引物合成最新视觉报道_引物合成page纯化(2024年11月全程跟踪)
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南京实验室,全能科研助手! 觉饮验建模: 我们能够构建各种大小动物模型,包括手术模型和药物诱导模型,并提供模型的评价与检测服务。服务内容涵盖行为学测试、影像学检查,以及生化和生理指标分析等。 젧𛆨实验服务: 提供细胞培养、细胞爬片制作、转染技术、流式细胞术等基本细胞生物学实验。此外,还进行慢病毒包装、细胞划痕和迁移实验、细胞侵袭测试、稳定细胞株筛选,以及原代细胞的分离等高级操作。 젧 理学检测: 包括硬组织切片制作、不脱钙和脱钙处理、组织软化、包埋、切片、染色(含特殊染色)、免疫组化、免疫荧光技术,以及病理图像的采集和分析。 分子生物学分析: 开展荧光定量PCR、miRNA检测、DNA甲基化测序、质粒提取和构建、菌种鉴定,以及彗星实验等分子层面的检测服务。同时,提供引物合成服务。 蛋白质研究: 提供Western Blot、蛋白质纯化、双向电泳、单克隆抗体制备、原核表达、免疫沉淀、免疫共沉淀,以及SILAC标记的定量蛋白质组学研究。 快速检测服务: 包括ELISA、生化分析、血液学检查、组织匀浆、肝功能和肾功能测试、心肌酶谱分析、血常规检查、血脂和血糖水平测定、凝血功能测试,以及尿常规分析。 组学研究服务: 提供基因组学、转录组学、单细胞测序技术、蛋白质组学,以及代谢组学等组学层面的研究服务。 我们致力于为科研人员提供高标准、个性化的科研支持,以促进科研项目的顺利进行。期待与您的合作。
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医学科研实验室全解析:从细胞到基因 医学科研实验室的服务范围广泛,涵盖了从细胞到基因的多个层面。以下是实验室提供的部分服务项目: 觉驀 模:包括大小动物手术模型、药物诱导模型等,提供行为学检测、影像检测、生化生理指标检测等服务。 젧𛆨实验:服务项目包括细胞培养、细胞爬片、细胞转染、流式细胞术、慢病毒包装、细胞划痕实验、细胞迁移、细胞侵袭、稳定株筛选、原代细胞分离等。 젧 例学检测:提供硬组织切片、不脱钙切片、脱钙、软化、包埋、切片、染色、特殊染色、免疫组化、免疫荧光、病理图像采集等服务。 分子生物学检测:包括荧光定量PCR服务、miRNA检测、DNA定量、甲基化测序、质粒提取、质粒构建、菌种鉴定、引物设计合成等。 ᠨ白相关检测:服务项目有Western Blot、蛋白质纯化、蛋白质双向电泳、单克隆抗体制备、原核表达、免疫沉淀、免疫共沉淀、SILAC标记定量蛋白质组学等。 快速检测服务:提供ELISA检测、生化检测、组织样本匀浆等服务。 组学服务:涵盖基因组学、转录组学、单细胞测序、蛋白质组学、代谢组学等。 这些服务项目涵盖了医学科研的多个领域,为科研人员提供全面的技术支持。
쥼物设计全攻略✨ 打开PubMed网站,点选NIH,开始你的基因探索之旅! ᠩ择“Gene”,输入你心仪的目的基因,比如mouse、rat或human哦~ 点击基因名字,进入下一步,别急! 点击NCBI,连接世界基因库,轻松获取信息。 在mRNA and protein区域,找到并点击第一个序号。 𛃄S,进入关键步骤,别错过! 复制棕色序列,一定要全部复制,这是关键数据哦! 打开生工网站,选择技术服务-常规引物合成,开始你的引物设计之旅! 寸 点击在线生成引物,选择SYBR,让引物设计更精准。 选择物种,输入基因名称,粘贴刚才复制的序列,提交你的设计! 在引物设计列表中查看已提交的序列,等待奇迹出现吧!
쒔-qPCR实验全攻略ኰ犥ꌥ备: 1️⃣ 引物合成:引物是qPCR实验的关键,可以找专业公司设计,确保特异性。 2️⃣ 溶解引物:干粉引物需4℃离心后加水溶解至10工作液。 3️⃣ 配制体系:将相同试剂配成mix,便于加样,减少误差。 4️⃣ 封板操作:注意避免cDNA挂壁,影响实验结果。 5️⃣ 上机设置:延伸阶段必须添加信号搜集,确保扩增曲线准确。 结果分析: ✅ 关注CT值同时,更要检查溶解曲线及扩增曲线。 ✅ 熔解曲线应为单峰,双峰可能提示引物二聚体或特异性差。 ✅ 扩增曲线应呈光滑S型,反映实验质量。 ᥰ贴士:选择合适引物和试剂,确保实验准确性和可重复性。
쐃R、QPCR、RT-PCR全攻略 젦⧴␃R、QPCR和RT-PCR的奇妙世界!从RNA反转录到cDNA的合成,再到DNA的扩增,每一步都充满了科学的魅力。 1️⃣ RNA抽提:采用TRlzol法,借助苯酚的强力裂解作用,轻松获取RNA。准备好试剂耗材和样品,经过一系列离心和沉淀步骤,就能得到纯净的RNA啦!ꊊ2️⃣ RNA质量检测:分光光度计和凝胶电泳法是你的得力助手,确保RNA的纯度和完整性。 3️⃣ 反转录:以RNA为模板,借助反转录酶的力量,合成与RNA互补的cDNA。选择合适的引物,让反转录更加高效。ኊ4️⃣ PCR程序:三步法让你轻松掌握DNA扩增的诀窍。高温变性、低温退火、延伸,每一步都精准控制,确保DNA的准确复制。劊 现在,你已经掌握了PCR、QPCR、RT-PCR的全教程!快来试试吧,用科学的力量探索生命的奥秘!
쩫通量测序的神奇原理✨ Solexa测序:边合成边测序的魔力 Solexa测序法,一种单分子阵列测试技术,让你领略高通量测序的奥秘!首先,从细胞中提取DNA,随机打断并回收100-200bp的片段。这些片段经过接头连接,被精准地放置在测序玻璃片上。玻璃片上的序列与接头片段互补,实现原位扩增。在接下来的边合成边测序过程中,四种荧光标记的染料与聚合酶一同加入单分子阵列。通过酶的作用,荧光标记的核苷与引物结合,延伸单链DNA分子。利用生物发光蛋白,如萤火虫的荧光素酶,检测碱基加到引物后端时释放的焦磷酸盐信号。激光激发特定波长的荧光,CCD快速扫描并采集这些信号,从而确定每个碱基。 ᴵ4测序:焦磷酸测序的神奇之处 454测序技术,依靠生物发光进行DNA序列分析,展现了高通量测序的新高度!在DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶和双磷酸酶的协同作用下,每一个dNTP的聚合与荧光信号释放紧密相连。通过检测荧光信号的有无和强度,实时测定DNA序列。无需荧光标记的引物或核酸探针,无需电泳,快速、准确、灵敏度高且自动化!Roche GS FLX System就是基于这一原理的高通量基因组测序系统。四种碱基依次进入PTP板,发生碱基配对时释放焦磷酸。在酶的作用下,经过合成和化学发光反应,最终氧化荧光素并释放光信号。这些光信号被高灵敏度CCD实时捕获,从而准确、快速地确定待测模板的碱基序列。
젒T-PCR实验全攻略:从原理到实践 目录 cDNA与反转录 RT-PCR原理与目的 RNA抽提与质量检测 反转录过程 PCR程序与引物设计 PCR酶与体系 PCR产物检测 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) 常见问题与注意事项 젣DNA与反转录 cDNA(互补DNA):与RNA链互补的单链DNA。在适当引物的存在下,由DNA聚合酶即反转录酶合成的单链DNA就是cDNA。 反转录(Reverse Transcription):在反转录酶的作用下,以RNA为模板合成DNA的过程。合成的DNA链称为与RNA互补的DNA,即cDNA。 젒T-PCR原理与目的 原理:RT-PCR全称反转录聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction),将RNA的反转录和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。 目的:检测核酸的表达,主要是RNA的表达。DNA不需要反转录的过程,直接PCR检测即可。 젒NA抽提与质量检测 RNA抽提方法:TRIzol法。主要成分包括苯酚,用于裂解细胞和变性蛋白。 RNA质量检测:分光光度计测定、凝胶电泳法。 젥转录过程 以RNA为模板合成cDNA的过程。在这个过程中,遗传信息的流动方向与转录时相反,因此称为“反转录”。需要反转录酶,合成的DNA称为与RNA互补的DNA(cDNA)。根据不同情况选择不同的反转录引物。 점CR程序与引物设计 PCR程序:三步法,包括变性、退火和延伸三个基本反应。 引物设计:找到目的基因的CDS序列,用软件设计和评价引物,并使用BLAST进行引物特异性检测。引物长度为15-30bp,最常用的为23bp;引物Tm值介于62-73℃之间,上下游引物Tm最好相近以保证其能高效工作;3'-端的Tm值要低于5'端;引物GC含量约为40-60%;避免扩增模板的二级结构域;避免引物的二级结构;避免与靶DNA错配。 점CR酶与体系 PCR酶:可选择普通的Taq酶、可扩增长片段的Taq酶或高保真酶。 PCR体系:按所选的PCR酶说明书来配制。 점CR产物检测 一般采用琼脂糖凝胶电泳,必要时也可使用聚丙烯酰胺凝胶电泳。 젥𖨍祅定量PCR(RT-qPCR) 基本原理:在PCR体系中加入能够指示DNA片段扩增过程的荧光染料或荧光标记的特异性探针,通过对PCR过程中产生的荧光信号累积或荧光标记的特异性探针释放的荧光信号进行监测和记录,实时监测整个PCR进程,再结合软件对获得的荧光信号数据进行分析,计算待测样品中特定DNA片段的初始量。 扩增过程:包括荧光背景信号阶段、荧光信号指数增加阶段和荧光信号平台期阶段。 常见问题与注意事项:在进行RT-PCR实验时,需要注意实验条件的选择、引物的设计、RNA的质量控制以及实验操作的规范性等问题,以确保实验结果的准确性和可靠性。
「医学考研超话」「考研西综必背」 [星星]糖原合成与分解 1.合成过程 (1)葡萄糖活化为UDPG;(2)糖原合成的起始需要引物(糖原蛋白);(3)糖原合成是耗能过程:每延长1个葡萄糖基,需消耗2个ATP。 2.糖原合成和分解的鉴别:如图 3.调节:糖原分解在肝内主要受胰高血糖素调节,在骨骼肌主要受肾上腺素的调节。
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