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差速离心最新视觉报道_差速离心和密度梯度离心的区别(2024年11月全程跟踪)

内容来源:卡姆驱动平台所属栏目:热点更新日期:2024-11-27

差速离心

#献血100次可免费吃酒店自助餐# 第一眼看这个新闻标题,我心理也是震惊且不舒服的,毕竟谁献血100次真的为了吃一次自助餐呢?但仔细想想,血站不弄这个活动也完全可以,何必给自己惹是非。而且这“100次献血”并不是指全血,是包括了单采血小板。 -什么是捐献单采血小板? 就是采血过程中是利用“差速离心”的原理,使用血液成分分离机采集来自一个献血者的血小板,而其它血液成分同时还会回输给献血者(划重点!) 所以,单采血小板是可以间隔半个月就再次捐献血小板,而捐献全血后再次捐献全血的间隔时间要6个月。 因为临床上有一部分人其实是单纯血小板低,比如再生障碍性贫血、白血病、甚至化疗后所产生的骨髓抑制,都会引起血小板的降低,从而影响患者的凝血功能,这部分患者往往更需要的成分输血,输注血小板。 -什么是捐献全血? 献全血是采集血管内的全部血液成分,采血机构一般会根据献血者的情况建议一次献200毫升、300毫升或400毫升。 我们人体血液总量大约占体重的7~8%,一般成人的血液总量为4000~5000毫升,但这些血液并非全部都参与了循环,真正参与循环只有80%左右,另外还有20%的血液贮存在脾、肝、肺等“贮血库”里面,在人体血循环需要血液补偿时,这部分血液会连续不断地释放,参与到血液循环中。所以,即便是一次献血400毫升,也只占总血量10%左右。 -献血前身体评估 去参加献血时,也并非无论你身体状况如何,都给你抽一袋,专业人员都会进行详细的评估和筛选,比如年龄,体重,血压,体温,有无乙丙艾梅,上次献血时间等(献全血者,两次时间至少间隔6个月及以上)。 这不仅是对需要输血的人负责,也是对献血者的负责。从某种意义上来说,如果你符合献血标准,说明你的身体还挺棒的。 我相信自发献血的朋友,没有人真的是为了一顿自助餐,也没有人真的是为了献血后的小礼品,其实大家更多是一种自发的善良。 而你献出的血,或许可以在不远的地方,拯救另一个人的生命…… 「健闻登顶计划」「微博新知」

1、细胞质 (1)概念:细胞膜以内、细胞核以外的整个区域的一切结构和物质都属于细胞质。 (2)组成:细胞质基质和细胞器 2、植物细胞壁 (1)成分:主要由纤维素和果胶构成 (2)功能:支持和保护细胞 3、分离细胞器的方法——差速离心法 (1)原理:主要是采取逐渐提高离心速率分离不同大小颗粒的方法。 (2)过程(如图)

𐟔젧𛆨ƒž器分离技术:差速离心法的奥秘 𐟌€ 𐟌𑠧𛆨ƒž器分离的原理: 差速离心法,利用细胞器的大小和密度差异,在离心力的作用下进行分离。大而重的细胞器沉降速度快,先沉积在离心管底部;小而轻的细胞器则留在上清液中。通过逐步增加离心速度,可以依次分离出不同的细胞器。 𐟔砦“作步骤: 1️⃣ 制备组织匀浆 𐟔꠩斥…ˆ,将细胞破碎以释放细胞器。可采用机械破碎(如匀浆器)、超声破碎或化学试剂处理等方法。例如,将动物组织(如肝脏)剪碎后放入匀浆器中,加入适当的缓冲液(如蔗糖缓冲液),在冰浴条件下进行匀浆。缓冲液有助于维持细胞内环境的稳定,防止细胞器受损。 𐟚력Œ€浆过程要注意力度和时间,避免细胞器过度破碎。对于脆弱的线粒体,过于剧烈的匀浆可能会影响后续的分离效果。 2️⃣ 低速离心(第一次离心) 𐟔„ 将匀浆液转移到离心管中,在较低的转速下(一般为1000 - 2000g)进行离心。这一步主要是去除未破碎的细胞、细胞核以及一些较大的细胞碎片,它们会在离心力的作用下沉淀到离心管底部,而上清液中则含有其他较小的细胞器。 3️⃣ 中速离心(第二次离心) 𐟔„ 小心地将第一次离心后的上清液转移到新的离心管中,然后提高离心速度(一般为10000 - 20000g)。此时,线粒体等较大的细胞器会沉淀下来,因为它们的大小和密度使得它们能够克服液体的浮力和阻力而沉降。 4️⃣ 高速离心(第三次离心) 𐟔„ 再次转移上清液到新的离心管中,进一步提高离心速度(一般为100000g以上)。这一步可以使内质网、溶酶体等更小的细胞器沉淀。经过这一步骤后,就可以在不同的沉淀部分得到不同的细胞器,从而实现细胞器的分离。 通过以上步骤,差速离心法能够有效地分离出各种细胞器,为细胞生物学研究提供重要的实验材料。

密度梯度离心分离细胞组分的方法详解 𐟌𑊥𚦦⯥𚦧滥🃦˜露€种分离细胞组分的有效方法,它利用不同组分在密度梯度溶液中的沉降速度差异来实现分离。以下是具体步骤: 细胞破碎与匀浆 𐟏‹️‍♂️ 通过低渗匀浆、超声破碎或研磨等方法,破坏细胞质膜,形成包含细胞核、线粒体、叶绿体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器和细胞组分的混合匀浆。 差速离心 𐟌€ 利用不同离心速度产生的不同离心力,将各种质量和密度不同的亚细胞组分和颗粒分开。 密度梯度离心 𐟌 将待分离的细胞组分小心地铺放在含有密度逐渐增加的高溶解性惰性物质(如蔗糖)形成的密度梯度溶液表面。通过重力或离心力的作用,使样品中不同组分以不同的沉降率沉降,形成不同的沉降带。各组分的沉降率与它们的形状和大小有关,通常以沉降系数(S值)表示。 速度沉降 𐟚€ 用于分离密度相近而大小不一的细胞组分。离心前,将细胞匀浆物放置在蔗糖浓度梯度(通常为5~40 g/100 mL)溶液的上层,各种细胞组分根据它们的大小以不同的速度沉降,形成不同的沉降带,然后分别收集不同的沉降带中的组分,用于分析。 等密度沉降 ⚖️ 用于分离不同密度的细胞组分。细胞组分在连续梯度的高密度介质中经离心力场长时间的作用沉降或漂浮到与自身密度相等的位置,形成不同的密度区带。这种方法非常灵敏,甚至可以将掺入重同位素如14C或15N的生物大分子和未标记物分开。 密度梯度离心不仅适用于分离细胞组分,还可以用于分析细胞结构和功能,是生物学研究的重要工具。

差速离心法:离心机的核心操作 你知道离心机90%以上的操作是什么吗?答案就是——差速离心法!𐟌€ 基本原理 差速离心法(Differential Centrifugation)主要是根据颗粒大小和密度的差异来分离细胞器、细胞碎片或其他生物大分子。简单来说,就是通过离心力的作用,不同大小和密度的颗粒会以不同的速度沉降。较大的颗粒沉降得快,会先到离心管底部;而较小的颗粒沉降得慢,会留在上清液中。通过逐步增加转速,我们可以依次分离出不同大小的颗粒。 操作步骤 样本制备 首先,你需要获取合适的样本。如果是研究细胞内的细胞器,就需要将细胞破碎,使细胞器释放出来。破碎细胞的方法有很多,比如机械破碎(使用匀浆器等)或超声破碎。以动物细胞为例,通常采用匀浆器将细胞在适当的缓冲液中匀浆,制成细胞匀浆。 第一次离心 将细胞匀浆转移到离心管中,放入离心机。以相对较低的转速(如1000-2000rpm)离心一定时间(通常几分钟到十几分钟)。离心结束后,管底会形成沉淀,主要包含较大的颗粒,如细胞核和未破碎的细胞。上清液则含有其他较小的细胞器和生物分子。 分离沉淀和上清液 小心地将上清液转移到新的离心管中,注意不要搅动沉淀。沉淀部分可以根据研究需要进一步处理,比如进行成分分析等。 再次离心上清液 对新离心管中的上清液提高转速(如10000-20000rpm)进行第二次离心。此时,又会有一些颗粒沉淀下来,这些沉淀可能包含线粒体等细胞器。再次分离上清液和沉淀,沉淀用于分析相应的细胞器,上清液可以进行下一轮更高转速的离心来分离更细小的颗粒,如核糖体等。 应用领域 细胞生物学 差速离心法用于分离细胞内的各种细胞器,帮助研究人员了解细胞器的结构和功能。例如,通过差速离心法分离出线粒体后,可以对线粒体进行呼吸功能、膜电位等方面的研究,对于探索细胞能量代谢等过程非常重要。大家所熟知的外泌体或细胞外囊泡的初步分离也是通过差速离心法来实现的。 生物化学和分子生物学 差速离心法可以分离生物大分子和复合物。在蛋白质和核酸的研究中,用于去除杂质颗粒,如在提取某种特定的蛋白质时,先通过差速离心去除细胞碎片和其他不需要的细胞器,然后再进行后续的纯化步骤。 微生物学 差速离心法用于分离微生物细胞内的成分,也可以用于从混合微生物群落中初步分离不同大小的微生物个体。比如在研究土壤微生物时,分离不同大小的细菌和真菌等微生物细胞。 优缺点 优点 操作相对简单,不需要复杂的设备,普通的离心机就可以进行操作。 可以快速地对样本进行初步分离,能够在较短的时间内得到不同大小级别的颗粒组分。 缺点 分辨率有限,对于大小和密度相近的颗粒很难有效地分离。例如,一些大小相似的细胞器可能会在同一离心条件下沉降(比如植物细胞的线粒体和叶绿体),导致分离不纯。 容易受到样本的性质影响,如样本的浓度、黏度等。如果样本浓度过高,颗粒之间可能会相互干扰沉降;如果样本黏度大,会降低颗粒的沉降速度,影响分离效果。 总结 我们平时用离心机收集一下沉淀、去除一下杂质、做一下样品的澄清,这些都属于简单的差速离心。选择合适的离心力将目标样品收集或去除,这也是使用离心机最多的实验操作。但是如果一些样品和杂质的大小和密度都类似,比如线粒体和叶绿体,外泌体和病毒颗粒,这些样品的大小和密度都类似,很难选择合适的离心条件来分开。这个时候就需要我们对离心步骤进行优化了,选择速率区带或者等密度梯度离心。 希望这篇文章能帮你更好地理解差速离心法,下次使用离心机时,不妨试试这个方法,或许会有意想不到的收获哦!𐟌€

考研《细胞生物学》名词闯关合辑(十一) 嘿,大家好!今天给大家带来一波《细胞生物学》的名词闯关,准备好迎接挑战了吗?𐟒ꊥ𗮩€Ÿ离心(differential centrifugation) 𐟌Ÿ 差速离心是个挺有意思的方法,主要是利用不同离心速度产生的离心力,把各种质量和密度不同的亚细胞组分和颗粒分开。简单来说,就是先用低速离心让大颗粒沉到底,小颗粒留在上清液里。然后收集沉淀,再用高速离心把小颗粒沉降。这样一步步来,就能分离出不同大小的颗粒了。 密度梯度离心(density gradient centrifugation) 𐟌ˆ 这个方法就更高级了。它的原理是,不同组分的沉降率跟它们的形状和大小有关,通常用沉降系数(S值)来表示。在超速离心机的巨大离心力作用下,即使是相当小的RNA和单一的酶,也能根据它们的沉降系数相互分离。具体操作是,用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度,然后把细胞混悬液或匀浆放在介质的最上层。通过重力或离心力场的作用,细胞中的不同组分会以不同的沉降率沉降,从而得以分层、分离。这个方法主要有两种:速度沉降和等密度沉降,常用的介质有蔗糖和氯化铯等。 杂交瘤(hybridoma) 𐟐🙤𘪥词在单克隆抗体制备过程中可是个大明星。杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和淋巴B细胞经过细胞融合形成的。它们既有亲本细胞的特性,又能分泌特异抗原的抗体。更神奇的是,这些细胞还能像肿瘤细胞一样,在体外培养条件下或移植到体内无限增殖。是不是很酷? 好了,今天的名词闯关就到这里。希望大家都能在考研的道路上顺利过关!𐟎“

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