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内容来源:卡姆驱动平台所属栏目:教程更新日期:2024-11-26

油红o染色

油红O染色浓度 𐟧ꢜ覜€近在做细胞染色实验,发现油红O染色浓度真是个宝藏!𐟒碜褻Š天就跟大家聊聊油红O染色浓度的那些事儿。 𐟧ꦲ𙧺⏦Ÿ“色浓度选择 油红O染色剂有不同的浓度选择,最常用的是0.5%和5%。0.5%的浓度适合大部分细胞和组织切片,而5%的浓度则适合特别顽固的脂肪组织。配制5%的储存液也很简单,用500ml异丙醇溶解25g油红O粉末即可。染色时按照3:2的比例稀释成工作液。记住,现配现用效果最好哦! ⚖️油红O染色原理 油红O是一种脂溶性染料,能特异性地与脂肪组织中的脂质结合。它在脂肪内的溶解度比在溶液中的溶解度更大,所以当染料加入组织切片时,会迅速从溶液转移到脂肪组织中,使脂肪染色。这个过程就像是染料“搬家”一样,从水搬到脂肪里。这种物理上的吸附作用使脂肪呈现出红色或橙红色,而细胞核则保持蓝紫色。是不是很酷?✨ 𐟚覲𙧺⏦Ÿ“色注意事项 使用油红O进行染色时,有几个小细节特别重要: 1️⃣ 必须使用冰冻切片,石蜡切片只能对细胞内的脂质有效染色。 2️⃣ 冰冻切片的厚度不易过薄,否则脂质容易掉落。 3️⃣ 苏木素复染时间不宜过长,2分钟就好,时间过长会掉色。 4️⃣ 染色后应立即拍照,时间过长会掉色。 5️⃣ 常规扫描图像可能不清楚,因为油红染色的封片介质折光性不高,建议多层融合扫描。 这些小细节虽然看似繁琐,但都是保证实验成功的关键!𐟒ኦ𒹧𚢏染色浓度真的是一个既简单又实用的实验技巧!希望大家都能轻松掌握。如果有任何问题或者新的发现,欢迎在评论区分享哦!𐟓颜耀

油红O染色方案:详细步骤与技巧 油红O染色是一种常用的细胞染色方法,特别适用于脂肪细胞的染色。以下是详细的步骤和技巧,帮助你顺利完成染色实验。 配制工作液 𐟧ꊩ斥…ˆ,你需要准备油红O工作液。临用前,将饱和油红O染液与蒸馏水按3:2的比例混合均匀。然后,将混合液置于60~70℃的水浴中加热30分钟,自然冷却后用定性滤纸过滤,得到油红O工作液。注意,这个工作液需要现配现用哦! 细胞样本准备 𐟧슥﹤𚎧𛆨ƒž染色,你需要先吸弃细胞培养液,然后向孔板边缘缓慢加入PBS进行简单清洗。接着,加入4%多聚甲醛固定液,室温固定20分钟,再用PBS漂洗两次。 冰冻切片准备 ❄️ 如果你需要染色的是冰冻切片,从-20℃取出切片后,室温静置5~10分钟恢复至常温。 染色步骤 𐟎襯𙤺Ž细胞染色: 固定:向孔板内加入少量60%异丙醇覆盖细胞15~20秒,然后吸弃异丙醇,稍微晾干水分。 染色:向孔板内加入油红O工作液覆盖细胞,室温避光染色30分钟,去除染色液。 分化:加入60%异丙醇快速分化3~5秒,然后用纯水洗3次,每次5分钟。 复染:加入苏木素复染核,水洗,分化,水洗,返蓝再水洗。 封片:加入PBS覆盖细胞后显微镜观察,最后用甘油明胶封片剂封片。 冰冻切片染色: 浸染:将恢复至室温的冰冻切片浸一下PBST后,用疏水笔画圈,滴入油红O工作液室温浸染30分钟(加盖避光)。 分化:取出切片,停留3秒后依次浸入两缸60%异丙醇分化3~5秒。 清洗:切片依次浸入两缸纯水中浸洗,每次10秒。 复染:切片浸入苏木素染核,水洗,分化,水洗,返蓝再水洗。 封片:稍微晾干水分后滴加甘油明胶封片剂封片。 通过以上步骤,你就可以成功完成油红O染色啦!希望这篇方案对你有所帮助!

油红O染色实验全攻略:操作步骤详解 𐟔쥮ž验小白必看!油红O染色教学 𐟌Ÿ【染色原理大揭秘】𐟌Ÿ 油红O染料就像是一位专情的侦探𐟕𕯸‍♀️,对脂质情有独钟!它能轻松穿越细胞膜,与那些藏在细胞深处的脂质滴来个亲密接触,绽放出耀眼的红色光芒!𐟔堥œ覘𞥾œ下,这一片红海就是脂质堆积的铁证,清晰又迷人~𐟑€ 𐟓【操作步骤全攻略】𐟓 固定:将切片置于4%多聚甲醛中固定10分钟,然后用蒸馏水稍微冲洗。 60%异丙醇浸洗:将切片放入60%异丙醇中浸洗20秒。 染色:将切片放入油红O染色液中浸染10分钟。 分色:将切片再次放入60%异丙醇中分化,去除多余的染料,然后用蒸馏水冲洗。 复染细胞核:将切片放入苏木素中复染2分钟,然后用蒸馏水冲洗。 封片:使用甘油明胶封片剂进行封片。 ※实验结果:正常情况下,脂滴为红色,细胞核为蓝色。 𐟔【应用小贴士】𐟔 油红O染色不仅是脂肪细胞研究的得力助手,也是肝脏病理学诊断的明星工具!𐟔젦— 论你是想了解脂肪代谢的奥秘,还是探究脂肪肝的成因,它都能帮你大忙!

𐟔젥ꌥ䖥Œ…服务:全方位科研支持 𐟚€ 我们提供全方位的实验外包服务,涵盖多种科研领域和实验技术。无论是细胞实验、动物实验,还是整体实验代做、转录组实验、测序实验、基因组学实验、药代动力学实验,甚至基因敲除和动物行为学实验,我们都能胜任。𐟔찟튊我们的服务还包括多种染色技术,如HE染色、Masson染色、油红O染色、PAS染色等特殊染色,以及组化、荧光单标及多重免疫荧光等实验。我们拥有大型基础实验室,可以线上与科研团队进行答疑,线下参观并提供专业指导。𐟌𐟑袀𐟔슊无论是科研新手还是经验丰富的科学家,我们都能为您提供专业的实验外包服务,助力您的科研工作取得突破。𐟌Ÿ𐟔

油红O染色指南:详细步骤与注意事项 油红O染色是一种用于检测细胞内脂质含量的染色方法。以下是详细的步骤和注意事项: 𐟧ꠦ𒹧𚢏工作液配置 首先,将饱和油红O原液与ddH2O按3:2的比例混合,搅拌均匀。然后,用0.2um滤头过滤,静置10分钟后使用,注意避光。 𐟍𖠶0%异丙醇配置 将100%异丙醇与ddH2O按3:2的比例混合,配置成60%的异丙醇溶液。 𐟔 油红O染色步骤 弃去细胞培养基,用PBS洗涤2次,然后加入甲醛固定20-30分钟(六孔板中每孔加入1ml甲醛,覆盖孔底即可)。 弃去固定液,用ddH2O洗涤2次,然后加入60%异丙醇浸洗5分钟,弃去后再加入先前配置好的油红O工作液,浸染10-20分钟(六孔板中每孔加入1ml,覆盖孔底即可)。 弃去染液,用60%异丙醇漂洗至间质清晰,再用ddH2O洗至无多余染液,约2-5次。 可选步骤:苏木素染细胞核 将苏木素染液加入孔中,浸染1-2分钟(六孔板中每孔加入1ml,覆盖孔底即可)。弃去染液后,用ddH2O漂洗2-5次,吸弃后加入ddH2O覆盖细胞,镜下观察。 通过以上步骤,你可以成功进行油红O染色,检测细胞内的脂质含量。记得在操作过程中注意安全和清洁,避免污染。

油红O染色实验步骤详解,轻松上手! 嘿,大家好!今天我想和大家分享一下如何用油红O染色组织切片,这可是个有点技术含量的实验哦!不过别担心,我会尽量讲得详细一些,让你也能轻松上手。 准备工作 𐟧ꊩ斥…ˆ,我们需要配制工作液。这个步骤很关键,因为油红O染液需要在60到70℃的水浴中加热30分钟,然后自然冷却后过滤。记住,这个工作液要现配现用哦! 样本处理 𐟌🊥﹤𚎧𛆨ƒž样本: 吸弃细胞培养液。 向孔板边缘缓慢加入PBS,简单清洗细胞。 加入4%多聚甲醛固定液,室温固定20分钟。 PBS漂洗2次。 对于冰冻切片: 从-20℃取出切片,室温静置5到10分钟恢复至常温。 染色步骤 𐟎芧𛆨ƒž样本: 加入少量60%异丙醇覆盖细胞15到20秒,吸弃后稍微晾干。 加入油红O工作液覆盖细胞,室温避光染色30分钟。 去除染色液后,加入60%异丙醇快速分化3到5秒。 纯水洗3次,每次5分钟。 加入苏木素复染核,水洗、分化、水洗、返蓝再水洗。 加入PBS覆盖细胞后显微镜观察。 用甘油明胶封片剂封片。 冰冻切片: 恢复至室温的冰冻切片浸一下PBST后用疏水笔画圈。 滴入油红O工作液,室温浸染30分钟(加盖避光)。 取出切片,停留3秒后依次浸入两缸60%异丙醇分化3到5秒。 切片依次浸入两缸纯水中浸洗,每次10秒。 浸入苏木素染核,水洗、分化、水洗、返蓝再水洗。 稍微晾干后滴加甘油明胶封片剂封片。 注意事项 ⚠️ 如果是新鲜组织冰冻切片,需要先在4℃下用福尔马林固定20分钟再染色。 油红O工作液必须现配现用,水浴加热时要小心。 染色后的样本不能长期保存,最好尽快观察和拍照。 用甘油明胶封片剂封片时要注意避免气泡,如果有气泡可以将玻片浸入65℃温水中让盖玻片自行脱落,然后重新封片。 好了,以上就是油红O染色实验的详细步骤啦!希望对你有所帮助。如果有任何问题,欢迎在评论区留言哦!𐟘Š

𐟔젦𒹧𚢏染色实验步骤与注意事项详解 𐟓 二、实验步骤 冰冻切片:将组织或细胞切片至6-10厚度,用蒸馏水稍洗。 异丙醇漂洗:将固定好的切片或细胞放入60%异丙醇中漂洗20-30秒。 油红O染色:取6ml油红O储备液,加4ml蒸馏水,混合后静置10分钟。染色时间为5-10分钟。 异丙醇清洗:用60%异丙醇稍洗去多余染液,再用蒸馏水洗。 苏木素复染:用Mayer苏木素浅染核1分钟。 盐酸分化:用1%盐酸水溶液稍分化。 水洗:水漂洗10分钟或于稀碳酸锂水溶液中促蓝,水洗,用滤纸将切片周围水分擦干。 封片:使用专用封片剂进行封片。 镜检与拍照:在显微镜下观察并采集图像。 三、结果判读 中性脂肪呈深橙红色,细胞核呈蓝色。 四、注意事项 脂肪染色不宜使用石蜡切片,应通过冰冻切片染色显示。 冰冻切片不宜过薄,以免脂质丢失。 苏木素复染时间不宜过长。 染色结果不宜长期保存,应尽快观察和拍照。 封片后有气泡时,不要按压玻片或强行扯下盖玻片,可将玻片放入蒸馏水中浸泡,让盖玻片自行脱落,然后重新封片,以防脂滴移位。

脂质染色方法大揭秘!你选对了吗?𐟔 脂质是构成人体组织的重要成分,包括脂肪和类脂(如磷脂、糖脂、固醇等)。这些脂质通常不溶于水,但易溶于酒精、氯仿等有机溶剂。在病理状态下,组织中的脂肪检测显得尤为重要。下面我们来介绍几种常见的脂质染色方法。 𐟔𔠨‹丹III染色 苏丹III染色是一种经典的脂质染色方法,适用于检测组织中的脂肪。在液态或半液态的脂质中,苏丹III染料的着色效果最佳。因此,在实际操作中,可以适当提高温度(37℃-60℃)以获得更好的染色效果。 𐟟  苏丹IV染色 苏丹IV染色与苏丹III染色类似,也是通过与脂质结合来显示脂肪的存在。这种方法的操作简便,结果解读也比较直观。 𐟟ᠨ‹丹黑染色 苏丹黑染色主要用于检测脂肪中的黑色素,适用于黑色素瘤等黑色素相关疾病的诊断。 𐟟䠦𒹧𚢏染色 油红O染色是一种特异性的脂肪染色方法,对脂肪的显示效果非常明显。这种方法在科研实验中广泛应用,特别是在脂肪变性、水变性或糖原贮存的研究中。 通过这些简单的染色方法,我们可以轻松检测组织中的脂质含量和分布,为疾病诊断和科研提供有力支持。希望这些方法能帮助你在科研之路上取得成功!𐟌Ÿ

微b0 3T3-L1细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)是从3T3(Swiss小白鼠)中分离得到的连续亚株。当这些细胞从快速分裂阶段过渡到接触抑制阶段时,它们会经历从前脂肪细胞到脂肪样细胞的转变。这些细胞常被用于研究糖尿病和肥胖症等疾病。 𐟔 成脂诱导步骤: 细胞接触抑制2天:让细胞退出生长周期。 加入含有IBMX(0.5mM)、地塞米松(1ol/L)和胰岛素(1-10/mL)的培养液,培养2天。 换成只含胰岛素的培养基,再培养2天。 加入诱导培养基2,继续培养。 最后换成不含诱导激素的常规培养基,每2天换液一次。 𐟎蠦𒹧𚢏染色法鉴定: 当观察到脂滴时,即可进行油红O染色。如果脂滴较小,可以延长诱导时间2-3天。 染色液为过饱和溶液,使用1㗐BS稀释后应沉淀或离心处理,取上层析出物较少的染色液进行染色。 染色后尽快拍照,放置时间过久会导致脂滴脱壁或融合,影响拍照效果。 ⚠️ 注意事项: 诱导时间过长会导致脂滴脱落到培养基中,随着换液而损失,因此成脂诱导的染色时间点应以镜下观察为准,并非诱导时间越长越好。 油红O染色液使用时需注意安全,避免皮肤接触。

SD大鼠非酒精性脂肪肝模型构建方法 实验动物:成年SD大鼠(200-250g),雌雄各半 造模方法简介:大鼠接受4周高脂饮食,于第3周开始接受每周2次40%四氯化碳豆油溶液皮下注射,通常在周二和周五进行。 模型成功标准: 如图A,与正常对照组比较,模型组大鼠的肝组织中IL-1€TNF-˜𞨑—上升(p<0.05);模型组大鼠的血清样本中HDL-C的含量显著下降(p<0.05),LDL-C的含量显著上升(p<0.05)。 如图B,取肝组织,做HE染色,模型组肝实质结构受损严重,明显可见空泡性脂肪变性,门管区炎症细胞浸润,且有不同程度出血现象,伴有纤维化。 如图C,取肝组织,做油红O染色,与正常对照组比较,模型组大鼠的肝组织中脂肪明显增多。

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