度相对较低，模式化较强，上手也比较容易。虽然不需要非常强的科研思维，但它非常实用，最接近转化医学的道路。关键在于这个应用型产物的筛选和制备要有很强的转化价值。机制型科研：探索未知的领域 𐟌𐟔슦œ€后一种是机制型科研，这种研究的难度非常大。它不仅要深入剖析是什么原因导致了通路的调控，进而影响到了细胞的功能和疾病的发生发展，还需要强大的理论背景和耗时较长的研究周期。基本上，这种研究是由纯基础研究者来做的。对于临床医生来说，机制型科研可能不是最合适的道路。要么你可能会因为泡在实验室里太久而逐渐丧失临床技能，要么就搞不出真正有意义的东西，甚至连基本的发文和评职称都成问题。所以，我觉得这种专业的事还是交给专业的人来做吧。总的来说，每种科研类型都有其独特的价值和挑战。希望这些思考能对大家有所帮助！

单核/巨噬细胞流式分析：新手必读指南 𐟑‹大家好，今天我们来聊聊单核/巨噬细胞流式分析的基础知识，适合新手小白哦！单核细胞的基本知识 𐟧 单核细胞在人体内可是个勤奋的小家伙，它们在脉管系统、骨髓和脾脏中不停地循环。在正常情况下，它们不会增殖，但一旦迁移到外周组织，就会分化成树突状细胞或巨噬细胞。单核细胞的特性是它们具有可塑性和异质性，能够快速调整功能表型来适应环境的变化。单核细胞的培养 𐟧늊想要研究单核细胞，首先得把它们从血液或其他组织中分离出来。你可以用阴选试剂盒从 PBMC 中分离出有活性的单核细胞，也可以用 CD14、CD64 和 CD192 作为标志物进行流式分选。原代人单核细胞可以在体外培养，但在 5 天内会在血清或 M-CSF 存在下开始分化为巨噬细胞。单核细胞以粘附和非粘附细胞混合形式生长，比例取决于培养基和刺激因子。除了原代单核细胞，THP-1 细胞系也常用于研究。它们特别依赖细胞浓度，ATCC 建议的浓度是 10E5~10E6/mL。状态不好的 THP-1 培养 3 天后数量不多，继续培养 1~2 天，培养基会严重泛黄。THP-1 适合在 pH 偏酸性环境生长，对培养基很敏感，不宜频繁换液，尽量用相同酸碱度的 1640 培养基。复苏 THP-1 细胞有难度，建议冻存时密度大些，复苏时用小培养瓶。流式分析巨噬细胞的注意事项 𐟎在分析巨噬细胞时，首先要处理组织，比如解剖、研磨、剪碎等，然后酶消化制备单细胞悬液。在上机检测前建议将样本过滤，保证准确性，还能避免堵管。单核细胞可以用特殊分化培养基分化为巨噬细胞，用 GM-CSF 和 M-CSF 能让单核细胞分化。在 1640 培养基中刺激单核细胞，添加相应物质能导致 M1 或 M2 极化。还可以用不同细胞因子先后刺激单核细胞来获得 M1 和 M2 极化。用 PMA 刺激 6 小时能诱导 THP-1 来源的巨噬细胞，然后继续培养能让其向 M1 或 M2 极化。希望这些基础知识能帮到你们，赶紧动手试试吧！𐟒ꀀ

巨噬细胞M1/M2极化实验详解巨噬细胞是一类位于外周血和炎症组织中的白细胞，属于免疫细胞中的单核细胞类群。它们主要通过吞噬细菌、死亡细胞或细胞残片来参与非特异性免疫调节。巨噬细胞将信号传递给其他淋巴细胞及其他免疫细胞，从而参与特异性免疫调节。巨噬细胞通常以单核细胞前体的形式进入血液中，当单核细胞浸润到组织中时，会分化成巨噬细胞。巨噬细胞主要存在于淋巴结、肺泡壁、骨髓、肝脏以及脾脏等组织中。根据功能以及炎症分泌水平，巨噬细胞分为M1型和M2型两种亚群。 M1巨噬细胞主要由LPS（脂多糖）及IFN𜈥𙲦‰𐧴 𜉦🀦𔻯𜌥ˆ†泌IFN-𜈥𙲦‰𐧴 𜉣€TNF-𜈨‚🧘䥝死因子𜉧퉤🃧‚Ž症因子。M2巨噬细胞主要由IL4（白细胞介素4）、IL13（白细胞介素13）、M-CSF（巨噬细胞集落刺激因子）等激活，主要分泌IL10（白细胞介素10）等抗炎症因子。巨噬细胞的鉴定方式主要有流式细胞术和免疫荧光实验，通过一些巨噬细胞标志物进行鉴定。常见的人和小鼠M1巨噬细胞标志物有CD68、CD80、CD86、CD32等；常见人和小鼠M2巨噬细胞标志物有CD206、CD204、CD163等。 M1和M2巨噬细胞的作用包括：①作为抗原提呈细胞；②杀伤肿瘤效应细胞；③通过释放溶解细胞酶直接杀伤肿瘤细胞；④处理和呈递肿瘤抗原，激活T细胞以产生特异性抗肿瘤细胞免疫应答；⑤通过特异性抗体介导ADCC效应杀伤肿瘤细胞；⑥分泌肿瘤坏死因子（TNF）等细胞毒性因子和产生超氧化代谢产物间接杀伤肿瘤细胞。在基础科学实验中，常用的细胞模型有小鼠RAW264.7巨噬细胞、人THP1单核细胞、小鼠BMDM骨髓细胞等。动物实验研究巨噬细胞的造模更多是偏向于炎症模型，例如急性肺损伤模型。 THP-1（人单核细胞） THP-1是来自急性单核细胞白血病患者血液分离而来，在基础科研实验中，常常诱导分化为巨噬细胞来进行机制研究。THP-1通常受PMA（佛波酯）150nmol/L诱导24h即可分化为巨噬细胞，然后在PMA持续存在的情况下，LPS（100ng/ml）、IFN𜈲0ng/ml）诱导48h，产生M1巨噬细胞；IL4（20ng/ml）、IL13（20ng/ml）诱导48h，产生M2巨噬细胞。 RAW264.7细胞（小鼠单核巨噬细胞） RAW264.7细胞是主要炎症模型、巨噬细胞极化等体外研究细胞，广泛用于急性肺损伤、风湿性关节炎等模型中。LPS（200ng/ml），12h可以诱导此细胞向M1分化，产生炎症因子，10ng/ml IL-4诱导RAW264.7细胞12h可以产生M2细胞。通过这些实验方法，可以更好地研究巨噬细胞的功能和作用，为免疫学和疾病治疗提供更多依据。

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