tsb培养基权威发布_tsb培养基配方(2024年12月精准访谈)
𘥷 菌实验大揭秘 你是否好奇你日常使用的纸巾是否无菌?让我们一起揭开这个秘密! 实验日期从7月11日开始,直到7月25日结束,历时两周。我们使用了TSB和FTM两种培养基进行测试。 试纸巾种类包括:维达手帕纸、唯得抽纸、公司无名卷纸、德佑湿厕纸以及医用手套。 𗨧察结果显示,公司无名卷纸和德佑湿厕纸在实验初期就出现了细菌滋生现象,而维达和唯得抽纸也有不同程度的污染。令人惊讶的是,即使是看似干净的纸巾,在开封后也可能迅速暴露在空气中,导致细菌滋生。 ᥛ 此,我们建议大家在使用纸巾时务必谨慎,尤其是当纸巾暴露在空气中一段时间后。同时,选择知名品牌、包装完好的纸巾可以降低感染风险。 妀,这次实验让我们深刻认识到纸巾无菌的重要性。大家一定要保持警惕,健康生活从细节做起!
计数培养基适用性检查指南 슨量物实验室中常用的工具,确保其适用性至关重要。以下是几种常见计数培养基的适用性检查方法,帮助你确保实验结果的准确性。 胰酪大豆胨琼脂(TSA) 无菌性检查:取已灭菌的TSA培养基,在30-35℃下培养3天,应无菌落生长。 试验用菌种:金葡、铜绿、枯草、白念、黑曲霉 接种方法: 涂布法:将≤100cfu的试验用菌悬液接种到TSA平板表面。 倾注法:将≤100cfu的试验用菌悬液接种到无菌平皿中,倾注约15mL培养基,轻轻摇匀。 适用性检查:枯草、金葡、铜绿在30-35℃下培养≤3天;白念、黑曲霉在30-35℃下培养≤5天。 判断标准:与对照培养基比较,菌落平均数比值在0.5-2(50%-200%)范围内,且菌落形态大小一致。 胰酪大豆胨液体(TSB)犦 菌性检查:取已灭菌的TSB,在30-35℃下培养≥3天,培养基应澄清。 试验用菌种:金葡、铜绿、枯草 接种方法: 涂布法:将试验用菌悬液接种到TSB中,接种量≤100cfu,摇匀后培养。 适用性检查:在30-35℃下培养不超过3天。 判断标准:金葡、铜绿、枯草接种后,与对照培养基比较,试验菌生长良好。 沙氏葡萄糖琼脂(SDA) 无菌性检查:取已灭菌的SDA培养基,在20-25℃下培养5天,应无菌落生长。 试验用菌种:白念、黑曲霉 接种方法: 涂布法:将不大于100cfu的试验用菌悬液接种到SDA平板表面。 倾注法:将大于1cfu的试验用菌悬液接种到无菌平皿中,倾注约15mL培养基,轻轻摇匀。 适用性检查:白念、黑曲霉在20-25℃下培养≤5天。 判断标准:与对照培养基比较,菌落平均数比值在0.5-2(50%-200%)范围内,且菌落大小、形态一致。 沙氏葡萄糖琼脂+抗生素 无菌性检查:取已灭菌的SDA培养基,在20-25℃下培养5天,应无菌落生长。 试验用菌种:抑菌性检查(枯草、金葡、铜绿),促生长能力检查(白念、黑曲霉) 常用抗生素:庆大霉素(广谱,对G-和G+菌有较好抗菌作用)、氯霉素(广谱,对G-菌作用强) 接种方法: 抑菌性:将≤100cfu的枯草、金葡、铜绿菌悬液接种到SDA中。 促生长能力:将≤100cfu的白念、黑曲霉菌悬液接种到SDA中。 适用性检查:白念、黑曲霉在20-25℃下培养≤5天。 判断标准:枯草、金葡、铜绿不得生长。 通过这些步骤,你可以确保你的计数培养基符合要求,为微生物实验提供可靠的实验条件。
军团菌的活化与保存:实验室操作指南 쯸 一、军团菌简介 军团菌(Legionella)是一种广泛存在于自然界的条件致病菌,属于需氧革兰氏阴性杆菌。它在20世纪70年代首次在军人中爆发,被称为军团病,主要引起呼吸系统疾病。由于营养需求特殊,早期分离困难,军团菌在一般的培养基(如营养肉汤、TSB、脑心浸液肉汤等)上无法生长。现在常用的分离培养基有GVPC和BCYE。初代分离培养或活化通常在BCYB平板上进行,温度为35-37℃,培养3-10天。军团菌生长缓慢,菌落通常为灰白色,对半胱氨酸有依赖性,在半胱氨酸缺失的BCYE(BCYE-CYS)平板上无法生长,这一特点常用于军团菌的鉴定。军团菌常存在于空调、通风系统中,可存活数月之久,因此在公共卫生管理和检验中,常对空调送风系统进行军团菌的检测。 二、活化方法 培养基:军团菌的活化常用BCYB平板。 气体环境:BCYE培养基中含有ACES缓冲液和活性炭,可使军团菌不需要在二氧化碳培养箱中也能正常生长,但初代分离和培养建议在含2.5%二氧化碳的培养箱中进行。 操作方法:若菌种为冻干粉形式,按照说明书溶解后,可直接涂布或划线至BCYE平板上;若菌种为甘油冻存管形式,从冰箱中取出速融后,涂布或划线至BCYE平板上,35-37℃培养3-10天。 三、实验室常用保存方法 斜面保存法:将BCYE培养基制成斜面管,接种军团菌后培养至菌落生长良好,置于2-8℃可保存1-2个月或更长时间。若在表面覆盖无菌液体石蜡隔绝空气和减少水分蒸发可延长保存时间。 甘油冷冻保存法:挑取培养好的军团菌菌苔至军团菌专用菌种保存管中制成约10^9CFU/mL的菌液,置于冰箱或液氮罐中冷冻保存。一般在-20℃可保存一年以上,在-70℃以下可保存两年以上。 注意事项: 钠离子对军团菌的生长有抑制作用,因此在配制BCYE或GVPC培养基时,要确保原料中尽可能除去钠离子,在进行培养基pH调整时,要使用氢氧化钾,不可使用氢氧化钠。 进行甘油冷冻法保存时,应使用军团菌专用的保存管(普通的菌种保存管一般含有钠离子,不利于军团菌的存活)。
口罩微生物检测全攻略:从基础到实践 口罩在我们的日常生活和医疗环境中扮演着重要角色,特别是在新冠肺炎疫情全球蔓延的背景下,佩戴口罩已成为预防传染的关键措施。市面上的口罩种类繁多,按用途可分为工业用、医用和民用三种。口罩的质量检验至关重要,其中微生物检验是确保使用者健康的关键指标。本文将介绍口罩微生物检测的相关方法、培养基以及结果判断。 젥䧨 菌群检测 流程:见图1。 结果报告:若乳糖胆盐发管产酸产气,乳糖发酵管产酸产气,且在伊红美蓝平板上有典型大肠菌落,革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌,则可报告被检样品检出大肠杆菌。 绿脓杆菌检测 流程:见图2。 结果报告:若被检样品经增菌分离培养后,证实为革兰氏阴性杆菌,氧化酶及绿脓杆菌试验均为阳性,即可报告被检样品中检出绿脓杆菌。如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。 金黄色葡萄球菌检测 流程:见图3。 结果报告:若在琼脂平板上有可疑菌落生长,镜检为革兰氏阳性葡萄球菌,并能发酵甘露醇产酸,血浆凝固酶试验阳性者,可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。 溶血性链球菌检测 流程:见图4。 结果报告:若镜检革兰氏阳性链状排列球菌,血平板上呈现溶血圈,链激酶和杆菌肽试验阳性,可报告被检样品检出溶血性链球菌。 𑠧菌菌落总数检测 流程:见图5。 结果报告:按照以下算式计算: X2=B㗋/5 式中:X2----真菌菌落总数,CFU/g或CFU/mL B-----5块沙氏琼脂培养基平板上的真菌菌落总数 K-----稀释度 当菌落数在100以内,按照实有数报告,大于100时采用二位有效数字。如果样品菌落总数超过标准规定,则进行复检。 🠧菌定性检测 流程:见图6。 结果报告:若培养管混浊应转种沙氏琼脂培养基,证实有真菌生长,可报告被检样品检出真菌。 젤𘭥𝨍聾𘲰20版1101无菌检查法 流程:见图7。 要求:接种供试品体积不大于培养基体积的10%,硫乙醇酸盐流体培养基(FTM)每管装量不少于15mL,胰酪大豆胨液体培养基(TSB)每管装量不少于10mL。 结果判定:阳性对照管应生长良好,阴性对照管不得有菌生长。供试品管若均无菌生长,判定供试品符合规定;若供试品管中任何一管有菌生长,判定供试品不符合规定。 通过这些检测方法和流程,可以有效确保口罩的质量和安全性,保障使用者的健康。
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