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ChIP-seq揭秘TF结合位点 ChIP-seq,全称染色质免疫沉淀-测序,是一种用于寻找特异性转录因子(TFs)结合位点的强大工具。它的实验过程可以分为以下几个步骤: 1️⃣ 固定连接:通过甲醛(formaldehyde)稳定蛋白质与DNA之间的连接,形成DNA-蛋白质交联。 2️⃣ 超声波裂解:在裂解缓冲液中,通过超声波分解与蛋白质结合的DNA。 3️⃣ 抗体纯化:加入特定的抗体,该抗体与磁性珠子结合,形成抗体-蛋白质-DNA复合物,并通过离心收集复合物。 4️⃣ 酶解分离:使用蛋白酶K(protease K)去除DNA和蛋白质之间的结合,然后对提取的DNA进行二代测序。 在数据分析方面,ChIP-seq的流程如下: Fastq数据质控:去除adapter并进行质控。 比对基因组:将Fastq文件比对到基因组上,生成Bam文件。 排序和去重:对Bam文件进行排序并去除重复序列。 寻找peaks并注释:寻找peaks并进行注释。 差异peaks计算:计算差异peaks并寻找其motif。 可视化:将结果进行可视化展示。 ChIP-seq的优势包括: 能够捕获整个基因组的转录因子或组蛋白修饰的DNA靶点。 定义转录因子结合位点。 结合RNA测序和甲基化分析,揭示基因调控网络。 然而,它也有一些局限性: 需要为每个转录因子(TF)制备抗体。 已知TF是必需的。 ChIP实验无法区分不同TF亚型(蛋白质亚型)。 ChIP-seq的应用范围非常广泛,包括: 寻找已知TF的结合位点。 通过Motif in all peaks,寻找TF结合的motif。 比较不同细胞中同一蛋白的peaks。 通过这些步骤和分析方法,ChIP-seq为研究基因调控和转录因子结合位点提供了强大的支持。
生物信息学干货:蛋白理化及多序列比对技巧 蛋白质分子量与等电点预测 不同蛋白质的等电点各异。当缓冲液与等电点一致时,蛋白质会沉淀,影响酶促反应。因此,了解蛋白质的等电点至关重要。BioXM软件可进行此分析。 蛋白N端信号肽分析 信号肽含有疏水区,可能导致重组蛋白形成包涵体。在设计引物前,需先进行信号肽分析,并在信号肽断裂位点后的碱基端设计引物。注意:切除信号肽后要验证读码框是否改变,且质粒载体上带有启动子,无需考虑RNA聚合酶转录问题。 多序列比对 GeneDoc软件支持两种算法(pairwise和multiple)进行多序列比对,具体操作流程见图3。输出结果为aln格式,可用Jalview可视化打开。 𑠃lustalX2多序列比对 将多条序列依次输入text文件,保存为txt格式。ClustalX2支持多种比对格式,完成后得到树文件和aln文件,用Jalview打开aln文件即可。 EGA-X多序列比对及进化树分析 MEGA-X支持多序列比对和进化树分析,完成后输出fasta格式和mega格式文件。构建进化树后,可点击小锤子进行美化。 蠅Spript可视化及二级结构预测 ESpript可用于多序列比对可视化和二级结构预测。将MEGA比对后格式和Swiss model建模文件导入ESpript,即可生成高质量配图。 Motif预测 详细见图示,了解如何进行motif预测。
变色龙眼影新色,值吗? 大家好,我是第一个发这套Clionadh新品眼影试色的!这次入手了electric bundle以及1个vibrant expansion新色,还有3个vibrant老色。先说一下整体感受吧,这套眼影的配方浓度真的很棒,变色效果有好有坏。图2我标了必买色和不推荐色,四个叉的意思并不是说颜色难看,只是比起变色龙更像偏光,性价比较低。下面我会具体分析每个色号,仅代表个人感受哦! Cinder 这个颜色真的不是一个冷红珠光吗?侧灯一开变色效果还挺明显的,但平时看不出来什么变化,偏光效果也不太行。 Monarch 华丽的火红色,名字一样洒满荣耀的金光和绿芒,浓郁程度第一名,真心推荐! Oriel 色料很足的人鱼姬色,实心的粉红色,第三个颜色并不是很明显。 Signet 嫩粉色带金银偏光,叫变色龙有点牵强,性价比一般。 Hilt 一个圣洁的颜色,像冰原上的日出,又像雪山环抱之地的黎明,雾蓝的底色带着明显的橘金粉变色。 Tessera 薄如蝉翼的蓝紫浮光跃金,应该是整套里最仙气的一位。 Crown Jewel 老 vibrant系列的王炸,比皇冠上的蓝宝石更浓郁闪亮,艳丽无暇的蓝色。 Niello 神秘独特的变色光谱,仔细看还有点grungy,或许是高配版tm shattered star? Flashed Glass 已经无语了,比第一个还像珠光,和adept那几个多胞胎玫紫属于一个家族。 Quest 加入打勾必买系列,优雅的深蓝底和明显的紫金变色,想到寒夜里踏上征程的女骑士。 Bloodline vibrant经典老色,质感高贵厚重,和monarch变色相似,只是底色更深。 Rayonnant 暖紫和金黄的结合,比quest更轻盈淡雅。 Lineage 又一颗vibrant老色,虽然调色美得微妙,却是实打实的偏光,亮度欠佳,冲着变色龙就不要买。 Mural 最快卖断货的单色,整套中的mvp,和tm ganymede相似,teal base➕金粉绿爆炸变色。 Motif 赛博世界的荧光绿紫,不是浓郁挂,盘里看不出什么名堂,摸下来却很有意思,变色合格。 Emblem 仙女系的一员,比图片更清透,和mural底色相似,区别是mural金色更多,他则是柔和的粉色碎闪。 总的来说,我对变色没有执念,更在意调色独特和配方质量,所以觉得整体是值这个价钱的。黑五全面补货➕折扣,热门单色断货飞快,不想冲bundle的把握机会,因为下次补货要等到天荒地老。
985博士的社会网络分析工具推荐 嘿,大家好!我是正在读985博士的社会网络分析爱好者。今天我想和大家分享一些我在做社会网络分析时常用的工具和软件。无论你是初学者还是资深研究者,这些工具都可能对你有所帮助。 社会网络分析工具 Ucinet、Gephi、Pajek、ORA、R语言等:这些软件可以帮助你进行各种社会网络分析,从节点中心性到社区划分,再到聚类和链路预测,几乎无所不包。 文献计量与知识图谱分析 CiteSpace、VosViewer等:这些工具特别适合用来分析文献数据,构建知识图谱,帮助你更好地理解研究领域。 工程风险评估 ⚙️ 层次分析法、综合评价法、模糊评价法、神经网络法等:这些方法可以用于工程项目的风险评估,帮助决策者做出更明智的选择。 网络动力学 QAP、ERGM、tERGM、SAOM等:这些模型和方法可以帮助你研究网络的动态变化和演化过程。 复杂网络分析 网络模体、元网络、多层网络、时序网络等:这些复杂的网络分析方法可以帮助你更好地理解网络的本质和结构。 统计学与经济学分析 方程模型Amos、Pls-SEM;多元回归分析Spss、Stata、Eviews、mplus等:这些统计和经济学工具可以帮助你进行更深入的数据分析。 效率评估 DEA相关软件:这些工具可以用于评估各种系统的效率,帮助你找出改进的空间。 仿真模拟 系统动力学等:这些仿真工具可以帮助你模拟复杂系统的行为和变化。 爬虫、文本挖掘、内容分析、机器学习 Python:这些技术和工具可以帮助你进行数据抓取、文本分析和机器学习,提升你的研究效率。 演化博弈 𒊥种博弈论(Matlab):这些模型和方法可以帮助你研究演化博弈和策略选择。 扎根理论 vivo:这个工具特别适合用于质性研究和扎根理论分析。 Meta分析 Meta分析可以帮助你综合多个研究结果,得出更可靠的结论。 QCA分析 fsQCA分析和TOSMAN:这些工具可以帮助你进行定性比较分析和解释结构模型分析。 空间计量分析 各种空间计量经济学模型(Tobit模型等):这些模型和方法可以帮助你进行空间数据分析和预测。 希望这些工具和软件能帮助你在社会网络分析的道路上走得更远!如果你有任何问题或建议,欢迎在评论区留言,我们一起交流学习!
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