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融合蛋白最新视觉报道_融合蛋白是什么意思(2024年12月全程跟踪)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：热点更新日期：2024-12-02

融合蛋白

质粒标签大揭秘：你知道几种？ 𐟌 在分子生物学研究中，质粒标签扮演着至关重要的角色。它们不仅帮助我们识别和纯化目标蛋白，还提供了丰富的信息来研究蛋白质的功能和相互作用。今天，我们就来聊聊质粒上常见的六种标签，它们各自的独特之处和用途。 1️⃣ MBP标签 𐟐„ MBP（麦芽糖结合蛋白）标签常用于蛋白质的纯化和检测。它的亲和力强，能有效地将目标蛋白从复杂的混合物中分离出来。 2️⃣ STREP标签 𐟌🊓TREP（链霉亲和素）标签因其高亲和力和稳定性而备受青睐。它在生物化学和分子生物学实验中广泛用于蛋白质的纯化和标记。 3️⃣ GST标签 𐟧슇ST（谷胱甘肽S转移酶）标签通常与GST融合蛋白一起使用，通过谷胱甘肽的亲和力来纯化目标蛋白。它在药物研发和蛋白质功能研究中非常有用。 4️⃣ HIS标签 𐟏… HIS（组氨酸）标签因其与金属离子的高亲和力而受到青睐。它在蛋白质纯化过程中特别有用，可以通过金属离子亲和层析来高效地分离目标蛋白。 5️⃣ MYC标签 𐟦 MYC标签常用于基因表达和蛋白质定位的研究。通过融合MYC标签，我们可以观察目标蛋白在细胞内的分布和表达情况，从而了解其功能。 6️⃣ FLAG标签 𐟚銆LAG标签因其简单、稳定而受到研究人员的喜爱。它常用于蛋白质的免疫检测和纯化，通过与抗FLAG抗体的结合来识别和分离目标蛋白。这些质粒标签各有千秋，它们在分子生物学研究和生物技术应用中发挥着重要作用。了解这些标签的特性和用途，将有助于你更好地设计和执行实验，深入探索生命科学的奥秘。

SUMO酶指南：酶切奥秘在生物学的世界里，酶切反应是揭示蛋白质结构的关键步骤。𐟔頦Ž⧴⥐ˆ适的酶切比例和条件，是每个实验者的必经之路。𐟌 𐟔젩…𖥈‡小试：为了确保酶切反应的有效性，我们首先需要进行小规模的试验。𐟧꠩€š过调整酶切比例，我们能够找到最佳的酶切条件，确保目标蛋白被完全酶切。 𐟓Š 反应效率：在实验中，至少需要2微克的蛋白质作为起始量，这样通过SDS-PAGE电泳，我们能够清晰地观察到酶切的效率，并确认融合蛋白是否完全酶切。 𐟌Ÿ 实验分享：在实验室里，我们使用SUMO酶切了多个蛋白，结果令人满意。这证明了SUMO酶在蛋白质结构研究中的可靠性和实用性。 𐟓⠦Ž⧴⦛𔥤š：想要了解更多关于SUMO酶的信息，就赶快行动吧！𐟏ƒ‍♀️ 我们期待你的发现和反馈，共同推动科学研究的进步。

实时快报：【「智飞生物：重组结核杆菌融合蛋白(EC)继续纳入国家医保目录」】云财经讯，智飞生物 sz300122（300122）11月28日晚间公告，公司全资子公司安徽智飞龙科马生物制药有限公司的重点产品重组结核杆菌融合蛋白（EC）（商品名：宜卡）纳入《2024年国家医保目录》。重组结核杆菌融合蛋白（EC）适用于结核杆菌感染诊断。

亚细胞定位实验常见问题解答什么是亚细胞定位？亚细胞定位是指生物大分子物质或脂类在细胞内的具体位置。蛋白质在细胞质中合成后，通过蛋白质分选信号被转运到特定的亚细胞结构中，参与细胞的各种生命活动。这个过程称为蛋白质亚细胞定位。实验原理利用GFP、RFP等荧光蛋白的独特荧光性质和灵敏性，可以示踪细胞内的蛋白。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或C端融合，通过瞬转或稳转，使融合蛋白在受体材料细胞内表达。目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器。经过激光共聚焦显微镜激光照射，荧光蛋白会发出荧光，通过观察荧光蛋白在细胞内显示的位置，可以确定目标蛋白的亚细胞定位情况。常见问题构建亚细胞定位载体时，GFP融合位置为什么有N端、C端之分？如果序列中存在信号肽，构建载体时需避开这一端来融合荧光蛋白。不同的融合方式可能会得到不同的定位结果，例如融合在荧光蛋白N端的目标蛋白一般无法得到过氧化物酶体的定位结果；融合在荧光蛋白C端的目标蛋白一般无法得到线粒体、质体的定位结果。为什么不同的受体材料有时得到的定位结果不一样？不同物种的细胞在翻译表达基因时，其表达模式和影响因子不同。受物种差异的影响，同一个载体在不同的受体材料中表达的位置可能不同，因此建议实验时尽可能选用与目的基因来源相近的受体材料进行表达。为什么要提供GFP空载的对照图片？作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。作为载体体系的参照，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。拍摄时为什么有明场通道？显示细胞状态，有活力的细胞应该有正确且明显的细胞形态，变形或破碎的细胞说明此时细胞不是最适状态或细胞已死亡。显示荧光确实是细胞内蛋白表达的，而不是细胞碎片及杂质产生的杂光。为什么不先对基因做预测，在预测的结果上直接做共定位？不同的预测网站有不同的计算方法，同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的，对于不清楚可能定位在哪里的基因，一般推荐先做普通定位，根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。适用于什么实验场景？基因功能研究：文章里总少不了这一项。研究蛋白相互作用：与酵母双杂实验结果相互验证。

𐟧如何解读GST-pulldown结果？ 𐟔 GST-pulldown实验是一种强大的技术，用于研究蛋白质间的相互作用。通过这个实验，我们可以发现与已知蛋白质有相互作用的未知蛋白质。 𐟒ᠥꌧš„基本原理是：将诱饵蛋白与GST标签融合，并通过细菌表达系统进行纯化。然后，将猎物蛋白的溶液与这些GST融合蛋白混合。如果猎物蛋白与诱饵蛋白有相互作用，那么它就会被沉淀下来。 𐟓 实验步骤包括： 1️⃣ 蛋白提取与浓度测定； 2️⃣ pull-down实验，包括磁珠准备、结合诱饵蛋白、结合互作蛋白以及洗脱等步骤； 3️⃣ pull-down后的Western blot检测。 𐟌Ÿ 通过这个实验，我们可以明确地检测到两个蛋白的直接互作关系。而且，实验操作简便，结果也十分明确。 𐟔젧Ž𐥜诼Œ你是否对GST-pulldown实验有了更深入的了解呢？如果你需要进一步的帮助或想了解更多细节，随时都可以咨询我们哦！

萤火素酶互补实验技术全攻略 𐟔 实验细节解析 𐟓– 表达载体的选择构建成功的重组质粒是实验成功的关键。目标基因与报告基因必须在同一个阅读框，这是首要条件。其次，选择正确的融合位置也很重要。例如，NLuc通常位于目标蛋白的C末端，而CLuc可以位于N末端或C末端。为了更精确地检测NLuc和CLuc，表达载体中加入了3XHA标签，方便用HA抗体检测。 𐟔砨ᨨ𞾨𝽤𝓧š„构建随着克隆技术的进步，推荐使用In-Fusion反应进行载体构建，具体方法可参考试剂盒说明书。 𐟓Š 正负对照的设置每次实验都应设置正负对照以确保实验体系的可靠性。正对照可以选择已经发表的互作蛋白质对。负对照则应选用与待检测蛋白具有相似亚细胞定位但不互作的蛋白质，或者选择没有活性的突变蛋白。 𐟔 蛋白检测的重要性只有当融合蛋白正确表达时，才能判断目标蛋白之间是否存在相互作用。如果待测蛋白没有互作，即使正负对照都正常表达，也需要用WB检测待测目标蛋白质对在瞬时表达体系中的表达及表达丰度。 𐟔젥䧨焦表›‹白质互作的筛选和验证 LCA技术可以定性检测和定量检测蛋白质的互作，为大规模筛选和验证提供有力工具。

8周CRISPR项目记在2021-2022年的CMRI暑期科研项目中，我参与了一个8周的CRISPR基因编辑项目。主要任务是利用PCR筛选CRISPR基因编辑成功的HeLa克隆细胞系，目标是插入目标mAID在BRG1蛋白羧酸C端（对应基因片段的3‘端）。这个项目旨在帮助我的导师建立一个能高效降解BRG1的细胞系，以便研究该蛋白在细胞表观遗传学领域的作用，特别是在细胞周期如DNA复制S-期或G1 origin firing等方面的调控和影响。我们复现了2021年Nature structural & molecular biology上发表的论文，利用CRISPR经典HITI（homology independent targeted insertion）方法进行基因编辑。具体来说，我们通过转染两个表达Cas9的质粒，以及与BRG1最后一个intron内含子互补配对的gRNA，造成两个双链断裂，从而切割掉包含最后一个exon外显子的片段。然后，我们利用带有模版的质粒转染，利用NHEJ的修复机制插入mAID，让终止密码子后移，从而表达一个带有mAID的BRG1融合蛋白。基因编辑并不是一件容易的事。虽然我们只用了三个质粒，但并不是所有的细胞都被成功转染。转染成功的细胞也不一定会按照我们的希望去插入目标基因片段修复。BRG1作为SWI/SNF染色质重塑蛋白的ATPase水解酶催化活性亚基，基因高度保守，需要三个等位基因都被编辑成功，才能算作是得到了homozygous纯和的克隆，稳定遗传给子代，建立一条细胞系。最终，我们筛了127个克隆，才找到了三个纯合子。这个过程不仅需要耐心和毅力，还需要对科研的热爱和对细节的关注。科研背后的心酸和挑战只有真正经历过的人才能体会。

【9.38亿美元！「东阳光药」FGF21/GLP-1双特异性「融合蛋白」授权出海】 11月12日，Apollo Therapeutics宣布已与东阳光药（Sunshine Lake）就APL-18881（HEC88473）的开发达成独家许可协议。 APL-18881是东阳光药开发的一种靶向FGF21受体和GLP-1受体的双特异性融合蛋白。根据协议条款，东阳光药将保留APL-18881在中国的开发、生产和商业化权利，并授予Apollo Therapeutics该药物在全球其他地区开发、生产和商业化所有当前和未来适应症的权利。作为回报，东阳光药将获得预付款1200万美元和高达9.26亿美元的开发、监管和商业里程碑付款。商业里程碑付款取决于主要市场达到规定的年度销售门槛的情况。此外，东阳光药将获得从高个位数到低两位数的净销售额的分层特许权使用费。 Apollo Therapeutics正在构建一个庞大且多元化的新型候选药物管线，APL-18881将是其推进至临床开发阶段的第5个项目。APL-18881已在美国递交新药临床试验申请（IND），Apollo Therapeutics将在临床试验中探索该药物在心脏代谢、肝脏和相关疾病领域的一系列潜在适应症的治疗潜力，具体适应症尚未披露。目前，APL-18881正在中国开展一项针对2型糖尿病患者的双盲、安慰剂和阳性药物对照II期临床试验，预计将于2025年上半年获得主要结果。该候选药物已在澳大利亚和中国成功完成了在健康和肥胖受试者以及2型糖尿病患者中进行的两项I期临床试验。试验数据表明，APL-18881在治疗剂量下均具有可接受的安全性和耐受性以及良好的药效。东阳光药与Apollo Therapeutics都计划在2025年继续或启动临床概念验证研究。东阳光药与Apollo Therapeutics在APL-18881项目上的合作标志着东阳光药在新型生物药方面的首次国际合作伙伴关系，进一步强调了东阳光药对全球化的承诺。

融合基因在软组织肿瘤诊断中的价值 𐟌Ÿ ### 粘液样脂肪肉瘤（Myxoid Liposarcoma） 𐟐𗊊粘液样脂肪肉瘤（MLPS）是软组织肿瘤中的一种，大约90%的MLPS具有t (12；16)(q13；p11)易位，这会导致FUS::DDIT3融合基因的形成。此外，还有约3%的MLPS具有t (12；22)(q13；q12)易位，这会形成EWSR1::DDIT3融合。DDIT3是一种参与脂肪细胞分化的DNA结合转录因子，而嵌合癌蛋白会改变转录并阻断脂肪细胞分化。滑膜肉瘤（Synovial Sarcoma） 𐟐𔊊滑膜肉瘤（SS）具有特异的t (X；18)(p11.2；q11.2)易位，这会导致X染色体上的SSX基因（SSX1、SSX2或SSX4）与18号染色体上的SS18融合。大约三分之二的SS病例具有SS18::SSX1融合，三分之一具有SS18::SSX2融合，而罕见病例则具有SS18::SSX4融合。SS18::SSX作为癌基因发挥作用，其表达是维持SS细胞转化表型所必需的。腺泡状横纹肌肉瘤（Alveolar Rhabdomyosarcoma） 𐟏‹️‍♂️ 腺泡状横纹肌肉瘤（ARMS）约85%含有特异性融合基因，其中PAX3::FOXO1和PAX7::FOXO1融合基因分别占70-90%和10-30%。PAX::FOXO1融合蛋白作为癌蛋白发挥作用，通过激活许多下游靶基因，如MET、ALK、FGFR4，影响生长、存活、分化和其他信号通路。梭形细胞/硬化性横纹肌肉瘤（Spindle Cell/Sclerosing Rhabdomyosarcoma） 𐟏‹️‍♀️ 梭形细胞/硬化性横纹肌肉瘤（RMS）分为两种类型：先天性/婴儿梭形细胞RMS：显示VGLL2、SRF、TEAD1、NCOA2和CITED2基因融合。大多数梭形细胞/硬化性RMS：显示MYOD1基因突变。孤立性纤维瘤（Solitary Fibrous Tumor） 𐟐𞊊所有孤立性纤维瘤（SFT）显示染色体12q的脑室旁反转，导致NAB2和STAT6基因的融合。NAB2::STAT6基因融合的过表达可诱导培养细胞增殖并激活EGR反应基因的表达，是SFT的决定性驱动变异。IHC：NAB2::STAT6融合导致STAT6的核表达，因此，STAT6免疫组化是所有融合的敏感和特异性替代物。

中文名称：生物素-四聚乙二醇-甲基四嗪英文名称：Biotin-PEG4-methyltetrazine CAS号：1835759-81-3 分子式：C27H39N7O6S 分子量：589.7 Biotin-PEG4-methyltetrazine是一种生物连接分子，由生物素（Biotin）、聚乙二醇（PEG）和甲基四唑（methyltetrazine）组成。它具有高度的特异性和稳定性，可以作为连接剂将抗体、蛋白质、核酸等生物分子连接在一起，形成复合物或融合蛋白。此外，它还可以作为稳定剂，提高生物分子的稳定性和保存期。Biotin-PEG4-methyltetrazine被广泛应用于细胞培养、蛋白质标记、亲和层析等研究领域，并在免疫分析、生物传感器等领域具有重要的应用价值。 #试剂# #化学试剂# #科研试剂#