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荧光蛋白最新视觉报道_荧光蛋白标记技术(2024年12月全程跟踪)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：热点更新日期：2024-11-29

荧光蛋白

小动物活体成像技术：关键因素与常见问题在进行小动物活体成像时，有几个关键因素会影响成像效果，包括给药方式、荧光标记物的波长和动物毛发。以下是这些因素的详细说明及注意事项：给药方式 𐟒‰ 腹腔注射：这种方法可以使底物迅速分布到全身，并能够穿过包括大脑在内的血液组织屏障。注射后10~20分钟，发光信号达到峰值，60分钟内逐渐减少至不可检测。尾静脉注射：这种方式可以提供更好的再现性和5~10倍的高信号，但注射难度较高，代谢速度快。建议在进行荧光素酶底物成像或更换新品牌底物时，先进行预实验，确定最佳延迟时间。荧光标记物波长 𐟌ˆ 自发荧光：大多数生物体内都表现出一种天然的荧光，称为自发荧光。这些荧光与标记物发射波长重叠，经激发光照射会发射出与标记物相似的荧光波长，导致低信噪比，检测灵敏度受限。例如，GFP的最大激发波长是488 nm，最大发射波长是507 nm，与皮肤及毛发中的胶原蛋白和弹性蛋白等成分的发射波长相近，有较高的背景信号。波长选择：建议使用近红外波长的荧光染料，优点是更高信噪比，穿透更深，或使用iRFP作为报告基因，该荧光蛋白具有更高的亮度、光稳定性和信噪比。动物毛发 𐟐튦‘生长周期：C57BL/6小鼠的毛发生长周期由三个阶段组成：静止期（皮肤为淡粉色）、生长期（皮肤变为深灰色或黑色）、成熟期（毛发停止生长，皮肤恢复为淡粉色）。生长期中的皮肤色素沉着是活体成像中的一个重要变量，特别是当需要对小信号变化或动物之间的差异敏感时。强烈着色的皮肤可导致90%以上的光信号衰减，这显然会导致显著的实验误差。剃毛或化学脱毛：建议成像前一天，通过剃毛或化学脱毛来去除观察区域的毛发，以便最大限度地收集信号。通过注意这些关键因素，可以优化小动物活体成像的效果，减少实验误差，提高数据准确性。

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小动物活体成像实验常见问题解答 𐟔✨ 小动物活体成像实验疑难解答 𐟒ᑱ. 荧光素酶有哪些种类？特性如何？ 𐟔𙧭”：常见的荧光素酶有两种：Luciferase和Renilla荧光素酶。Luciferase的底物是D-luciferin，发光波长在540-600nm，容易透过组织；Renilla荧光素酶的底物是coelentarizine，发光波长在460-540nm，体内代谢较快。𐟔슊𐟒ᑲ. 组织切片能否观察到生物发光？ 𐟔𙧭”：可以，但荧光素酶在体外的活性保持时间较短，大约只有几十分钟。有相关文献支持这一观点。𐟓– 𐟒ᑳ. 正常成体小鼠能否看到体内发光？是否必须使用裸鼠？ 𐟔𙧭”：可以！成体小鼠与裸鼠、幼鼠及胚胎的主要区别在于对可见光的穿透性。可见光穿透能力达3-4cm，因此大鼠也适用。𐟐튊𐟒ᑴ. 荧光素酶的发光强度与细胞数量有何关系？ 𐟔𙧭”：成正比！荧光素酶的发光强度与标记的细胞、基因、细菌和病毒的数量成正比。𐟓ˆBrian Ross的研究已证实这一点。 𐟒ᑵ. 荧光素酶发光波长与体内穿透性有何关联？ 𐟔𙧭”：荧光素酶发出偏红光，其穿透性比绿色荧光蛋白强近百倍。因为血红蛋白主要吸收蓝绿光波段，而对红光波段吸收作用小。𐟌ˆ 𐟒ᑶ. 为何推荐用RFP而非GFP检测体内发光？ 𐟔𙧭”：红光在体内的穿透性比绿光强近百倍。在条件允许下，建议选择波长较长的荧光染料。𐟔𔰟’š

荧光蛋白09-荧光蛋白和萤光素酶的区别「汉恒生物」「科研」「荧光蛋白」#汉恒生物科技的微博视频

荧光蛋白07-可以做活体成像吗？哪种效果比较好？「汉恒生物」「科研」「荧光蛋白」#汉恒生物科技的微博视频

医学生科研神器，速来收藏！ 𐟎Œ𛥭槔Ÿ读研后，想要轻松搞科研，提升效率，这些工具你一定要知道！ 𐟓š 中英文献怎么找？ ▪️ 英文SCI：Pubmed ▪️ 中文核心/高校毕业论文：中国知网 𐟔 精读文献：ReadPaper 相比知云，ReadPaper更方便，支持一键全文翻译、目录跳转、图文分离、一键跳转引用文献等，翻译准确，使用方便。而且它会自动存档，不用担心找不到位置。 𐟖𜯸 图像处理：ImageJ ImageJ可以计算选定区域内对象的长度、角度、周长、面积、长轴、短轴等。我一般用它计算Western blot蛋白灰度值大小，免疫荧光蛋白染色面积，组化蛋白染色面积等。 𐟎蠤𝜥›𞯼šPhotoshop PS是一个强大的作图软件，可以用来做荧光结果的merge图，给各种结果图加标尺，做组图等。具体操作可以参考某站的教程。 𐟓Š 论文作图：GraphPad Prism 科研作图必备工具，满足所有论文作图需求！操作简单，后期修改也很方便。 𐟓ˆ 数据分析：SPSS 统计分析必备工具，功能强大，操作简单。某站有很多教程，几天就能上手，数据处理这块你一定能拿捏！ 𐟓‘ 文献管理器：EndNote 它可以轻松管理成千上万条参考文献，不管是中文还是英文都可以轻松归档、分类保存、查看和引用。 𐟌Ÿ 对于准备读研的研零们，这一阶段对科研可能没有头绪。主要用ReadPaper精读文献，主要读摘要、前言和讨论部分。具体文献可以先看课题组师兄师姐的毕业论文，然后在Pubmed里查找导师研究方向的相关内容。看不懂也不要紧，科研思路需要慢慢培养，当你看的文章多了，自然就知道怎么个思路了，千万不要着急～希望这些工具能帮助大家在读研期间多发文章，快乐毕业！