FPKM最新视觉报道_fpkm是什么意思(2024年11月全程跟踪)
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count重要 在生物信息学中,基因表达水平的量化是一个关键步骤。为了比较不同样本或条件下的基因表达差异,科学家们发展了多种标准化方法。以下是四种常见的基因表达水平标准化指标:Counts、RPKM、FPKM和TPM。 Counts Counts指的是在测序数据中每个转录本或基因检测到的测序读段(reads)数量。通过将测序读段与参考基因组或转录本进行比对,可以获得每个转录本或基因上的读段数量。在多个样本的情况下,比较转录本或基因的counts可以识别不同样本间的表达水平差异。然而,由于RNA-Seq数据的测序深度可能在不同样本之间存在差异,因此需要对counts进行标准化处理,以便进行比较。 RPKM RPKM(Reads Per Kilobase of exon model per Million mapped reads)是一种常用的标准化方法。它表示在每个基因的编码区域每百万mapped reads中有多少reads。RPKM的计算公式为:RPKM = total exon reads / (mapped reads (Millions) * exon length (KB))。RPKM先进行测序深度标准化,后进行基因长度标准化。主要用于双端测序,并广泛用于表达水平的比较分析。然而,RPKM不能区分基因的上调和下调(差异表达分析),也不能反映基因的编码能力。 FPKM FPKM(Fragments Per Kilobase of exon model per Million mapped fragments)与RPKM类似,但计算的是fragments数量。FPKM的计算公式为:FPKM = total exon fragments / (mapped fragments (Millions) * exon length (KB))。FPKM适用于那些使用片段化测序方法的研究。 TPM TPM(Transcripts Per Kilobase of exon model per Million mapped reads)是另一种广泛使用的标准化方法。它的计算公式为:TPM = transcripts / (mapped reads (Millions) * exon length (KB))。TPM不仅考虑了测序深度和基因长度,还考虑了转录本的拷贝数,因此被认为是更全面的标准化方法。 总结 Counts、RPKM、FPKM和TPM都是对基因表达水平进行标准化的重要指标。每种方法都有其独特的适用场景和局限性。在选择合适的标准化方法时,需要考虑到实验设计、数据类型和实验目的。通过了解这些指标的原理和优缺点,可以更好地选择适合自己研究的方法,从而更准确地评估基因表达水平的变化。
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