油红o染色前沿信息_油红o染色原理(2024年12月实时热点)
油红O染色浓度 ꢜ覜近在做细胞染色实验,发现油红O染色浓度真是个宝藏!碜褻天就跟大家聊聊油红O染色浓度的那些事儿。 ꦲ⏦色浓度选择 油红O染色剂有不同的浓度选择,最常用的是0.5%和5%。0.5%的浓度适合大部分细胞和组织切片,而5%的浓度则适合特别顽固的脂肪组织。配制5%的储存液也很简单,用500ml异丙醇溶解25g油红O粉末即可。染色时按照3:2的比例稀释成工作液。记住,现配现用效果最好哦! ⚖️油红O染色原理 油红O是一种脂溶性染料,能特异性地与脂肪组织中的脂质结合。它在脂肪内的溶解度比在溶液中的溶解度更大,所以当染料加入组织切片时,会迅速从溶液转移到脂肪组织中,使脂肪染色。这个过程就像是染料“搬家”一样,从水搬到脂肪里。这种物理上的吸附作用使脂肪呈现出红色或橙红色,而细胞核则保持蓝紫色。是不是很酷?✨ 覲⏦色注意事项 使用油红O进行染色时,有几个小细节特别重要: 1️⃣ 必须使用冰冻切片,石蜡切片只能对细胞内的脂质有效染色。 2️⃣ 冰冻切片的厚度不易过薄,否则脂质容易掉落。 3️⃣ 苏木素复染时间不宜过长,2分钟就好,时间过长会掉色。 4️⃣ 染色后应立即拍照,时间过长会掉色。 5️⃣ 常规扫描图像可能不清楚,因为油红染色的封片介质折光性不高,建议多层融合扫描。 这些小细节虽然看似繁琐,但都是保证实验成功的关键!ኦ染色浓度真的是一个既简单又实用的实验技巧!希望大家都能轻松掌握。如果有任何问题或者新的发现,欢迎在评论区分享哦!颜耀
油红O染色 젤𛊥䩥大家聊聊油红O染色的那些事儿!油红O染色是一种检测组织或细胞内脂肪含量的方法,非常适用于研究肥胖、脂质代谢等问题。虽然听起来有点复杂,但其实掌握了原理和方法,操作起来也不难。 ꦲ⏧基本原理 油红O是一种很强的脂溶剂和染脂剂,能够高度溶解于脂肪和其他脂质中。它与甘油三酯结合形成小脂滴状,通过物理吸附作用使脂肪染色。当组织切片放入染液时,染料会离开染液,溶于组织内的脂质中,使脂滴呈现橘红色。这个染色过程就像是给脂肪“上色”,方便我们在显微镜下观察和分析。 ⏦色液的配制 配制油红O染色液其实不难,只需要几个简单的步骤。准备好以下材料:油红O粉末、异丙醇和蒸馏水。 1. 油红O饱和溶液:1g油红O粉末加入100ml异丙醇中,充分溶解。 2. 油红O染色液:取足量的油红O饱和溶液,按3:2的比例加入蒸馏水,过滤后使用。 这样配置出来的染色液浓度适中,能够很好地染色而不会产生沉淀。记得现配现用,效果更佳哦! 즲⏦色流程 油红O染色流程其实挺简单的,主要包括固定、清洗、染色、分色、复染和封片步骤。 1. 切片用甲醛-钙固定10分钟,然后用蒸馏水洗。 2. 接着用60%异丙醇浸洗20-30秒。 3. 将切片放入油红O染液中染色10-20分钟,染液可以回收再用。 4. 染色后用60%异丙醇分色至背景无色,再用蒸馏水洗。 5. 接下来用Mayer苏木精复染核1-2分钟,再用自来水蓝化1-3分钟,蒸馏水洗。 6. 最后用甘油明胶封片,显微镜观察并拍照。 整个流程大约需要半小时左右,但操作起来并不复杂。记得染色时要避光进行,效果会更好哦! 这样,油红O染色就完成啦!组织细胞中脂滴呈橘红色,细胞核呈蓝色,非常容易观察和记录。希望大家都能得到满意的结果!如果有任何问题或者想分享你的实验经验,欢迎在评论区留言哦!
油红O染色方案:详细步骤与技巧 油红O染色是一种常用的细胞染色方法,特别适用于脂肪细胞的染色。以下是详细的步骤和技巧,帮助你顺利完成染色实验。 配制工作液 ꊩ斥 ,你需要准备油红O工作液。临用前,将饱和油红O染液与蒸馏水按3:2的比例混合均匀。然后,将混合液置于60~70℃的水浴中加热30分钟,自然冷却后用定性滤纸过滤,得到油红O工作液。注意,这个工作液需要现配现用哦! 细胞样本准备 슥﹤𛆨染色,你需要先吸弃细胞培养液,然后向孔板边缘缓慢加入PBS进行简单清洗。接着,加入4%多聚甲醛固定液,室温固定20分钟,再用PBS漂洗两次。 冰冻切片准备 ❄️ 如果你需要染色的是冰冻切片,从-20℃取出切片后,室温静置5~10分钟恢复至常温。 染色步骤 襯细胞染色: 固定:向孔板内加入少量60%异丙醇覆盖细胞15~20秒,然后吸弃异丙醇,稍微晾干水分。 染色:向孔板内加入油红O工作液覆盖细胞,室温避光染色30分钟,去除染色液。 分化:加入60%异丙醇快速分化3~5秒,然后用纯水洗3次,每次5分钟。 复染:加入苏木素复染核,水洗,分化,水洗,返蓝再水洗。 封片:加入PBS覆盖细胞后显微镜观察,最后用甘油明胶封片剂封片。 冰冻切片染色: 浸染:将恢复至室温的冰冻切片浸一下PBST后,用疏水笔画圈,滴入油红O工作液室温浸染30分钟(加盖避光)。 分化:取出切片,停留3秒后依次浸入两缸60%异丙醇分化3~5秒。 清洗:切片依次浸入两缸纯水中浸洗,每次10秒。 复染:切片浸入苏木素染核,水洗,分化,水洗,返蓝再水洗。 封片:稍微晾干水分后滴加甘油明胶封片剂封片。 通过以上步骤,你就可以成功完成油红O染色啦!希望这篇方案对你有所帮助!
油红O染色实验:详细步骤与注意事项 油红O染色是一种常用的细胞和组织染色方法,主要用于检测中性脂质,如甘油三酯和脂滴。以下是详细的实验步骤和注意事项: 实验准备 样本准备: 组织样本:使用冰冻切片机将组织切成6~10的薄片,确保切片平整、无气泡。 细胞样本:培养细胞至适当密度,并进行固定处理。 试剂准备: 油红O染液:根据需要配制适当浓度的油红O染液,过滤后避光保存。 固定液:如4%多聚甲醛或10%福尔马林。 洗涤液:如70%乙醇溶液或PBS。 苏木素染液:用于复染细胞核。 封片剂:如甘油明胶。 ꠥꌦꤊ切片固定:将冰冻切片放入固定液中,室温固定20~30分钟。固定时间可根据样本类型和实验要求进行调整。 洗涤:使用洗涤液(如70%乙醇溶液)洗涤切片,以去除固定液残留。洗涤时间应适中,避免切片受损。 油红O染色:将切片放入油红O染液中,染色5~15分钟。染色过程中应轻轻摇动切片,使染料均匀分布。 染色结束后,使用洗涤液(如70%乙醇溶液)洗去多余染液,再用流水冲洗30秒。 苏木素复染:将切片放入苏木素染液中,复染2分钟。复染时间不宜过长,以免细胞核着色过深。 复染结束后,使用流水冲洗切片,以去除多余染液。 封片:使用封片剂(如甘油明胶)将切片封好,避免空气接触导致褪色。封片过程中应确保切片平整,无气泡。 观察与分析:使用显微镜观察切片,记录染色结果。脂肪通常呈深橙红色或鲜红色,细胞核呈蓝紫色。根据实验结果进行数据分析,评估脂质含量和分布情况。 ⚠️ 注意事项 切片厚度:冰冻切片不能太薄,过薄的切片可能会导致脂质丢失。 固定时间:固定时间不宜过长,否则可能导致切片变形或脂质丢失。 洗涤步骤:洗涤步骤应严格进行,以避免非特异性着色和背景噪音的干扰。 避光操作:油红O染料对光敏感,实验过程中应尽量避光操作。 及时观察:染色结果不能长期保存,应尽快观察并记录实验结果。 对照实验:建议设计阴性对照和阳性对照实验,以更好地评估染色结果的准确性。
油红O染色实验全攻略:操作步骤详解 쥮验小白必看!油红O染色教学 【染色原理大揭秘】 油红O染料就像是一位专情的侦探♀️,对脂质情有独钟!它能轻松穿越细胞膜,与那些藏在细胞深处的脂质滴来个亲密接触,绽放出耀眼的红色光芒!堥覘下,这一片红海就是脂质堆积的铁证,清晰又迷人~ 【操作步骤全攻略】 固定:将切片置于4%多聚甲醛中固定10分钟,然后用蒸馏水稍微冲洗。 60%异丙醇浸洗:将切片放入60%异丙醇中浸洗20秒。 染色:将切片放入油红O染色液中浸染10分钟。 分色:将切片再次放入60%异丙醇中分化,去除多余的染料,然后用蒸馏水冲洗。 复染细胞核:将切片放入苏木素中复染2分钟,然后用蒸馏水冲洗。 封片:使用甘油明胶封片剂进行封片。 ※实验结果:正常情况下,脂滴为红色,细胞核为蓝色。 【应用小贴士】 油红O染色不仅是脂肪细胞研究的得力助手,也是肝脏病理学诊断的明星工具!젦 论你是想了解脂肪代谢的奥秘,还是探究脂肪肝的成因,它都能帮你大忙!
젥ꌥ䖥 服务:全方位科研支持 我们提供全方位的实验外包服务,涵盖多种科研领域和实验技术。无论是细胞实验、动物实验,还是整体实验代做、转录组实验、测序实验、基因组学实验、药代动力学实验,甚至基因敲除和动物行为学实验,我们都能胜任。찟튊我们的服务还包括多种染色技术,如HE染色、Masson染色、油红O染色、PAS染色等特殊染色,以及组化、荧光单标及多重免疫荧光等实验。我们拥有大型基础实验室,可以线上与科研团队进行答疑,线下参观并提供专业指导。袀슊无论是科研新手还是经验丰富的科学家,我们都能为您提供专业的实验外包服务,助力您的科研工作取得突破。
油红O染色,揭秘脂肪! 油红O染色法是一种用于检测组织或细胞内脂肪含量的方法。油红O(Oil Red O)是一种脂溶性染料,具有很强的脂溶剂和染脂剂特性,能够在脂肪内高度溶解。其染色原理是油红O能与组织和细胞内的中性甘油三酯、脂质以及脂蛋白产生吸附作用,从而使脂肪染色。 ꠥꌦ꤯ 1️⃣ 细胞铺板:在12孔板中铺好细胞,用显微镜观察。 2️⃣ 固定细胞:弃去培养基,用PBS润洗,加入少量4%多聚甲醛固定细胞10分钟(覆盖底板即可)。 3️⃣ 配制油红染料:将4%油红与DDH2O按1:1比例混合,滤膜过滤,静置。 4️⃣ 润洗细胞:弃去液体,加入60%异丙醇润洗,使细胞间质分明,10秒左右即可。 5️⃣ 染色:加入已配好的油红,覆盖底板,染色10分钟。 6️⃣ 清洗:弃去油红,用60%异丙醇洗,每孔10秒,时间不宜过短或过长。 7️⃣ 漂洗:将板子放在水盆里漂洗。 DMSO定量: 将水倒干,加入DMSO 200微升每孔,萃取30分钟,450nm吸光度读数。 젦观察: 配苏木素染料:用DDH2O稀释3倍,每孔加200微升,染色10秒。 大量水清洗,每孔加入100微升清水,避免细胞干掉。 打开显微镜观察。 𗠨🙩也可以用ImageJ来进行定量化。
油红O染色指南:详细步骤与注意事项 油红O染色是一种用于检测细胞内脂质含量的染色方法。以下是详细的步骤和注意事项: ꠦ工作液配置 首先,将饱和油红O原液与ddH2O按3:2的比例混合,搅拌均匀。然后,用0.2um滤头过滤,静置10分钟后使用,注意避光。 𖠶0%异丙醇配置 将100%异丙醇与ddH2O按3:2的比例混合,配置成60%的异丙醇溶液。 油红O染色步骤 弃去细胞培养基,用PBS洗涤2次,然后加入甲醛固定20-30分钟(六孔板中每孔加入1ml甲醛,覆盖孔底即可)。 弃去固定液,用ddH2O洗涤2次,然后加入60%异丙醇浸洗5分钟,弃去后再加入先前配置好的油红O工作液,浸染10-20分钟(六孔板中每孔加入1ml,覆盖孔底即可)。 弃去染液,用60%异丙醇漂洗至间质清晰,再用ddH2O洗至无多余染液,约2-5次。 可选步骤:苏木素染细胞核 将苏木素染液加入孔中,浸染1-2分钟(六孔板中每孔加入1ml,覆盖孔底即可)。弃去染液后,用ddH2O漂洗2-5次,吸弃后加入ddH2O覆盖细胞,镜下观察。 通过以上步骤,你可以成功进行油红O染色,检测细胞内的脂质含量。记得在操作过程中注意安全和清洁,避免污染。
油红O染色实验步骤详解,轻松上手! 嘿,大家好!今天我想和大家分享一下如何用油红O染色组织切片,这可是个有点技术含量的实验哦!不过别担心,我会尽量讲得详细一些,让你也能轻松上手。 准备工作 ꊩ斥 ,我们需要配制工作液。这个步骤很关键,因为油红O染液需要在60到70℃的水浴中加热30分钟,然后自然冷却后过滤。记住,这个工作液要现配现用哦! 样本处理 ﹤𛆨样本: 吸弃细胞培养液。 向孔板边缘缓慢加入PBS,简单清洗细胞。 加入4%多聚甲醛固定液,室温固定20分钟。 PBS漂洗2次。 对于冰冻切片: 从-20℃取出切片,室温静置5到10分钟恢复至常温。 染色步骤 芧𛆨样本: 加入少量60%异丙醇覆盖细胞15到20秒,吸弃后稍微晾干。 加入油红O工作液覆盖细胞,室温避光染色30分钟。 去除染色液后,加入60%异丙醇快速分化3到5秒。 纯水洗3次,每次5分钟。 加入苏木素复染核,水洗、分化、水洗、返蓝再水洗。 加入PBS覆盖细胞后显微镜观察。 用甘油明胶封片剂封片。 冰冻切片: 恢复至室温的冰冻切片浸一下PBST后用疏水笔画圈。 滴入油红O工作液,室温浸染30分钟(加盖避光)。 取出切片,停留3秒后依次浸入两缸60%异丙醇分化3到5秒。 切片依次浸入两缸纯水中浸洗,每次10秒。 浸入苏木素染核,水洗、分化、水洗、返蓝再水洗。 稍微晾干后滴加甘油明胶封片剂封片。 注意事项 ⚠️ 如果是新鲜组织冰冻切片,需要先在4℃下用福尔马林固定20分钟再染色。 油红O工作液必须现配现用,水浴加热时要小心。 染色后的样本不能长期保存,最好尽快观察和拍照。 用甘油明胶封片剂封片时要注意避免气泡,如果有气泡可以将玻片浸入65℃温水中让盖玻片自行脱落,然后重新封片。 好了,以上就是油红O染色实验的详细步骤啦!希望对你有所帮助。如果有任何问题,欢迎在评论区留言哦!
油红O染色法:线虫脂质含量的定量研究 最近,我开始了养虫子的日常,每天与这些小家伙们打交道超过2小时。每天晚上,闭上眼睛都能看到它们波浪形的爬动,真是让人又爱又恨啊 。 油红O染色的基本原理 油红O是一种脂溶性重氮染料,主要用于检测中性脂质和胆固醇酯,但它不能检测生物膜。这个方法在脂质研究领域非常经典。 步骤一:固定线虫 首先,用缓冲液冲洗需要染色的线虫,然后以3000rpm离心30秒。这个过程可以重复多次,最后一次去除上清液,加入150的4%多聚甲醛固定15分钟。固定后的线虫可以放在4Ⰳ保存1-2天。 步骤二:冻融处理 将固定好的线虫放入-80Ⰳ冷冻2分钟,然后室温水浴1分钟,重复3次。接着用M9缓冲液冲洗3次,去除上清液。 步骤三:脱水 加入1ml的60%异丙醇脱水10分钟,然后以3000rpm离心30秒,去除上清液。 步骤四:染色 每管加入200的油红O工作液,避光染色半小时到一小时。 步骤五:制片 用含0.01%通透剂Triton-X100的M9缓冲液清洗3次,去除大部分上清液。然后将线虫转移至2%琼脂糖胶垫上,盖上盖玻片,可以用指甲油封片后续保存(4Ⰳ)。 分析 拍照后,可以使用ImageJ软件进行分析光密度来对染色情况进行定量描述。 通过这些步骤,我们就可以对线虫的脂质含量进行精确的定量研究了。希望这些信息对你有所帮助!က
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