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caspase3新上映_cleaved caspase3(2024年12月抢先看)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：导读更新日期：2024-11-30

caspase3

科研小白必看：蛋白提取与电泳全攻略 𐟔젥ꌦ᤻𖯼š 分离小鼠胰脏T细胞，体外分化培养Th1细胞。收集1x10^6个细胞，提取蛋白。蛋白裂解过程中，建议使用超声或注射器针头反复抽吸，以促进蛋白裂解。裂解后，加入Loading Buffer，充分溶解蛋白质后进行蛋白变性。最后，使用12000g离心15分钟，弃去沉淀，收集上清液。小分子量蛋白检测可使用高浓度蛋白胶(12%)，90v电压慢跑可使小分子条带更整齐。 𐟓Š 抗体选择：使用Abmart的LC3B抗体（稀释比1:2000），货号：T55992，可清晰检测到LC3B的两个条带（LC3I和LC3II）。Caspase3抗体（货号：T40044）、Full-Caspase3和Cleaved-Caspase3也都能成功跑出条带。 𐟒ᠥ𐏨𔴥㫯𜚊Abmart提供了许多小样供课题组使用，尚未跑出的抗体可以尝试申领！【Tag】：

𐟔젥𐏥ˆ†子蛋白跑WB的技巧与注意事项在实验室工作中，小分子蛋白如Bcl2、Caspase-3、Bax以及自噬相关蛋白LC3B等非常常见。以下是跑WB时需要注意的几个关键点： 1️⃣ 配胶：小分子蛋白的分离胶浓度一般为12%-15%，这样可以使条带更加清晰。在倒胶时，浓缩胶的比例可以适当增加到4：6，有助于充分浓缩蛋白，减少电泳过程中的弥散。 2️⃣ 上样：建议增加1倍的上样量，以防蛋白弥散过多。选择适用于小分子蛋白的marker，这样在敷抗体时可以更清楚地裁膜。电泳开始前，可以用1⴬oading buffer补齐未点样的胶孔，防止两边不齐跑成“八”字。 3️⃣ 电泳：在浓缩胶部分设置恒压70V、30分钟左右，使蛋白浓缩到一条线上后，调大电压至110V，直至所需蛋白区域全部分开。避免长时间低电压跑胶，以防蛋白弥散过多。同时，整个电泳过程中要注意降温。 4️⃣ 转膜：由于小分子蛋白分子量小，吸附能力弱，因此转膜时选择0.22的PVDF膜。常规0.45膜容易穿透，剩余条件同正常蛋白一般可以满足条件。 5️⃣ 封闭：使用快速封闭液或脱脂牛奶按正常条件封闭即可。裁膜时根据marker上下留出足够多的空间。 6️⃣ 一抗孵育：在保证上述条件的基础上，一抗是出好结果的关键一步。若没有前期实验经验，一抗的稀释比一般按照说明书配置。若有前期实验经验，可适当调整比例。一抗浓度过高可能导致显影阶段出现杂带，过低则可能看不到条带。使用1ⴔBST缓冲液稀释，4℃孵育过夜。 7️⃣ 后续步骤：二抗比例及孵育时间、显影按常规操作即可。若抗体不好用或蛋白难出结果，可适当延长洗膜时间及次数。 𐟓Œ 注意事项：转膜时，若蛋白分子量过小，可适当提高甲醇比例（30%左右）改善吸附能力。跑小分子蛋白时marker尽量不跑到一张膜上，对于常见内参GAPDH、Actin及Tubulin等来说，分离胶浓度大上述蛋白区域一般分不开或分离不完整，易导致内参不齐。

细胞凋亡检测的五大方法及其原理细胞凋亡是生物学中的重要过程，了解其检测方法对于研究细胞命运至关重要。以下是五种常用的细胞凋亡检测方法及其作用原理： 1️⃣ Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）双标记法作用原理：当细胞坏死时，质膜不完整，PI进入细胞内部，嵌入DNA或RNA中，使坏死细胞着色（红色）。Hoechst33342是一种亲脂性荧光染料，可跨膜进入活细胞并与DNA特异结合，显示活细胞（蓝色）。凋亡细胞和活细胞不着色。 2️⃣ Annexin V/PI双染色法作用原理：磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine, PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡早期，PS翻转到细胞膜表面。Annexin-V是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。标记后的Annexin-V作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜检测细胞凋亡。 3️⃣ TUNEL法作用原理：脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，掺入凋亡细胞DNA的3-OH末端，与dATP形成异多聚体，并可与连接了报告酶的抗地高辛抗体结合。过氧化物酶在适合底物存在下产生颜色反应，特异定位正在凋亡的细胞。 4️⃣ Caspase-3活性检测法作用原理：Caspase家族在介导细胞凋亡中起重要作用，其中caspase-3为关键执行分子。正常状态下，caspase-3以酶原形式存在于胞浆中。在凋亡早期，它被激活，活化的caspase-3裂解相应底物，最终导致细胞凋亡。在细胞凋亡晚期和死亡细胞中，caspase-3活性下降。通过Western blot分析Procaspase-3的活化及对底物的裂解来检测细胞凋亡。 5️⃣ 形态学检测法作用原理：根据凋亡细胞的形态特征，使用透射电镜检测凋亡细胞的形态变化。凋亡细胞体积变小，细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期细胞核内染色质高度盘绕，出现空泡结构；Ⅱa期细胞核染色质高度凝聚、边缘化；晚期细胞核裂解为碎块，产生凋亡小体。这些方法提供了检测细胞凋亡的不同角度，帮助研究者更好地理解细胞的命运和调控机制。

常滋堂复合多糖是肿瘤患者最智慧的选择常滋堂复合多糖的六大途径一、特异与内皮细胞表面受体结合，抑制肿瘤细胞转移。二、抑制肿瘤新生血管生成，缩小肿块，最终杀死肿瘤细胞。三、激活肿瘤细胞结束关键蛋白 Caspase－3，促进肿瘤细胞结束。四、促进细胞 DNA、 RNA 、蛋白合成，减少化疗和放疗的毒性，具有升白、止吐、生发、等作用。五、和免疫细胞表面活性多糖受体结合，激活DC、CTL、M𐤣€NK等免疫细胞（打开免疫细胞开关），靶向沙伤肿瘤细胞。开创肿瘤生物调养全新方向。六、常滋堂复合多糖具有生物载体作用，杀死肿瘤效果提升5～7倍。常滋堂复合多糖针对肿瘤发生的根本机理而研发，因此适合于各种癌症病人。能促进巨噬细胞的增殖，并且提高其吞噬能力，有显著提高机体免疫力、对抗肿瘤细胞的作用。吴秋芳高级健康管理师的微博视频

aespa 回归收录曲 𐟎磀Œaespa回归」「whiplash」 1. Just Another Girl 2. Pink Hoodie 3. Flights, Not Feelings 4. Flowers 5. Kill It

协同光热光动力治疗大肿瘤的纳米自组装策略 ### 研究背景 𐟌ˆ 近年来，光热疗法（PTT）和光动力疗法（PDT）因其非侵入性、高选择性和低毒副作用而备受关注。PTT通过将光能转化为热能来杀伤肿瘤细胞；PDT则通过光敏剂生成单线态氧（^1O2）和其他活性氧（ROS），导致肿瘤细胞死亡，并激活Caspase-3/GSDME通路引发焦亡（pyroptosis），从而增强免疫反应。尽管PTT和PDT的组合具有协同效果，但通常需要不同波长的光源，这增加了治疗的复杂性。为了解决这一问题，本研究开发了一种新型纳米自组装体系，通过光敏剂叶绿素e6（Ce6）和化疗药物米托蒽醌（MTO）自组装，利用单一660 nm光源实现PDT（由Ce6实现）、PTT（由MTO实现）和化疗（由MTO实现）的协同治疗。使用材料 𐟛 ️ Ce6和MTO通过自组装形成纳米颗粒（CM NAs），依靠氢键、€“ †叠和疏水相互作用保持稳定性。 Ce6：用于PDT，在660 nm激光下生成^1O2和ROS，破坏肿瘤细胞并增强免疫反应。 MTO：用于PTT，可将660 nm激光转化为热能，提高局部温度杀伤肿瘤细胞，同时作为化疗药物抑制肿瘤增殖。材料表现 𐟌Ÿ CM NAs在660 nm激光照射下实现光热转换和^1O2生成，光热转换效率达61.3%。在PDT作用下，CM NAs激活Caspase-3/GSDME通路，引发焦亡，释放炎性因子（如IL-1€IL-18）和危害相关分子（如HMGB1、ATP），增强免疫原性并促进树突状细胞成熟，激活效应性和记忆性T细胞。在CT26、MC38、4T1和B16F10小鼠模型中，通过静脉注射CM NAs，联合660 nm激光照射显著缩小约500 mm⳧š„大肿瘤，并防止复发，延长小鼠生存时间。这项研究不仅为肿瘤治疗提供了一种新的策略，还为未来的临床应用打下了坚实的基础。

阿尔茨海默病大鼠模型建立及行为学检测 𐟐�补ž‹建立：采用SD大鼠，通过1%戊巴比妥钠40/g腹腔内注射麻醉，固定于脑立体定位仪上。根据大鼠脑立体定位图谱，以前囟为零起点，前囟后3.5 mm处为穿刺点，中线右侧旁开2mm，使用牙科钻钻开颅骨。采用微量注射器自脑表面垂直进针3mm，即(AP= -3.5 mm, ML=2.0 mm, DV=3.0 mm)，双侧海马CA1区缓慢匀速注射A-40各10  (1 )，留针5 min，退针后缝合伤口。 𐟒‰ 造模后3天，开始尾静脉注射生理盐水，大鼠每只给药100/次/d，连续给药21天。 𐟧頨ጤ𘺥�〦𕋯𜚊在给药后21天，进行Morris水迷宫试验，分为定位航行实验和空间探索实验。定位航行实验：大鼠连续接受5天训练，每天4次，每次时间间隔30min，记录下大鼠从4个入水点和入水并找到平台所需要的时间，即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果。空间探索实验：实验第6天，撤去平台，从距离平台的最远端入水后，将大鼠放入水中，记录下30s内大鼠的游泳轨迹，观察分析大鼠在目标象限的停留时间及穿越平台的次数。 𐟧젧𛄧𛇧—…理学：尼氏染色：海马组织固定后石蜡切片，进行尼氏染色，观察海马区神经细胞形态和数量。光学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的神经元数量。免疫荧光染色：观察海马区A-40染色情况。荧光显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性斑块数量。 TUNEL染色：观察神经元凋亡情况。荧光学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性染色数量。 𐟔젦 ‡志因子水平： RT-qPCR检测：收集海马组织，提取RNA，反转录cDNA，PCR检测caspase-3，Bcl-2和Bax的表达。 Western-blot检测：收集海马组织蛋白，检测active-caspase-3，Bcl-2和Bax的蛋白表达。

GSDM家族在细胞焦亡中发挥关键作用，其中GSDMD作为炎性体的共同协同效应物，在炎症性疾病中具有重要功能，其调控机制正在深入研究中。 1.GSDM家族 GSDM家族成员广泛表达，参与细胞分化、增殖、死亡等生物过程，并在病理过程中起作用。 2.GSDMD功能 GSDMD是GSDM家族的重要成员，通过Caspase酶切加工激活，参与细胞焦亡过程，影响离子稳态和细胞死亡。 3.GSDMD调控 GSDMD的转录受多种分子调控，活性受自身抑制结构、蛋白水解切割事件等调节，以防止自发孔形成并控制细胞表面孔的丰度。 4.疾病治疗 GSDMD在自身免疫性疾病或炎症性疾病中发挥关键功能，深入了解其调节机制和执行功能，有助于开发新型和更特异的抑制剂，为针对GSDMD相关疾病的机体进行治疗干预打开新窗口。以上内容由AI检索𐟧 生成，你也可以捏合屏幕𐟤生成属于你的专属内容 @捏一下小助手

5个中成药，对付各种肾病，一文总结： 1、肾衰宁胶囊：糖尿病肾病具有益气健脾、活血化瘀、通腑泄浊的功效，其成分包括丹参、大黄、太子参、黄连、牛膝、半夏（制）、红花、茯苓、陈皮、甘草，其中成分之一大黄具有抗脂质过氧化的作用，并通过促进排泄而减少氮质的吸收，同时促进蛋白质合成，减少分解，从而达到改善氮质血症的目的。另外，大黄可抑制肾脏代偿性肥大及高代谢状态。另一成分丹参具有调节凝血功能，有助于减少血栓的形成，还可以减少内皮素的生成，进一步抑制炎症反应，缓解肾脏损伤。另有研究发现，肾衰宁胶囊可抑制肾小球系膜细胞的增殖、细胞间黏附分子、IL-2分泌及细胞基质累积。研究还发现，肾衰宁胶囊还可促进血清肌酐（Cr）排泄，提示本药可改善肾脏血流量，促进毒素的排泄，抑制肾脏代偿性肥大及高代谢状态，保护肾脏功能。肾衰宁胶囊治疗糖尿病肾病，可有效改善临床症状和中医证候，保护肾功能，延缓病情发展。 2、肾炎康复片：慢性肾小球肾炎肾炎康复片方中西洋参益气养阴。地黄“为补肾要药，益阴上品，肾得之而骨强力壮”（《本草汇言》）。杜仲“治肾冷臀腰痛，腰病人虚而身强直”（《药性论》）。山药“益肾气，健脾胃”（《本草纲目》）。黑豆“逐水胀，除胃中热痹，伤中淋露，下瘀血，散五藏结积内寒”（《名医别录》）。土茯苓清热利湿解毒。白花蛇舌草清热泻火解毒。益母草活血化瘀利水。丹参活血化瘀通络。泽泻清热利水渗湿。白茅根清热养阴生津。桔梗宣肺利水，调畅气机。诸药合用，共奏健脾补肾、清热利湿、活血化瘀之功。药理研究显示，肾炎康复片有抑制免疫反应、减轻炎症损伤、延缓肾纤维化、保护足细胞和肾小管上皮细胞等作用，可干预P38MAPK信号通路的信号转导，减少肾小球内TGF-的表达和巨噬细胞的浸润，从而减轻肾组织的炎症损伤，并可下调纤维连接蛋白（FN）和基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）在UUO大鼠肾间质中的表达，从而延缓肾间质纤维化的进展。肾炎康复片治疗慢性肾小球肾炎，可有效改善临床症状和中医证候，延缓肾功能恶化。 3、百令胶囊：原发性肾病综合征本药辅助治疗的优势主要可分为以下两方面：其一，本品的主要成分是含有虫草酸、甘露醇等成分的虫草菌丝体干粉，不仅具有提高人体免疫力的功效，还具有降低血脂、抗炎和抗肿瘤等功效，本品在用于治疗原发性肾病综合征的过程中，不但可以有效平衡原发性肾病综合征诱发的患者体内免疫系统紊乱，还可以双向调节人体免疫功能。其二，相关研究证实，虫草制剂具有抑制肾小球系膜细胞的繁殖以及代偿性肥大的功效，既可稳定肾小管细胞溶酶体膜，又可延缓并诚少溶酶体膜的破裂速度，进而保护肾小管，防止肾组织的钙含量升高以及降低细胞脂质过氧化。百令胶囊辅助治疗原发性肾病，可有效改善患者的白蛋白（Alb）、总胆固醇（TC）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、 24小时尿蛋白（24hUpro）等生化指标，延缓肾功能下降。 4、金水宝胶囊：慢性肾功能衰竭冬虫夏草是传统的滋补强身药，研究表明虫草具有增强免疫应答、抑制肿瘤细胞生长，保护肝肾功能、促进心血管循环、降低血糖以及抗脂质过氧化作用等生物学功能，金水宝胶囊是人工培养虫草菌粉，其与天然的冬虫夏草都是由相同的真菌培养而成，只是寄主不同，金水宝中所含的多种维生素、微量元素都是人体所必需的；可供慢性肾功能衰竭患者补充所需或直接参与调节机体的血糖、蛋白质、脂肪、SOD等多种代谢，可以清除自由基，降低脂质过氧化物(LPO)保护患者肾脏免受损伤，改善肾血流，抑制血小板聚集，稳定溶酶体膜，降低N-乙酰葡萄糖苷（NAG）酶。减轻氮质血症，保护和维持肾功能，促进肾细胞的修复。金水宝胶囊治疗慢性肾功能衰竭，有较好的降低血肌酐及尿素氮、24h尿蛋白定量、提高肾脏肌酐清除率的作用，从而能有效地阻止慢性肾功能减退的进展。 5、黄葵胶囊：IgA肾病黄葵胶囊是黄蜀葵花(AM) 制剂之一。AM的主要化学成分是AM总黄酮(TFA)。有研究表明，TFA预处理可防止早期糖尿病肾病模型鼠的足细胞凋亡，阻抑caspase-3、caspase-8的蛋白表达，减少尿白蛋白的排泌。黄葵胶囊治疗慢性肾脏病的机制主要包括“抑制免疫反应、减轻炎症反应、改善肾纤维化、保护肾小管上皮细胞”等。应用黄葵胶囊联合泼尼松治疗难治性膜性肾病取得满意疗效，可有效减少患者蛋白尿。此外，通过IgA肾病动物模型，证实黄葵胶囊可减轻肾小球系膜细胞增生、肾小管上皮细胞空泡变性、肾间质炎症细胞浸润，抑制TGF-、a-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）在肾小球、肾小管及肾间质的表达。提示黄葵胶囊可通过抑制TGF-，表达而减轻肾组织纤维化病变。黄葵胶囊治疗IgA肾病，可降低蛋白尿，延缓肾功能减退。#肾病# #中成药# #我要上热门#

木樨草素的神奇抗衰老效果最近服用木樨草素快一个月了，真是个好东西！起初是为了降尿酸和胆固醇，但后来发现它的效果远不止于此。木樨草素是一种从草本植物木樨草中提取的天然成分，广泛存在于菊花、白毛夏枯草、洋蓟、紫苏、芹菜、落花生等植物中。抗病毒：木樨草素能阻止新冠病毒与宿主细胞的结合，从而防止病毒的入侵和复制。这个功能让它成为抗击疫情的潜在利器。认知改善：它还能显著改善自闭症患者的症状。通过恢复小胶质细胞活动和增强BDNF/TrkB信号，木樨草素能改善甚至恢复Cdkl5 KO小鼠的海马神经发生、树突长度和分支，以及树突棘的成熟，从而改善焦虑和记忆障碍。降尿酸和防胆固醇：这也是我最初关注它的原因之一。木樨草素能有效降低尿酸，防止胆固醇失衡，对健康非常有益。肿瘤免疫：研究表明，木樨草素可能预防白血病、甲状腺癌、肺癌和前列腺癌等多种癌症。它通过激活caspase和beclin1来增加LC3（微管相关蛋白1A/1B轻链3），并抑制癌细胞发展。此外，它还可能通过降低Akt磷酸化来停止细胞周期，进一步导致去磷酸化并触发GSK-3（糖原合酶激酶）。提高男性睾酮和精子活力：虽然这一点有点出乎意料，但木樨草素确实能提高男性睾酮水平，从而提高精子活力。对于那些希望提高运动能力的朋友来说，这真是个好消息。总的来说，木樨草素不仅是一个营养补充剂，更是一个多功能的健康守护者。继续服用，期待更多惊喜！

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