rbs序列前沿信息_rbs序列优化(2024年12月实时热点)
如何阅读质粒图谱:简单五步搞定! ꧬ줸步:首先找到 Ori 的位置,了解质粒的类型(原核、真核或穿梭质粒)。 ꧬ줺步:接着看筛选标记,例如抗性标记,决定使用哪种筛选标记。例如: Ampr:水解 酰胺环,解除氨苄的毒性。 tetr:阻止四环素进入细胞。 camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 neor(kanr):氨基糖苷磷酸转移酶使G418(长那霉素衍生物)失活。 hygr:使潮霉素䱦 ꧬ줸步:查看多克隆位点(MCS),它具有多个限制酶的单一切点,便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 ꧬ쥛步:再看外源 DNA 插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 ꧬ줺步:检查是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 启动子:促进DNA转录的DNA顺序,这个DNA区域常在基因或操纵子编码顺序的上游,是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。 增强子/沉默子:为真核基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。/沉默子-负增强子,负调控序列。 核糖体结合位点/起始密码/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核糖体的两个结合位点,对于原核而言是AUG(起始密码)和SD序列。 转录终止顺序(终止子)/翻译终止密码子:结构基因的最后一个外显子中有一个 AATAAA 的保守序列,此位点 down-stream 有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA的保守序列,此位点down-stream有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。
𑦯日一题:生物竞赛知识点解析𑊰 Toehold 开关的工作原理是通过将核糖体结合位点(RBS)隐藏在发夹结构中,从而阻止核糖体的结合,进而抑制翻译。只有在触发 RNA 解开发夹结构后,翻译才会启动。 RNA 序列中的直接重复并不会自发形成发夹结构,因此这一说法是错误的。发夹结构需要互补序列来形成稳定的配对和二级结构。 🠔oehold switch 设计初衷是基于原核生物(如细菌)中核糖体结合位点的结构与功能。真核生物的翻译过程更加复杂,且在起始阶段的调控与细菌不同,因此在真核系统中的效果不会与细菌中一样好。 砨𝧄𖦓纵子中的基因共享同一个启动子和 RNA,但每个基因可能需要单独的 RBS。即使 Toehold switch 能控制一个启动事件,它不一定能直接影响操纵子中每个基因的翻译。因此,这一说法是错误的。
主X出门迎接“客人”的--“城南庄会议” 说从不出门迎接客人的主X,破天荒的出门迎接一位还算不上“部下”的纵队司令,至于原因就更无厘头了,竟然是因为这个纵队司令屡次“抗命”,hk的无厘头电影都不敢编的故事,居然一直在流传。那就仔细说说这次会议--“城南庄会议” “城南庄会议”是书记处于1948年4月30日至5月7日在河北省阜平县城南庄晋察冀军区司令部召开的扩大会议。这是中y前委和中y工委会合以后的第一次书记处扩大会议。mzd主持会议。刘、周、朱、任、李X念、张际春、陈毅、彭真、聂荣臻、黄敬、罗瑞卿、薄一波、等出席。 会议讨论了三项议题: (1)把战争引向国民党地区; (2)发展生产,减轻人民负担; (3)反对无政府无纪律状态,适当缩小地方权力。 会议围绕主X提出的“军队向前进,生产长一寸,加强纪律性”的三点意见展开讨论。 这个意见成为党在相当长的一段时间内的行动方针。 会议通过了中g中y庆祝“五一”劳动节口号。 会议提出迅速召开政z协商会议,成立民主联合z府的提议。 会议还听取了粟裕的汇报,决定同意粟裕兵团暂不渡江南进,而先集中兵力在中原黄淮地区打仗,尽可能多地把国民党的主力消灭在长江以北。 迅速召开z治协商会议,成立民主联合z府是会议的主要议题。会前,主X曾发电报给书记处。 根据mzd年谱: 主X在4月25日致电刘、朱、周、任,通知他们即将召开的中y会议准备讨论的问题:(一)邀请港、沪、平、津等地各中间d派及民众团体的代表人物到解放区,商讨关于召开人民代表大会并成立临时中y政府问题。(二)关于在今年冬季召开二中全会的议题。(三)关于酌量减轻人民负担、大力发展农业生产和工业生产问题。(四)关于消灭某些无政府状态和酌量缩小地方权力的问题。(五)关于区、乡、村人民代表会议组织大纲草案。(六)陈粟兵团的行动问题及其他问题。以上各问题请他们先作大概的讨论,然后再到城南庄商定。 城南庄会议 《战争回忆录》第十五章<集中兵力,大战中原>中写道: "中y在接到我的建议报告后,立即来电要陈毅同志和我一起到中y去当面汇报。我们到达西柏坡以后,随即前往阜平县的城南庄,mzd同志在那里召开会议听取我们的意见。我着重汇报了三个纵队暂不渡江南进、集中兵力在中原黄淮地区大员歼敌的方案,详细说明了提出这个方案的根据。mzd同志、LSQ同志、zeL同志、zd同志、rbS同志和其他领导同志听了之后,当即进行研究,并同意了这个方案。" 粟裕这样写似乎城南庄会议就是为了粟部渡江问题.。坊间就又有了“主X一改往常不迎接客人的习惯,走出门来迎接粟裕”,并接受了粟裕不渡江的建议。关于渡江作战,军委也从来没有改变过。 坊间传说,“1948年,当粟裕对军委已经决定的‘渡江作战方案’提出不同意见时,主X专门请他去说明,最后采纳了他的意见。” 这种说法不符合历史事实。事实是,城南庄会后主X非但没有采纳粟裕的不渡江的意见,而且否决批评了他的意见。 1948年5月5日,城南庄会议结束后,主X、军委立即发电报指示刘邓(粟裕的直接上级)及华东局: 刘邓,并华东局: “将战争引向长江以南,使江淮河汉地区之敌容易被我军逐一解决,正如去年秋季以后将战争引向江淮河汉,使山东、苏北、豫北、晋南、陕北地区之敌容易被我军解决一样,这是正确的坚定不移的方针。” 【注:这里重申军委此前关于派遣粟裕兵团南下渡江作战的方针是正确的,且此决定并无任何改变。】 电报指出: “惟目前渡江尚有困难。目前粟裕兵团(一、四、六纵)的任务,尚不是立即渡江,而是开辟渡江的道路,即在少则四个月多则八个月内,该兵团加上其他三个纵队,在汴徐线南北地区,以歼灭五军等部五六个至十一二个正规旅为目标,完成准备渡江之任务。” 【这里说明,因粟裕称渡江作战有一定困难,希望在中原与其他部队合作打掉敌人主力后再走,主X同意了这个提议。】 坊间还有一种传言,即城南庄会议后,主X决定提升粟裕职务及扩大指挥权力等等。在此电报可以看出这些说法不属实。 军委的此电报重申及明确指出:粟裕所辖直属部队即粟裕兵团,只包括三个纵队,即原属于华野的一纵(叶飞纵队)、四纵(王必成纵队)、六纵(陶勇纵队)。 (1948年1月,军委规定华东野战军建制序列包括四个兵团: 第一兵团,粟裕为司令员兼政委,原为华野外线兵团,辖1、4、6三个纵队。接受刘邓领导,任务是渡江作战。 第二兵团,司令员许世友,政委谭震林。由原华野内线兵团组建,辖7、9、13纵队及渤海纵队共四个纵队,接受华东局领导,在华东作战。 第三兵团,即陈唐兵团,司令员陈世榘,政委唐亮,为军委直辖机动战斗部队。战争中接受陈毅指挥。 第四兵团,司令员韦国清,政治委员陈丕显,由原华野2纵队及苏北11、12纵队改编。受华东局领导,在苏北作战。战争中接受陈毅指挥) 1948年2月2日,为准备渡江,毛泽东还曾决定,粟裕部的三个纵队改名“东南野战军”,南下作战。为此他写手令交给正在陕北的陈毅。手令内容是:任命陈毅为东南野战军(以华东野战军6个纵队组成)司令员兼政委,任命粟裕为东南野战军副司令员兼副政委,又兼东南野战军第一兵团司令员兼政委。 1948年3月,军委再次指示,粟裕兵团可改称“华中解放军南下兵团”,粟裕为司令,叶飞为副司令,直辖第1、4、6三个纵队。(这两个命令都因粟裕不能渡江作战没有执行) 在5月城南庄会议后,军委决定粟裕兵团仍要南下作战。但同意粟裕兵团暂缓渡江,而在中原地区歼灭敌部分主力后再走。因此确定粟裕部队须执行一项新的任务——“在未来四到八个月内,在中原(汴徐线南北)地区歼灭蒋介石嫡系的邱清泉5军5—10个旅。”这就是坊间传说的粟裕立下的“军令状”。 城南庄会议还决定,在粟裕的大部队南下前,该兵团先派出十个营,附以地方干部,先遣渡江,分布广大地区,发展游击战争,等待接应粟裕的大部队南渡。 主X说,“以上计划,是我们和陈、粟及一波、先念所商定的。” 这就是城南庄粟裕汇报后,军委的计划和决定,也是城南庄书记处扩大会议d中y作出的集体决定。这个计划“且已与陈、粟商定”,而由粟裕执行——“待陈粟由中y回去,结束z策学习及军事训练,约于本月底渡河作战。” 对华野其他部队,中央也有指示: “陈唐所率三、八两纵应回至豫皖苏区,调换一纵西去,以便该兵团有一、三、四、六、八及十一等六个纵队集结打大仗。” 也就是说,此前中央直管的华野陈唐部队,回去会和粟裕兵团的三个纵队一起接受陈毅指挥,准备合力完成打大仗歼灭邱5军的任务。 正是中y军委和主X作出的合并决定,才在不久后的豫东战役中陈唐兵团攻克开封。攻克开封也改变了中原战场的形势,具有战略意义。 城南庄会议批评了粟裕的不渡江的意见,接受了暂不渡江的建议。并对后面的部队建制和指挥范围做了详细的指示,为1948年的济南战役和11月份的淮海战役明确了战略思想。
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