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mem培养基权威发布_mem培养基成分(2024年12月精准访谈)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：观点更新日期：2024-12-02

mem培养基

合成培养基常见问题解答 𐟌𑊥ˆ成培养基在细胞培养中扮演着至关重要的角色，但使用过程中可能会遇到一些常见问题。以下是关于合成培养基的一些关键理化性质和选择合适培养基的指导。 𐟌᯸ 理化性质 pH：大多数合成培养基的pH值在7.2～7.4之间。随着细胞数量的增加和代谢活动的加强，二氧化碳不断释放，培养液会变酸，pH值会发生变化。通常使用酚红作为pH指示剂。缓冲能力：细胞培养基通常采用NaHCO3-CO2缓冲系统，因此细胞代谢产生的CO2是造成培养液pH波动的主要物质。渗透压：大多数哺乳动物细胞的适宜渗透压在260～320 mOsm/kg的范围内。温度：过高温度可能导致营养成分的降解或破坏，影响培养基的pH、离子强度和电解常数pKa。 𐟔 如何选择合适的培养基？ MEM培养基：适用于各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养，是最基本且适用范围最广的细胞培养基。 RPMI-1640培养基：广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞以及杂交瘤细胞的培养。 DMEM培养基：适用于许多哺乳动物细胞培养。低糖型适用于依赖性贴壁细胞，特别适合生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞；高糖型适合高密度悬浮细胞培养。 DMEM/F-12培养基：将DMEM与F12按照1：1混合，营养成分丰富，适用于多种哺乳动物细胞的生长，包括MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞和大鼠成纤维细胞。 McCoy's 5A培养基：含有还原型谷胱甘肽、细菌蛋白胨以及高浓度的葡萄糖，广泛用于多种类型的原代细胞的培养，如骨髓、皮肤、牙龈、肾、脾、肺、大鼠胚胎、网膜等。 Ham's F-12K培养基：在Ham's F-12的基础上提高了氨基酸和丙酮酸的浓度，降低了葡萄糖的用量，并修改了盐的成分和含量。最初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。 IMDM培养基：用于培养红细胞前体细胞和巨噬细胞。在DMEM的基础上添加了硒、HEPES、丙酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素，营养非常丰富，适合快速增殖和高密度细胞培养。 Medium199培养基：含有独特的成分，包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶以及其他的维生素。最初用于鸡胚成纤维细胞的培养，现已广泛应用于各种动物细胞的培养，包括一些非哺乳类动物细胞。了解这些信息可以帮助你更好地选择和使用合成培养基，确保细胞培养的成功。

细胞培养基大揭秘：各种类型详解细胞培养基是细胞生物学研究的基础，不同的培养基适用于不同类型的细胞。以下是几种常见的细胞培养基及其特点： DMEM培养基 𐟧ꊄMEM培养基的氨基酸含量是MEM的两倍，维生素含量则是MEM的四倍，还含有硝酸铁、丙酮酸钠和一些补充氨基酸。DMEM分为低糖型和高糖型，葡萄糖含量分别为1ug/L和4.5ug/L。高糖型适合高密度悬浮细胞培养，也适用于附着性较差但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，还可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。 MEM培养基 𐟌𑊍EM培养基，又称低限量Eagle培养基，适合多种细胞单层生长，有可高压灭菌品种，是一种最基本、试用范围最广的培养基。 DMEM/Low glucose培养基 𐟍‡ DMEM/Low glucose培养基是由MEM培养基改良而来，低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。 Ham's F-12培养基 𐟌𜊈am's F-12培养基用于支持原代细胞的生长和分化。F-12K增加了氨基酸、丙酮酸、生物素、钙、镁、腐胺和酚红的含量。 McCoy's 5A medium培养基 𐟌🊍cCoy's 5A medium培养基是DMEM和F12的1:1混合物，能够在低血清条件下支持多种哺乳动物细胞的培养，如MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞和人内皮细胞等。 RPMI-1640 medium培养基 𐟒‰ RPMI-1640 medium培养基是在McCoy’5A的基础上进行改良研发出的，最初用于人白血病细胞的悬浮培养，后来发现也适用于HeLa、MCF-7、PC12、外周血单核细胞（B/T淋巴细胞）和星形细胞的培养。RPMI 1640与其他培养基的区别是含有还原型谷胱甘肽和高浓度维生素，还含有MEM、DMEM中不含的生物素、维生素B12和对氨基苯。这些培养基各有特色，适用于不同的细胞类型和研究需求。选择合适的培养基对于细胞培养的成功至关重要。

𐟧샡co-2细胞培养全攻略✨ 𐟔쥟𙥅𛥟𚥇†备： - 78% MEM培养基 - 20% 胎牛血清（FBS） - 1% 青霉素-链霉素（P/S） 𐟒‰清洗步骤： 1️⃣ 用酒精擦拭台面，取出细胞。 2️⃣ 镜下观察细胞密度达70%-80%。 3️⃣ 用真空泵吸出培养液，PBS清洗。 𐟌᯸消化过程： 1️⃣ 加入适量胰酶。 2️⃣ 放入培养箱，等待2-3分钟。 3️⃣ 观察细胞消化情况，准备离心。 𐟔„离心操作： 1️⃣ 加入完全培养基终止消化。 2️⃣ 轻轻吹打细胞，避免力度过大。 3️⃣ 将细胞悬液加入离心管，平衡后离心。 𐟌𑤼 代技巧： 1️⃣ 观察离心后细胞分布。 2️⃣ 轻柔吹打细胞悬液。 3️⃣ 根据传代比例，缓缓注入细胞。 4️⃣ 轻轻晃动培养瓶，使细胞分布均匀。 5️⃣ 放置于37℃，5%二氧化碳培养箱中培养4-8小时。 𐟒ᥰ贴士：操作过程中注意无菌操作，避免污染。定期检查培养箱环境，确保细胞生长最佳条件。

细胞培养基的选择指南 𐟌𑊧𛆨ƒž培养基是细胞生长和繁殖的基础，它们为细胞提供必要的营养和生长环境。通常，培养基包含碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水。以下是几种常见的培养基类型及其特点： DMEM 𐟧슄ulbecco's Modified Eagle Medium（DMEM）是最常用的改良式Eagle's培养基。DMEM与MEM含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。它主要用于快速生长的细胞，分为低糖（1000mg/L）和高糖（4500mg/L）两种。DMEM含有更高浓度的NaHCO3，需要用10%的CO₂来平衡，也可以在较低CO₂浓度下使用。DMEM-高糖适合高密度悬浮细胞培养，而DMEM-低糖则适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞。 MEM 𐟌𑊍EM（Minimal Essential Medium）是最基本的培养基，最初设计用于培养HeLa细胞和部分哺乳类成纤维细胞。MEM含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素，适合多种细胞单层生长。以MEM为基础，Stanner利用Earle's Balanced Salts和非必需胺基酸（NEAA）进一步配制成MEM-Alpha培养基，可广泛用于哺乳动物细胞的培养。 RPMI-1640 𐟧𔊒PMI-1640的营养成分相对简单，比DMEM少一点糖和谷光甘肽，广泛应用于许多种正常细胞和肿瘤细胞、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞、杂交瘤细胞的培养。其他如K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等也可使用RPMI-1640培养基。 DMEM/F12 𐟌🊆12培养基成分丰富，含有多种微量元素，与DMEM以1:1结合，称为DMEM/F12培养基，作为无血清培养基的基础。这种培养基适用于多种细胞的生长和繁殖。选择合适的培养基对于细胞的生长和实验的成功至关重要。希望这些信息能帮助你更好地选择适合你的细胞培养基！

细胞培养基的种类与选择指南细胞培养基的发展历程可以分为几个主要类型，包括平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基和限定化学成分细胞培养基。 1️⃣ 平衡盐溶液（BSS） BSS主要由无机盐和葡萄糖组成，它的作用是维持细胞的渗透压平衡，保持pH稳定，并提供简单的营养。它主要用于细胞的漂洗和配制其他试剂。D-Hank's和Hank's是两种常用的BSS配方，前者不含有Ca2+和Mg2+，常用于配制胰酶溶液，以避免细胞结团。Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5% CO2的培养条件。 2️⃣ 天然细胞培养基天然培养基来自动物体液或组织分离提取，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。它的优点是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前广泛使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液和促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞时也是必不可少的。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物，含有丰富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成0.5 %溶液（采用平衡盐溶液溶解）与合成培养基（如MEM细胞培养基）以1:1的比例混合使用。目前用于细胞培养的血清主要是牛血清，但也可以使用人血清或马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但也不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。此外，血清含一些对细胞产生毒性的物质，如多胺氧化酶，能与来自高度繁殖细胞的多胺反应（如精胺、亚精胺）形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长，甚至造成细胞死亡。目前，血清多作为一种添加成分与合成培养基混合使用，使用浓度一般为5 ~ 20 %，最常用是10 %。

𐟌Ÿ细胞培养基大揭秘：三种基础培养基详解！ 𐟌𑥟𙥅𛥟𚦘炙†胞培养环境中的核心成分，它为细胞生长提供必需的营养物质、生长因子和激素，并维持适宜的 pH 值和渗透压。今天我们来探索三种基本培养基：基础培养基、减血清培养基和无血清培养基。 𐟌🥟𚧡€培养基基础培养基包含细胞生长所需的多种营养成分，如氨基酸、维生素、无机盐和碳水化合物。大多数细胞系在基础培养基中能够良好生长，但通常需要添加血清。例如，DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种常见的基础培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。 𐟍€减血清培养基减血清培养基在基础培养基的基础上减少了血清的含量。Opti-MEM™ I 减血清培养基是一种改良的最低必需培养基 (MEM)，能使胎牛血清的添加量减少至少 50%，而不会影响细胞的生长速率或形态。这种培养基常与阳离子脂质体转染试剂（如 Lipofectamine™ 试剂）配套使用，以提高转染效率。 𐟌Š无血清培养基无血清培养基完全不含有动物血清。它通过使用适当的营养和激素配方来替代血清，避免了使用动物血清时可能出现的问题。无血清培养基 (SFM) 在细胞培养中具有独特的优势，适用于那些对血清成分敏感或需要更严格控制实验条件的细胞类型。 𐟔选择哪种培养基取决于细胞类型、实验目的和成本等因素。这三种基本培养基在细胞培养中各有优势，了解它们的特点可以帮助你做出最佳选择。

𐟔Œ电穿孔转染，轻松搞定！ 𐟒ᩁ‡到难转染的细胞？别担心，电穿孔转染来帮忙！简单三步，十分钟就能搞定，转染效率超高哦！ 1️⃣ 电转前准备：准备好你的细胞和质粒，每次反应可灵活转染2x10^4至6x10^6个细胞。用PBS洗两遍，然后重悬于Opti-MEM无血清培养基中。加入质粒，混合均匀。 2️⃣ 吸液：将细胞和质粒混合物加入Neon移液管吸头中，注意不能有气泡哦！ 3️⃣ 电转染：设置合适的电转参数，如脉冲电压、脉冲宽度、脉冲次数等。向细胞施加电脉冲，递送专用缓冲液中的递送物质。 4️⃣ 分液：将细胞置于提前加入培养基的培养皿中，让转染细胞恢复生长条件。 5️⃣ 分析细胞：对基因表达、基因组编辑、基因沉默和细胞株生长进行评估，看看你的转染效果如何吧！ 𐟎‰电穿孔转染，轻松搞定难转染的细胞！快来试试吧！

𐟧쥮ž验新手必学：培养基知识 𐟔实验小白们，你们是否对培养基感到困惑呢？别担心，今天就来给大家普及一下培养基的知识！ 𐟌𑥟𙥅𛥟𚯼Œ简单来说，就是为微生物、植物或动物提供生长繁殖的营养环境。它通常包含碳水化合物、含氮物质、无机盐、维生素和水等几大类物质。 𐟒‰在实验室中，我们常用到以下几种细胞培养基： 1️⃣ RPMI-1640 Medium：广泛应用于哺乳动物细胞的培养，特别是悬浮细胞。 2️⃣ Minimum Essential Medium (MEM)：成分简单，适合各种哺乳动物细胞类型的培养。 3️⃣ DMEM（标准型）：含有各种氨基酸和葡萄糖，分为高糖型和低糖型，适用于不同细胞的培养需求。 4️⃣ DMEM/F12：结合了DMEM和F12的优点，适用于血清含量较低条件下的哺乳动物细胞培养。 𐟔즭䥤–，还有Opti-MEM I Reduced Serum Media、McCoy's 5A、Iscove's Modified Dulbecco Medium(IMDM)等多种培养基供我们选择。 𐟒᤺†解这些培养基的特点和适用范围，对于实验新手来说是非常重要的。希望今天的分享能帮助大家更好地进行实验研究！

BV-2细胞培养，稳生长秘诀！大家好，今天我想和大家分享一些关于BV-2细胞培养的小技巧，帮助你们的细胞生长得更加稳定和健康。首先，让我们来了解一下BV-2细胞的一些基本特征吧。 BV-2细胞的特征 𐟕𕯸‍♂️ BV-2细胞是一种多形态型细胞，它们既不是完全贴壁也不是完全悬浮生长的。因此，它们的形态多样，既有圆形也有梭形。圆形的细胞大多是悬浮生长的，状态好的时候边缘光滑、折光度高。而贴壁的细胞则既有圆形也有梭形，有些还会有短触角或凸起伸出。培养条件 𐟌᯸ 培养BV-2细胞需要特定的培养基：MEM+10%FBS+1%P/S+1%Sodium Pyruvate 100 mM Solution。传代的比例通常在1:3到1:6之间，每2到3天换一次液。传代步骤 𐟧ꊥ𚦦Ž祈𖯼š由于BV-2细胞是半悬浮生长的，所以在密度达到80%-90%时就可以进行传代分瓶了。收集悬浮细胞：当漂浮的悬浮细胞和圆润细胞比较多时，建议先用吸管轻柔吹打4-6下收集悬浮细胞。如果漂浮的圆润细胞少，可以直接弃去培养上清，用PBS轻柔洗细胞1-2次。消化细胞：加入1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）到培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟。然后用手掌心拍打瓶尾，在显微镜下观察细胞消化情况。如果大部分细胞变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化（T25培养瓶建议添加3ml终止液）。离心和分瓶：将消化后的细胞悬液轻轻打匀后吸出，在800-1000RPM条件下离心4-5分钟。弃去上清液，用手指波动离心管弹松细胞沉淀。补加1-2ml培养液后进行1:3-1:6分瓶，再添加新鲜培养基进行培养（T25培养瓶建议添加5-7ml完全培养基）。可能遇到的问题 𐟚芧”Ÿ长缓慢：BV-2细胞的增值速度很快，倍增时间大约是25-35小时。如果发现生长缓慢，可能是培养基或血清的问题。悬浮细胞变多：BV-2对培养基的酸碱度比较敏感。当PH偏碱时，培养基会呈紫红色，数小时后细胞会全部飘起。及时换液可以解决这个问题。细胞容易聚团：BV-2细胞形态不规则，存在圆形和梭形两种形态。当圆形细胞聚成团块时，说明细胞处于快速增值分裂的状态，及时传代处理即可。贴壁细胞很瘦小：如果BV-2细胞出现瘦小、拉丝、不增值等情况，可能是微生物污染、血清营养价值不高、消化传代过度导致细胞膜损伤等原因。建议排查污染源，更换血清，分化后的细胞贴壁更牢，极难消化，因此应尽量缩短消化时间，预防细胞分化，重新复苏新种子。希望这些小技巧能帮助大家更好地培养BV-2细胞！如果有任何问题或经验分享，欢迎在评论区留言哦！𐟘Š

细胞培养的那些坑，你踩过几个？养细胞这事儿，真不是一般人能搞定的。有人说，细胞培养就像是在玩俄罗斯方块，稍有不慎，你的“细胞方块”就会堆错位置，然后整个系统就崩溃了。今天咱们就来聊聊那些让人心累的细胞培养细节。细胞复苏与保存：步步惊心 𐟧Š➡️𐟔劊刚复苏的细胞特别脆弱，需要你小心翼翼地呵护。为了不让它们莫名其妙地挂掉，你得先搞清楚每种细胞的习性。细胞复苏和保存这两个步骤看似简单，但实际操作起来却是一步一个坑。选择合适的培养液：四大金刚 𐟒‰ 不同的细胞需要不同的培养液。培养基里的“四大金刚”——MEM、DMEM、1640、F-12，基本上能覆盖90%以上的细胞培养需求。MEM是老大，能力全面，应用最广泛。DMEM则是老二，浓度高，分为高糖型和低糖型。1640中规中矩，营养成分简单，适合养淋巴细胞。而F-12则常用于支持某些特定细胞的生长。细胞生长空间：密度是关键 𐟌𑊊细胞生长的空间密度是细胞培养的关键。你不能让细胞瓶里的细胞拥挤得无法呼吸，也不能让它们太孤单。细胞接种前，需要通过细胞计数来调整浓度。这个步骤很关键，做不好就会让细胞“孤独死”。贴壁细胞形态不好怎么办？ 𐟤” 当培养的贴壁细胞形态不好时，可以在传代时先倒掉旧的培养基，加入新的培养基洗涤一次，然后用滴管吸走。接着再加入新的培养基，沿着瓶底轻轻吹打一遍，再吸走。这时再进行正式的消化和吹打。把吹打下的细胞悬液加入到含有新培养基的培养瓶内，置于培养箱里培养，按时间点观察细胞贴壁情况。找到完美的形态为止。培养基量：摸索中前行 𐟧ꊊ至于在培养瓶中加入多少培养基量，这需要你自己摸索。对于生长快的细胞，加少一点培养基会让细胞形态更好，但要注意换液时间的把握。总结细胞培养真的是一门手艺活儿，需要你不断摸索和尝试。每一个细节都可能影响到实验结果。希望这些小技巧能帮到你，让你的细胞培养之路更加顺畅！

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