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消光系数最新视觉报道_消光系数计算蛋白浓度公式(2024年11月全程跟踪)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：热点更新日期：2024-11-26

消光系数

蛋白质的紫外线吸收峰值 𐟌ˆ 原理：蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，这使得蛋白质能够吸收紫外光。吸收高峰位于280nm处，其吸光度（光密度值）与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。这一波长范围内的光吸收值与蛋白质浓度成正比，根据Beer-Lambert定律计算蛋白质浓度。 A = E • C • l A代表吸光度，E代表消光系数，C代表蛋白质浓度，l代表光径长度。消光系数可以根据蛋白质序列进行估算。 𐟌Ÿ 特点：优点：简单快速；不消耗样品：检测过程中不对样品进行处理，故而测定后能回收样品。缺点：普适性差：不同的蛋白质有不同的酪氨酸和色氨酸含量。对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故要准确测量，必须要有待测蛋白质的纯品作为参考。曲线非线性：标准曲线也有轻微的非线性，因而不能用Beer-Lambert定律进行计算，而只能用标准曲线来测定未知蛋白质的浓度。干扰物质多：若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等能吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。 𐟔 另外，由于不同蛋白的序列不同，其所含有的酪氨酸和色氨酸所占总氨基酸的比例不同，因此造成了不同的蛋白具有不同的消光系数。在使用该方法进行测定蛋白浓度时，需要知道待测蛋白的消光系数，将通过紫外分光光度计测得的浓度除以蛋白的消光系数即为该蛋白的真实浓度。待测蛋白的消光系数可通过软件进行预测，在预测时只需要在网站中输入蛋白质的氨基酸序列即可给出相应的消光系数。预测蛋白消光系数的网址为： 𐟓 步骤：将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂（水或缓冲液）作空白对照；在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280；根据吸光度和摩尔消光系数计算蛋白质浓度。 𐟓 注意事项：由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。

英文名称：BDP 630/650 X NHS ester 中文名称：BDP 630/650 X NHS酯 CAS号：2213445-35-1 分子式：C33H31BF2N4O6S 分子量：660.5 规格：5mg，10mg，25mg 纯度：≥95% 外观性状：固体供应商：陕西新研博美生物科技稳定性：-20℃以下冰冻、干燥、避光。溶解条性：溶于部分有机溶液。注意事项：避免频繁解冻，现配现用，保持干燥，避光。 BDP 630/650 X NHS ester是一种远红荧光染料，属于Bodipy氟化硼二吡咯类荧光物质。该染料具有高消光系数和荧光量子产率，对溶剂极性和pH值变化相对不敏感，展现出稳定的光谱性质。其NHS酯（琥珀酰亚胺酯）基团是与蛋白或抗体偶联的常用工具，可用于标记蛋白的伯胺、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子。因此，BDP 630/650 X NHS ester在荧光偏振测定、离子探针、分子探针、荧光标记、分子砌块等领域有着广泛的应用，尤其在环境监测和生命科学研究中发挥着重要作用。

何时需要进行光毒性试验？𐟌ž 在评估化合物是否具有光反应性时，首先要考虑它在290至700nm波长范围内能否吸收光子。如果化合物在290至700nm波长范围内的摩尔消光系数（MEC）不高于1000 L/mol/cm，那么通常认为该化合物不具有足够的光反应性来产生直接的光毒性。 𐟔 插播一条信息：SCCS NoG 12th和ICH S10 Step5规定的波长范围虽然有所不同，但本质上都是一致的，即一般自然阳光的波长范围。我们知道，光谱中的紫外线频率可分为UVA（400~320nm）、UVB（320~280nm）、UVC（280~100nm）和EUV（100~10nm）。自然界的主要紫外线光源是太阳，太阳光透过大气层时，波长短于290nm的紫外线会被大气层中的臭氧吸收掉，因此一般自然阳光的波段在290~700nm，日常接触的紫外线主要是290~400nm波段。如果化合物有潜在的光反应性，那么有必要开展光毒性试验。通常采用的方法是体外3T3 NRU光毒性试验（OECD 432）。如果得到阴性结果，则不需要进一步试验。如果得到阳性结果，一般会进行体外3D重组皮肤模型光毒性试验（OECD 498）来得出NOEL，然后根据NOEL进行评估。

中文名：Cy5-胆固醇英文名：Cyanine5-Cholesterol，Cy5-Cholesterol Cyanine5-Cholesterol（Cy5-胆固醇）是一种分子复合物，由Cyanine5荧光染料和胆固醇两部分组成。Cyanine5部分是一种具有良好荧光特性的红色荧光染料，具有高消光系数和亮度，对pH不敏感，尤其适用于远红光区的荧光成像。胆固醇部分则是脂溶性物质，是细胞膜的重要成分，具有维持细胞膜稳定性和流动性的功能。Cyanine5-Cholesterol结合了荧光染料和胆固醇的特性，使其能够进入细胞膜并在细胞内发挥荧光标记的作用，在细胞标记、生物分析和成像等领域具有广泛的应用。

消光系数检测机构：第三方消光系数测试方法

点云数据处理全攻略：从提取到可视化 𐟌𒠧‚𙤺‘参数提取：单木参数、零件尺寸测量，生成任意方向包围盒和边界框。 𐟓Š 点云特征检测：计算法线、曲率，提取脊线、边界和特征点。 𐟌 点云地面处理：提取地面点、补洞，生成DEM和等高线。 𐟏ž️ 点云生成：CHM、DSM、DTM生成。 𐟔„ 点云配准：多视点全局配准，误差计算分析，误差区域选取。 𐟏—️ 点云重建：多种方法重建物体表面，计算表面积、体积、消光系数等参数。 𐟎蠧‚𙤺‘体素化：任意方向的体素化和网格化，以及三维可视化显示。 𐟌ˆ 点云平滑与简化：点云上采样，模型简化，三维模型补洞。 𐟎‚𙤺‘形状检测：平面、圆柱、球体等形状检测。 𐟧‚𙤺‘计算几何原理：平面直线求交点，平面相交求交线。 𐟌Ÿ 点云三维可视化：海量点云渲染，按高程和类别渲染。

中文名称：Cy2-NHS 活化酯英文名称：Cyanine2 NHS Ester，CY2-SE CAS号：186205-33-4 分子式：C29H30IN3O6 分子量：643.47 规格：5mg，10mg，25mg 纯度：≥95% CY2-SE是一种用于标记肽、蛋白质、寡核苷酸的氨基基团的染料。它属于CY染料系列，其中CY是花菁（Cyanine）的缩写，这种化合物由奇数个甲基单位连接的两个氮原子组成，具有波长长、吸收和发射可调、消光系数高、水溶性好、合成相对简单等特点。CY2-SE常被用于蛋白、抗体以及小分子化合物的标记，通过简单的混合反应即可实现结合。

𐟧쨶…微量分光光度计使用指南 𐟔 超微量分光光度计，精密的光谱仪器，广泛应用于科研领域。相较于传统分光光度计，其上样量极低，仅需1滴样品即可完成检测。 𐟒‰ 对于核酸检测，通过检测A260值来定量核酸。不同核酸类型（dsDNA、ssDNA、RNA）具有不同的消光系数，通过空白检测和样品检测，结合公式c=f㗁260计算浓度。同时，A260/A280和A260/A230的比值可用来评估核酸的纯度。 𐟧𑠥﹤𚎨›‹白检测，则通过检测A280值来定量。由于蛋白质成分复杂，消光系数各异，因此通过空白检测和样品检测，结合公式c=10*A280/k计算浓度。 𐟌Ÿ 如何评价超微量分光光度计的性能？依据《微量分光光度计校准规范JJF 1836-2020》，通过重复性检测、线性检测和准确性检测三个方面进行评价。重复性偏差小于5%，说明稳定性良好；线性检测中R2接近1，则数据可靠；准确性检测则通过标准品验证浓度。 𐟔젨𖅥𞮩‡分光光度计在科研领域具有广泛应用，掌握其使用方法和性能评价是科研工作的重要一环。

紫外分光度法测定DNA和RNA浓度紫外分光度法是一种常用的测定DNA和RNA浓度的方法。通过测量特定波长下的光密度（OD值），可以间接计算出核酸的浓度。以下是该方法的基本原理和操作步骤： OD值的含义 𐟌ž OD是optical density的缩写，表示被检测物质吸收的光密度。由于核酸中的碱基具有共双键结构，因此它们具有紫外光吸收特性。不同波长的吸收峰 𐟌ˆ OD260：DNA双链的吸收峰，主要反映DNA的浓度。 OD280：芳香族氨基酸的吸收峰，主要用于判断蛋白质污染程度。 OD230：核酸提取过程中使用的盐离子在230nm处有吸收峰，如果OD230很高，说明盐离子浓度较高。纯度判断 𐟔 OD260/OD280的比值用于判断RNA或DNA的纯度。高纯度的DNA比值应该在1.8-2.0之间。如果比值低于1.8，说明蛋白质污染较严重；高于2.0，则说明可能有RNA污染。操作步骤 𐟧ꊥ‡†备核酸样品：将待测的DNA或RNA样品溶解在适当浓度的缓冲液中。测量OD值：使用紫外分光度计，分别测量260nm、280nm和230nm处的光密度。计算浓度：根据已知的摩尔消光系数，计算DNA或RNA的浓度。注意事项 ⚠️ 实验过程中要避免蛋白质和盐离子的污染，否则会影响结果的准确性。测量时要保持样品池和空白池的清洁，避免杂质干扰。通过以上步骤，可以准确测定DNA和RNA的浓度，为后续的实验提供可靠的参考数据。

一、产品简介 BODIPY 558/568 acid是一种荧光染料，具有明亮的黄红色荧光和高度的光学稳定性。其名称中的“BODIPY”是“Borondipyrromethene”的缩写，代表了一类具有特殊荧光性质的有机化合物。该染料的最大吸收波长和最大发射波长分别约为558纳米和568纳米，位于绿色和黄色光谱之间，具有高的量子产率和消光系数，能够在受到激发时发出强烈的荧光信号，提高荧光检测的灵敏度和准确性。此外，它还具有出色的光学稳定性，对溶剂的极性、pH值及溶剂种类不敏感，能在复杂的生物环境中稳定地发出荧光。 BODIPY 558/568 acid还具有良好的疏水性，与脂质、细胞膜等脂质结构有良好的相容性，适用于细胞膜标记和成像方面的应用。同时，其羧酸基团赋予了染料更多的化学反应性和生物相容性，使其可用于标记生物分子，如蛋白质、核酸等，以监测它们在细胞内的定位和动态变化。在化学分析中，该染料还可用于检测和分离化合物。二、产品详细信息 1.基本信息中文名称：BODIPY 558/568 羧酸英文名称：BODIPY 558/568 acid，BDP 558/568 COOH，BDP 558/568 carboxylic acid，BODIPY 558/568 carboxylic acid CAS号：150173-72-1 分子式：C16H13N2BF2O2S 分子量：346.16 规格：5mg，10mg，25mg 纯度：≥95% 2.产品物理性质状态：固体/粉末溶解性：溶于大部分有机溶剂保存条件：-20℃以下储存、干燥、避光。注意事项：根据使用要求进行分装，避免反复冻融。三、相关产品推荐 BODIPY-Acetylene Reagent BODIPY TR Ceramide BODIPY FL Maleimide BODIPY FL hydrazide PYBG-BODIPY CHOLESTERYL BODIPY BODIPY pyridinium iodide BBR-BODIPY BODIPY FL Iodoacetamide AZIDO-BODIPY-FL-510 BODIPY-OH pyridinium iodide BDP 564/570 carboxylic acid BODIPY TMR C5-Maleimide FMOC-TRP-BODIPY BODIPY FL PHOSPHATIDYLINOSITOL 温馨提示：产品仅用于科学研究本文编辑来源于：西安陕西新研博美生物科技有限公司WWH。

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