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提rna最新视觉报道_www.sony.com.cn(2024年12月全程跟踪)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：热点更新日期：2024-11-29

提rna

研究生同门那些事儿：真是谁爱读谁读哎，说到研究生同门，我真是有一肚子苦水要倒。摊上个既得利益的同门，真是让人无语。什么好东西都占着，什么坏事还得我给他担着。他的大创项目，他带着做实验，结果出意外了，我还要陪着写检讨，就因为用的是我的样本。真是牛，你是世界第一牛，你牛逼，你跟太阳争第一。再说说我的导师，我的小导。年前年后转录组花了大几万，宁愿把其中一个基因给大创，也不愿意给我。我在延续师哥师姐的实验苦海里挣扎，他拿着转录组的所有韦恩图火山图美美写综述。我在用我师兄不怎么好的抗体跑不出来WB的时候，他拿着他的导师批准新买的抗体，根据转录组已有结果美美跑出完美条带。我每天配药摸四种药物浓度CCK8qPCRWB，他却被导师亲自拨过去两个大创帮他做两个基因的实验。在他领着大创做实验的时候，我忙得跟个陀螺一样，请他帮我提一下RNA，结果他的大创在帮我提RNA的时候，TRIZOL弄到皮肤上。在我前后询问三四次的情况下，他只说是弄到衣服上，等皮肤被腐蚀了才吭声。他吓得跟耗子一样带他去医院，然后微信告知我“这事咱们俩都有责任”的时候，说实在的，我觉得他很棒，真的#研究生 #硕士毕业 #研究生同门 #同门关系

眼霜推荐：抗老补水哪款更佳？姐妹们，眼霜作为我们日常护肤的必备品，选择一款适合自己的真的是太重要了！𐟤馈‘今天就来给大家种种草，分享几款我亲自用过的眼霜，看看哪款抗老补水更佳！都是我真实的感受，绝对不吹牛哦~ 𐟒穛…诗兰黛老版眼霜：抗老补水一把手使用体验：我长期使用雅诗兰黛小棕瓶眼霜，感觉眼下干纹有减少，化妆卡粉现象也改善了很多。𐟘保湿补水效果超赞，还能改善黑眼圈，真的是一举多得！优点： 1️⃣ 抗蓝光抵御手机和电脑带来的辐射，基础保湿补水，改善黑眼圈。 2️⃣ 质地轻盈吸收快，可以渗透直达肌底。 3️⃣ 对有黑眼圈、眼周肌肤暗沉和松弛的人群都比较友好。缺点：虽然性价比高，但管口设计有点难取底下的精华，需要一点技巧。 𐟒瓋II RNA眼霜：细腻好吸收使用体验：这款眼霜的质地真的很细腻，延展性也很好。𐟑€涂在眼周瞬间保湿和油润，不厚重好吸收。使用起来没负担，还能淡化黑眼圈和眼周细纹。优点： 1️⃣ 保湿、提亮、淡化黑眼圈、去细纹效果都很不错。 2️⃣ 乳霜质地细腻易推开，不粘腻。 3️⃣ 含有多种有效成分，如Pitera、烟酰胺等，具有抗老、修护等多重功效。 𐟒祅𐨔𛨏纯眼霜：滋润防干纹使用体验：这款眼霜的质地非常滋润，涂匀后按摩便吸收了。𐟒†‍♀️对于缓解早期的眼周干纹、细纹效果很明显。保湿效果满分，干纹基本消失，眼袋和暗沉也有改善。优点： 1️⃣ 全面淡纹天花板，连鱼尾纹都明显淡下去了。 2️⃣ 肤感好不厚重轻薄好推开且不长脂肪粒。 3️⃣ 保湿效果杠杠的淡纹效果明显社交距离下看不出眼纹。缺点：去黑眼圈效果一般且没有小勺子取用稍微有点不卫生。在寻找适合自己的眼霜时我可是费了不少心思呢~𐟒–如果让我推荐一款的话我会倾向于雅诗兰黛老版眼霜因为它在抗老补水方面表现都很出色而且性价比也很高！当然啦这只是我的个人看法大家最好还是根据自己的肤质和需求来选择哦~✨

快速提RNA！Trizol+柱法 𐟌🠦ƒ𓨦快速且高效地提取RNA吗？Trizol结合RNA纯化柱的方法可以帮你实现这一目标。以下是详细的步骤指南： 1️⃣ 裂解：使用700的Trizol裂解适量的细胞或组织，室温下放置3-5分钟。 2️⃣ 萃取：加入140的氯仿或70的BCP（1-溴-3-氯丙烷），快速振荡15秒，然后室温静置3分钟。 3️⃣ 分相：在4℃下，以12000g离心15分钟。 4️⃣ 上柱：小心吸取上层水相（约350）至新的1.5mL离心管中，加入等体积的70%乙醇，吹吸混匀后，转移至RNA纯化柱中。以12000g离心1分钟，弃废液。 5️⃣ 洗涤1：加入700的75%乙醇，以12000g离心30秒，弃废液。 6️⃣ 洗涤2：再次加入700的75%乙醇，以12000g离心30秒，弃废液。 7️⃣ 干燥：以12000g离心1分钟，将柱子转移至1.5mL离心管上，开盖晾2分钟。 8️⃣ 洗脱：在柱子膜中央加入适量无酶水（≥20），静置2分钟后，以12000g离心1分钟，弃柱子。RNA短期置于冰上保存，长期-80℃保存。 𐟔 请注意，RNA纯化柱需要自行购买，Trizol可以使用多种平替产品替代。确保购买不需要预处理的纯化柱，因为这类纯化柱已被广泛使用。

RNA提取质量不高？试试这些方法吧！今天提取了24个RNA样本，感觉自己做实验越来越熟练了，但也有点麻利和暴躁。使用的试剂盒是tiangen的，听说这个试剂盒评价一般，全式金的似乎更好，提的RNA更多。不知道有没有这回事。自己测了一下A260/A230，只有1.4-1.5的样子。查了一下资料，纯DNA的A260/A230=1.8，纯RNA的A260/A230=2.0。所以如果A260/A230小于2.0，说明RNA被DNA或其他碳水化合物、盐类、有机溶剂污染了。比如我用的试剂盒最后一步是加蛋白质漂洗液，如果没洗干净或者没晾干，就会造成污染。总的来说，可能是我提取的RNA太多，操作上出了问题。本来觉得可能是细胞量太少，下次准备用6孔板代替12孔板。但想了想，细胞量少应该影响的是RNA浓度，而不是A260/A230比值。有人说最好在超净台里做实验，但我们实验室的超净台很紧张，主要是养菌的操作。生物安全柜离实验室很远，甚至不在同一层楼。我们组里只有我一个人做细胞实验，所以设备分配上有点尴尬。最主要的是，用TIANGEN试剂盒提RNA需要频繁离心，离离心机远了真的很烦人。不知道大家是不是在超净台做的？你们的试剂盒离心次数多不多？总之，看到网上有人说A260/A230 1.4以上就可以用，甚至1.3也可以试试。我辛辛苦苦提了一下午的RNA，肯定还是要拿它做个RT-PCR的哈哈哈。下次我要换个试剂盒，并且一次性少提一点。

Takara逆转乾坤！挣扎了一个月的qPCR，结果总是差强人意。RNA提了无数次，SYBR换了又换，引物也换了，还是不行！甚至一度想换掉这台机器。直到有一天，我发现了Takara的小样试用活动，抱着试试看的心态提了一次，结果竟然好到尖叫！谁能理解那种激动的心情！以前用Yeasen的试剂，ACTIN都要30个循环才能出来，现在用Takara的，15个循环就搞定了！简直不敢相信！我宣布，Takara就是我的神！以后再用Yeasen的试剂，我就是那个𐟐𖯼虽然现在的心情有点像打广告，但真的不是！谁能理解我此刻的激动心情呢？

今天好累好困下午师姐要去看牙紧急做的提rna和逆转录主要是人有说明书就什么都能干成

「李李的plog日记」组会4天倒计时[努力][努力][努力] 现在感觉每天可以做100个实验一天提两批rna 反转跑10板荧光加侵染轻轻松松已经下楼了想起来可以在组会前再出组GUS 马上掉头回去摇菌行动力这辈子没这么强过提了两年rna 第一次发现裂解液里要加巯基乙醇差点让臭晕了但是为啥不加能提出来加了反而提不出来了[并不简单][并不简单] 做一晚上实验吃根同门烤的烤肠感觉一点都不累了强烈跟大家建议把园艺站的空气炸锅搬来实验室已经在筹划了[拳头] 每天真的斗志满满奖励自己组会开完第二天就回太原玩同门：每次你开组会前就跟不要命一样做实验开完就往太原跑还真是[春游家族][春游家族]

很累提了一天RNA 希望质检都通过！

不跑电泳就谈RNA质量？那都是瞎扯！有些人啊，真是让人无语，不跑电泳就敢谈RNA质量的好坏，简直是耍流氓！𐟘䠤𘺤𛀤𙈨🙤𙈨ﴥ‘⯼Ÿ因为很多仪器，比如NarnoDorp2000，根本没法区分DNA和RNA。换句话说，就算你的RNA完全降解了，这种仪器也能读出高纯的OD比值和高浓度数据。所以啊，仪器数据在RNA电泳图合格的前提下才有参考意义！ Trizol沉淀法：看28:18s比例首先，咱们来说说Trizol沉淀法。这种方法提取的RNA，28:18s的比例至少得是1.5:1。为啥呢？因为用异丙醇或乙醇沉淀的时候，5s的小片段也会一起沉淀下来。所以，如果看到明显的5s条带，那其实是正常的，不提示降解。 RNA吸附柱法：两个标准接下来是RNA吸附柱法。这个方法有两个判断标准： 28s:18s=2:1 这个标准的意思是，28s和18s的条带要清晰，尤其是亮度。28S比18s越亮越好。为啥呢？因为降解总是从大片段开始，从28s降解到18s，最后降解到5s。如果最容易降解的28s都没有降解，那就可以推理出mRNA是完好的。 5s带不出现第二个标准是5s带不出现。总RNA包括mRNA、tRNA和rRNA。虽然现在大家都默认总RNA提取试剂盒只对mRNA、tRNA、rRNA负责，但实际情况是，这些试剂盒只提出来的是这三种RNA的混合物，重点是对mRNA负责。所以，各大公司的总RNA提取试剂盒案例所配的RNA电泳图，只有代表“总RNA”的2条带——28s和18s；代表microRNA的5s带，要不没有，要不很弱。电泳图解析看看这几个电泳图吧：泳道2：完全正常的RNA——28s:18s比例大约是2:1，5s位置也基本见不到带。这就说明完全正常，无降解。泳道3,4：完全降解了——28s和18s已经基本降解光了。两条带都看不见了。最后降解成的小片段正好和5s大小一致，所以在5s位置看到了大量的一条浓浓的降解小片段。泳道1,5,6,7,8,9：部分降解了——28s是RNA大片段，更容易降解，所以28s首先降解，表现为28s条带变淡，18s条带明显变粗，造成28s：18s的比例竟然小于1了。然后在不该看到条带或者应该是很弱的5s位置，出现了较明显的5s大小的降解带。总之，不跑电泳就谈RNA质量好坏，那都是瞎扯！𐟘䠥𘌦œ›大家都能通过正规的电泳图来判断RNA的质量，别被那些不靠谱的说法忽悠了！

植物遗传转化：从零开始到成功的指南 𐟌Ÿ 前期准备构建表达载体 𐟛 ️ 设计引物：根据需求设计引物，利用PCR扩增基因全长或CDS。质粒提取及同源重组：提取空载体质粒，进行酶切连接，然后转入大肠杆菌进行测序。农杆菌转化：将测序正确的菌液扩繁、保菌后提质粒，转入农杆菌。建立再生体系 𐟌𑊩€š过文献查阅或正交试验建立相应外植体的再生体系。如果不需要组织培养，此步可忽略。 𐟌Ÿ 转基因操作准备农杆菌液：取过夜摇好的农杆菌液50ml，室温5000rpm离心10min收集菌落。重悬菌体：加入重悬液（如MS液）将菌体OD600稀释至0.5，将外植体浸没于重悬后的菌液5min。培养外植体：将外植体转入培养皿中，用锡箔纸包好避光室温下培养72h。再生培养：72h后将外植体转入正常光照条件进一步进行再生培养，直至获得完整植株。 𐟌Ÿ 阳性苗的获得阳性苗筛选 𐟔 在抗性板上筛选阳性苗，如果有GFP或Cherry等荧光基因，可以使用荧光观察法。阳性苗鉴定 𐟔슥𐆩˜𓦀程—进行PCR鉴定和提取RNA反转录后进行qRT-PCR进行鉴定。

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