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荧光蛋白有哪些权威发布_光镜电镜关联技术不猝灭的荧光蛋白有哪些(2024年12月动态更新)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：导读更新日期：2024-12-01

荧光蛋白有哪些

小动物活体成像实验常见问题解答 𐟔✨ 小动物活体成像实验疑难解答 𐟒ᑱ. 荧光素酶有哪些种类？特性如何？ 𐟔𙧭”：常见的荧光素酶有两种：Luciferase和Renilla荧光素酶。Luciferase的底物是D-luciferin，发光波长在540-600nm，容易透过组织；Renilla荧光素酶的底物是coelentarizine，发光波长在460-540nm，体内代谢较快。𐟔슊𐟒ᑲ. 组织切片能否观察到生物发光？ 𐟔𙧭”：可以，但荧光素酶在体外的活性保持时间较短，大约只有几十分钟。有相关文献支持这一观点。𐟓– 𐟒ᑳ. 正常成体小鼠能否看到体内发光？是否必须使用裸鼠？ 𐟔𙧭”：可以！成体小鼠与裸鼠、幼鼠及胚胎的主要区别在于对可见光的穿透性。可见光穿透能力达3-4cm，因此大鼠也适用。𐟐튊𐟒ᑴ. 荧光素酶的发光强度与细胞数量有何关系？ 𐟔𙧭”：成正比！荧光素酶的发光强度与标记的细胞、基因、细菌和病毒的数量成正比。𐟓ˆBrian Ross的研究已证实这一点。 𐟒ᑵ. 荧光素酶发光波长与体内穿透性有何关联？ 𐟔𙧭”：荧光素酶发出偏红光，其穿透性比绿色荧光蛋白强近百倍。因为血红蛋白主要吸收蓝绿光波段，而对红光波段吸收作用小。𐟌ˆ 𐟒ᑶ. 为何推荐用RFP而非GFP检测体内发光？ 𐟔𙧭”：红光在体内的穿透性比绿光强近百倍。在条件允许下，建议选择波长较长的荧光染料。𐟔𔰟’š

你是否知道？正常人甲胎蛋白是多少？ 𐟓‘甲胎蛋白属于是肿瘤标志物检查，很多人群并不了解正常的数值，下面为大家分析，需要仔细查看文章。 ✅正常人的甲胎蛋白数值一般小于25/L。甲胎蛋白多数是在胎儿早期由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白，出生以后体内的蛋白合成会受到抑制，甲胎蛋白具有很多重要的生理功能，包括运输功能、作为生长调节因子的双向调节功能、免疫抑制、T淋巴细胞诱导凋亡等。甲胎蛋白与肝癌及多种肿瘤的发生发展密切相关，在多种肿瘤中均可表现出较高浓度，可作为多种肿瘤的阳性检测指标。临床上主要作为原发性肝癌的血清标志物，用于原发性肝癌的诊断及疗效监测。正常的数值是0/L~25/L之间，所以正常数值小于25/L。日常需要了解甲胎蛋白的检查方法有哪些，可以了解身体健康和病情的治疗情况。 𐟔Ž甲胎蛋白需要通过血液化验的方式检查，是最常用的检查方法。通过抽取血液样本，利用特定的检测技术，如酶联免疫法、放射免疫分析法、荧光免疫法等，来测定血液中甲胎蛋白的含量。能够精确地检测出甲胎蛋白的浓度，有助于医生判断是否存在肝脏或其他相关疾病。 𐟒Œ还要了解甲胎蛋白检查的作用和预防甲胎蛋白升高的方法，可以明确身体健康状况，还可以防止甲胎蛋白数值出现异常，需要在下面的图片里面查看，如果还有问题，欢迎在评论区留言互动。

BiFC实验常见问题解答𐟌🯼ˆ第三期） 𐟌𑠤𘺤𛀤𙈦œ‰些基因在酵母双杂中显示互作，但在BIFC中无信号？由于酵母双杂实验中，BD融合诱饵蛋白可能单独激活，而AD融合靶蛋白如果有DNA特异性结合，也可能单独激活报告基因表达，导致假阳性结果。此外，某些重组可能破坏蛋白互作，且不同外源基因的瞬时表达效率差异大。建议在BIFC之前先进行亚细胞定位，评估两个基因的表达效率，以便调整转化条件。 𐟌🠥“ꤺ›基因适合在原生质体中定位，哪些适合在烟草植株中定位？选择受体时，通常根据研究物种来决定。原生质体是没有细胞壁的不完整植物细胞，对外界逆境反应敏感，某些基因表达后可能对原生质体有毒，导致无法观察到荧光。烟草体系中，注射法浸染烟草细胞，完整的植物细胞对逆境的抗性更强，表达后容易观察到荧光。如果基因表达时间较长，更适合在烟草中操作。烟草细胞中细胞壁、细胞质和细胞膜等结构挤在一起，不便于区分，因此定位到具体细胞器的基因更适合在原生质体中表达，观察更明显。 𐟌ž 在烟草BIFC中，什么样的光才算有效光？制片过程中，应尽可能清理干净叶片表面的杂质，排除气泡。观察显微镜时，激发光电压不能打得太高，烟草细胞的轮廓应清晰可见，且分布均匀。 𐟌𑠤𘺤𛀤𙈦œ‰些基因在原生质体中定位显示无信号或信号弱？不同基因之间的表达差异很大，表达时间也各有不同。针对无信号的结果，建议至少重复两到三次实验，如果还是没有结果，建议使用烟草叶片侵染，因为有些基因对原生质体有毒，且在原生质体中表达时间比烟草短。其次，原生生物和真核生物对相同基因的表达存在一定差异。针对信号弱的结果，建议在载体构建上增强启动子，并至少重复两到三次转化。以上是BiFC实验答疑的全部内容，大家关于实验还有其他问题欢迎在评论区交流探讨～

细胞生物学关键知识点与考试重点细胞生物学看似复杂，但实际上并不难。以下是一些重要的知识点和考试重点，帮助你更好地理解和掌握。 𐟓Œ 细胞膜与物质跨膜运输细胞膜的流动性可以通过两种方法证明：荧光标记法和溶脂法。荧光标记法利用荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，观察其在细胞内的运动。溶脂法则通过测定细胞膜的通透性来证明其流动性。 𐟓Œ 细胞质基质与内膜系统高尔基体的结构特征和生理功能是考试的重点。高尔基体是由许多扁平囊组成，主要参与蛋白质的加工和转运。过氧化物酶体和溶酶体的异同点也是考试中的常见问题。 𐟓Œ 蛋白质分选与膜泡运输蛋白质分选的概念、基本途径及主要类型、加工修饰和功能分布是考试中的重点内容。信号肽假说的主要内容、证明信号肽存在的关键实验以及提出该假说的科学家也是考试中的常见问题。 𐟓Œ 论述题细胞膜的流动性如何用实验证明？请举例两种方法证明细胞膜的流动性，并说明原理。生物膜的基本特征是什么？这些特征与它的生理功能有什么联系，受哪些因素影响？什么是信号肽？信号肽假说的主要内容是什么？证明信号肽存在的关键的两个实验是什么？发现信号肽并提出信号肽假说的科学家是谁？哪一年获得诺贝尔奖？ 𐟓Œ 其他重要知识点蛋白质分选的概念、基本途径及主要类型、加工修饰和功能分布。生物膜的基本特征和生理功能。细胞膜的流动性和生物膜的结构与功能的关系。通过这些知识点和考试重点的掌握，你可以更好地理解和掌握细胞生物学的核心内容，取得更好的成绩。

探索SNAP、Halo标签的神奇世界𐟌 今天，我想和大家聊聊那些听起来很酷炫的自标记标签，比如SNAP、Halo等等。它们到底是怎么工作的？有哪些应用场景？让我们一起来探索吧！ SNAP、Halo标签的原理𐟔슊首先，我们来聊聊SNAP标签。这个标签系统利用了一个特殊的蛋白质片段，叫做SNAP-tag。你可以把这个标签加到任何你感兴趣的蛋白质上，然后通过一些化学手段，把这个标签和特定的染料结合起来。这样一来，你就能在显微镜下看到这个蛋白质的位置和分布了。是不是很酷？类似地，Halo标签也是通过类似的方式工作的。它利用了一个叫做Halo-tag的蛋白质片段，可以和你感兴趣的蛋白质结合，然后通过特定的荧光染料来标记。这种方法在生物学研究中非常有用，尤其是当你需要追踪蛋白质在细胞内的动态变化时。多种多样的自标记标签𐟌ˆ 除了SNAP和Halo标签，还有很多其他的自标记标签，比如CLIP-tag、Spy-tag、Sortase-tag、FIAsH-tag和Bio-tag等等。每一个标签都有它独特的应用场景和原理。比如，FIAsH-tag利用了四半胱氨酸序列和含砷染料的结合，虽然有些毒性，但在神经科学研究中非常受欢迎。而Bio-tag则是利用生物素化酶在蛋白质的特定位点上进行生物素修饰，广泛用于研究蛋白质-蛋白质相互作用。多思考多动脑𐟧 每一个自标记标签背后都有一段精彩的故事和丰富的应用场景。我们可以通过这些工具来更好地理解细胞内的复杂网络和机制。所以，如果你对生物学感兴趣，不妨多了解一下这些自标记标签的工作原理和应用方法。相信我，它们会让你的实验设计更加丰富多彩！好了，今天的分享就到这里啦！如果你有任何问题或者想法，欢迎在评论区留言哦！我们下次再见！𐟑‹

研究基因功能的六大经典策略说到研究基因功能，其实前辈们已经总结出了一些经典套路，今天就来聊聊这些套路背后的逻辑和方法。基因必要性：敲除或敲低看看首先，我们得搞清楚这个基因是不是必要的。常用的方法有DNA层面的基因敲除（比如CRISPR及其衍生技术），RNA层面的RNAi和morpholino，还有蛋白层面的Trim-Away和抗体block。敲除或敲低后，我们要检测一系列指标，从细胞水平到生物体水平，看看这个基因到底有多重要。细胞水平上，我们会关注大小、凋亡和增殖；组织水平上，看形态和分化；生物体水平上，那就复杂了，包括存活、运动、进食、应激和代谢等等。 RNA表达谱：看看基因在不同阶段的表达量接下来，我们想知道这个基因在不同发育阶段的表达量。常用的技术有原位杂交、RNA测序、单细胞测序和RNA FISH（比原位杂交分辨率更高）。如果你想了解这个基因在模式动物中的表达情况，可以查找DBTMEE和Zfin等数据库。蛋白表达谱：定位和表达量蛋白表达谱的检测方法有免疫组化和免疫荧光，可以直接看到蛋白的定位和有无；Western blot则可以看到表达量，虽然比免疫荧光容易，但需要更多样品，且不能分辨细胞类型。尽量两种方法互相佐证。过量表达效果：看看过表达会怎样过量表达的效果可以通过DNA水平的转基因和artifical chromosome，或者RNA和蛋白水平的显微注射来实现。检测指标和前面类似，可能会出现在各种层面上，尤其是1中出现异常的地方。同时，过量表达还可以和1中的rescue一起做，更能验证特异性。相互作用蛋白：找到互作伙伴通过免疫共沉淀（co-IP）后打质谱，我们可以找到一些已知功能的互作蛋白，把我们的基因放到功能网中。比如，如果质谱结果显示你的基因富集到核孔复合体蛋白，那你的基因很可能是一种与穿核运动有关的蛋白。如果你的蛋白富集到两个复合体，可能暗示了它们通过你的蛋白crosstalk。转录因子：细胞核里的基因对于在细胞核里的基因，我们可以猜测是不是转录因子。可以通过网站预测有没有DNA结合结构域。如果没有序列信息，那可以进一步增加实验的精度和拍照的分辨率，看看在细胞核中的具体位置（靠近核膜、与chromatin重合、或者在核仁中）。细胞质中的蛋白如果是细胞质中的蛋白，那也需要增加精度，看看在胞质中的具体位置，然后推测一下可能与哪些亚细胞结构有关（线粒体、内质网、Golgi），和这些结构的marker共同染色，看看有没有共定位。这样做的目的就是把你的基因定位到特定的亚细胞结构中，然后进一步推测其功能，再根据不同的细胞器功能去做进一步的对1和4的检测。希望这些套路能帮到你，让你在研究基因功能时少走弯路！𐟒ꀀ

传统WB与荧光WB：谁更胜一筹？ 𐟌Ÿ近年来，Western Blot实验经历了一场从“黑白”到“彩色”的革命——荧光WB的出现，解决了传统WB实验中常见的难题，如背景颜色深、目的条带不明显、分子量不准确等。那么，荧光WB到底是什么？它与传统WB有何不同？ 𐟔常见的Western Blot显色方法主要有：放射自显影、底物化学发光ECL、底物DAB呈色。荧光WB的实验步骤与传统WB相似，但最主要的区别在于二抗的选择。传统WB的二抗是酶标记的，而荧光WB的二抗则是荧光标记的。这样，就可以省去繁杂的显影和照胶步骤，直接利用荧光成像仪进行成像。 𐟟ⰟŸᰟ”𕨍祅‰WB的优势： 1️⃣ 灵敏度高：荧光免疫印迹的灵敏度比传统化学发光印迹更高。这是因为红外区域膜上的低背景荧光产生了高的信噪比。配备有光电倍增管（PMT）的激光扫描成像仪可以放大弱信号几个数量级。 2️⃣ 量化精度高：通过复用技术，可以同时检测相同印迹上的两种抗原。例如，可以分析感兴趣的蛋白，并利用内参蛋白（如GAPDH、肌动蛋白）进行均一化，无需剥离或重新检测印迹，从而提高量化精度。 3️⃣ 线性动态范围广：为了确保可靠的定量测量，从Western Blot获得的信号必须在线性动态范围内。这意味着信号强度与目标蛋白质丰度呈线性相关。通过激光成像仪获得的静态荧光值是定量的，因为荧光强度与蛋白质丰度成正比，这提供了广泛的线性范围。 4️⃣ 一致性和可重复性强：荧光信号仅取决于目标抗原的量，而化学发光信号受多种变量影响，如酶底物反应，难以控制，导致结果不一致和不可重复。 5️⃣ 信号持续时间长：荧光信号非常稳定。可以将印迹存储在冰箱中，在准备好之后再进行成像。 𐟔–综上所述，荧光WB相较于传统WB在灵敏度、量化精度、线性动态范围、一致性和可重复性以及信号持续时间等方面都具有显著优势。这些特点使得荧光WB成为现代分子生物学实验中的一项重要技术。

物理参数：英文名称：MAL-PEG-Cy5.5，Maleimide-PEG-Cyanine5.5，Maleimide-PEG-Cyanine5.5，Maleimide-PEG-Cy5.5 中文名称：荧光染料Cy5.5-聚乙二醇-马来酰亚胺分子量：1k、2k、3.4k、5k、10k等规格标准：1g，5g，10g 储存条件：-20℃，干燥，避免频繁解冻和冷冻产品可定制：根据需要的试剂规格进行定制，具体的可以线上和商家沟通品牌名称：西安凯新生物科技有限公司简述：该化合物结合了马来酰亚胺（Maleimide）的反应活性、聚乙二醇（PEG）的链段柔韧性以及Cyanine5.5（Cy5.5）荧光染料的光学性质。马来酰亚胺官能团具有良好的反应性，可以与含有巯基（-SH）的生物分子（如蛋白质、肽和寡核苷酸）发生特异性的共价结合。 Cy5.5荧光染料具有良好的荧光量子产率和较长的荧光寿命，可用于细胞和生物分子的荧光标记和成像。生物标记与成像：Maleimide-PEG-Cyanine5.5常用于生物分子的荧光标记，如蛋白质、核酸等。通过荧光显微镜等技术，可以观察标记后的生物分子在细胞内的分布和交互作用，从而研究生物过程和机制。细胞成像：该染料可用于细胞成像，研究细胞的结构和功能，以及细胞与细胞之间的相互作用。生物分子的定量与分离纯化：可应用于蛋白质质谱分析、蛋白质组学等研究中。

英文名：Amino Phalloidin 中文名：氨基鬼笔环肽供应商：陕西新研博美生物科技规格：5mg，10mg，25mg 纯度：≥95% 溶解性：溶于水或部分有机溶剂稳定性：稳定性较好，但需注意避免频繁解冻，保持干燥、避光和避氧气的环境。氨基修饰的鬼笔环肽（Amino-phalloidin），生物活性类似于未标记的鬼笔环肽，但包含=氨基官能团，用于偶联反应。Amino Phalloidin是一种细胞生物学工具，属于毒素类小分子，能够高度特异性地与细胞内的肌动蛋白纤维（F-actin）结合，从而用于标记和可视化细胞骨架中的这些关键结构。在细胞生物学研究中，Amino Phalloidin通过荧光标记（如绿色荧光蛋白GFP或其他荧光染料）后，被广泛用于观察细胞形态变化、细胞运动、细胞骨架重排等过程，为理解细胞功能、细胞分化提供了重要的实验手段。其高亲和力和低细胞毒性使得Amino Phalloidin成为研究细胞骨架不可或缺的工具之一。

中文名：Cy2-人血清白蛋白英文名：Cyanine2-HSA，Cy2-HSA Cyanine2-HSA主要由Cyanine2（一种常用的荧光染料）与人血清白蛋白（HSA）结合而成。Cyanine2具有较高的荧光量子产率和稳定性，能为生物分子提供明亮的荧光信号。HSA是一种重要的血浆蛋白，具有很高的亲和力和结合能力，能与多种生物分子结合。 Cyanine2-HSA可以实现对细胞、蛋白质等生物分子的标记和追踪，对生物分子的荧光标记和追踪具有显著效果。由于其优异的荧光亮度和稳定性，Cyanine2-HSA成为生物成像、荧光探针等领域的理想选择 #试剂##化学##科研试剂#