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质粒是什么前沿信息_细菌的质粒是什么(2024年11月实时热点)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：教程更新日期：2024-11-29

质粒是什么

早稻米和晚稻米的区别最近大家都在问我早稻米和晚稻米到底有什么区别，今天就来聊聊这个话题吧！𐟌𞰟š 作为一个热爱水稻的人，我觉得这个话题特别有意思。每一粒米都承载着大自然的馈赠和农民的辛勤付出，真的是让人心生敬畏。生长环境与气候影响𐟌𑰟Œž 早稻一般在春季播种，夏季收割，所以叫做早稻。晚稻则是在夏季播种，秋季收割，因此叫做晚稻。早稻对光照反应不敏感，适合全年各个季节种植，而晚稻对短日照非常敏感，只有在短日照条件下才能抽穗结实。在长江以南地区，水稻多为一年两季，即早稻和晚稻。春天雨水较多，太阳光较少，这种环境对早稻的生长非常有利。而到了夏天，光照充足，晚稻的生长周期较长，营养物质积累多，灌浆饱满。品质与口感差异𐟍𔰟Œ𞊦—駨𛧱𓧚„生长周期较短，米质疏松，煮熟后粘性小，口感成渣泥状，味觉平淡，容易给人饱腹感。而晚稻米的生长周期长，营养物质积累多，煮熟后口感细腻柔软，粘贴度强，有一丝淡雅香甜的感觉。早稻米腹白较大，硬质粒较少；晚稻米腹白较小，硬质粒多。每一口晚稻米都能感受到大自然的精华和农民的辛勤付出。每一口都是一种享受，让人沉浸其中。用途与适用场景𐟍œ𐟍› 早稻米主要用于米粉制作，可以做成更薄更柔韧的米粉。晚稻米则适合做米饭，能够更好地吸收汤汁。早稻米适合快速烹饪，而晚稻米适合慢慢炖煮。在餐馆里，晚稻米做的菜肴总是能让人回味无穷。每一口都能感受到大自然的馈赠和农民的辛勤付出。用晚稻米做成的菜肴不仅味道好，而且口感绵软，真的是家庭烹饪和餐馆菜肴中的一大亮点。早稻米和晚稻米在生长环境、品质口感以及用途上都有明显的区别。不管是早稻米还是晚稻米，都有其独特的魅力和用途。大家在日常饮食中可以根据自己的口味和需求选择不同的米种来烹饪。如果你对早稻米和晚稻米还有其他问题或者有不同的看法，欢迎在评论区和我互动哦！𐟘Š

𐟧줸€分钟速览质粒图谱解析𐟔 𐟤” 你是不是对质粒图谱感到困惑？别担心，一分钟就能让你秒懂！ 𐟧젪*质粒是什么？** 质粒，就是那些游离在原核生物核基因组外的小型环状DNA分子，它们能独立复制哦！ 𐟌Ÿ **质粒图谱亮点** - 复制起点(ori)：黄色箭头指的方向就是复制方向，它通常只有一个。 - 筛选标记：这些是抗生素抗性基因，能帮你筛选出含有质粒的细胞。 - 多克隆位点(MCS)：外源基因的插入位点，多个限制性酶切位点等你来探索。 - 蛋白标签：让目的基因更显眼，便于融合表达。 - 其他元件：启动子、增强子等，它们是质粒表达和调控的关键。 𐟎‰ 现在，你是不是对质粒图谱有了更清晰的认识呢？快去试试吧！

保存液哪种好菌液保存是实验室中的一项重要技术，正确保存可以确保菌种的活力和纯度。以下是关于质粒菌液保存的详细解答： 𐟔 甘油菌是什么？甘油菌是通过收集生长在对数期的已转化质粒的大肠杆菌，加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。甘油能够提高水体的粘稠度，使其冰点提高，防止细胞内部产生冰晶造成细胞的损害。 𐟧Š 甘油保菌的原理是什么？防止细胞损伤：冷冻保存时，菌液会被冻起来，内部产生的“冰晶”会使细胞破裂，加入甘油后可以防止这种伤害。抗冻作用：甘油能够提高水体的粘稠度，使其冰点提高，防止细胞内部产生冰晶造成细胞的损害。一般使用甘油的终浓度在10%-20%，该范围外的浓度会对细胞产生毒性，质粒会很容易丢失。影响菌种表达活性：高浓度甘油保存菌种据说会影响菌种的表达活性，如果该菌只用一次，怎么化都没关系的甘油浓度太高，质粒就很容易丢失。 𐟧ꠥ悤𝕥ˆ𖤽œ甘油菌？挑取单菌落：从菌种平板挑取单菌落，接种至液体培养基（按需要加入抗生素）中，培养过夜或培养至对数中期。加入甘油：取适量菌液于小管中，加入终浓度为10%-20%的灭菌甘油，混匀后可直接置于-80℃保存。 𐟒‰ 穿刺菌是什么？穿刺菌是指将带有已转化质粒的大肠杆菌的接种针自固体深层培养基表面的中心点垂直穿刺，深入到培养内部，然后轻轻退出，保持接种线整齐，制备而成。 𐟔頥悤𝕥ˆ𖤽œ穿刺菌？琼脂培养基：在1.5ml的Tube管中加入琼脂培养基（半固体）。穿刺操作：把菌体用牙签穿刺于琼脂培养基中，37℃培养一个晚上后便可使用。 𐟌€ 如何从甘油菌、穿刺菌中复苏细菌？复苏甘油菌：取一个干净的移液器枪头，吸取1ul菌液。用吸取菌的枪头在的LB平板上划线。将平板置于37℃培养箱中过夜培养。次日从LB平板上挑取一个单菌落接种到LB液体培养基中，37℃摇床过夜培养。复苏穿刺菌：取一个干净的移液器枪头，沿着穿刺管中淡黄色的大肠杆菌生长线插入，来回反复操作几次，每次都轻微改变枪头的方向，以尽可能的增加枪头与菌的接触面。将沾了菌的枪头在的LB平板上划线。将平板置于37℃培养箱中过夜培养。次日从LB平板上挑取一个单菌落接种到LB液体培养基中，37℃摇床过夜培养。通过以上方法，您可以有效地保存和复苏质粒菌液，确保实验的顺利进行。

如何快速发表文章？研究生必看！ ✅ 一入研究生的大门，就赶紧去实验室吧！早点上手，培养细胞、提取质粒、跑电泳、做Western，练好基本功，了解导师的研究方向，选择你感兴趣的小方向。就像“熟读唐诗300首，不会做诗也会吟”，趁着有空，赶紧看文献吧。 ✅ 实验平台非常重要，重要的事情说三遍！好的实验平台是什么？有水平的导师和良好的科研氛围，有好的动物实验室，有大量的基础实验工具，有先进的实验方法以及一脉相传的实验经验，当然齐全的仪器设备也不能少。好的实验室能帮你节省大量时间，让你有更多时间去创新。在你实验遇到问题时，有水平的导师能及时帮你找到失败原因。比如你想验证NFKB的活性，实验室有NFKB相关质粒，师兄师姐有做EMSA的经验，实验分分钟搞定，结果还特漂亮。若没有，你得写邮件求质粒或自己构建，费时费力。那么你选对平台了吗？ ✅ 开始实验时不要把鸡蛋放在一个篮筐里，研究两个小方向，两手都要硬，根据研究进展再调整侧重。 ✅ 奋斗！奋斗！奋斗！要想尽快出文章，8小时工作制就是奢侈品！ ✅ 青年研究学者（有基金，但有大量教学、医疗工作）没时间、没学生怎么办？生物公司现在如雨后春笋，既然当小Boss了，有些东西就花钱吧，如包装病毒，雇人做些基础实验，外包实验（不过要找个靠谱的，现在审计严格着呢！）。

手把手教你感受态细胞的制备与转化 𐟧늣## 感受态细胞的概念首先，咱们得搞清楚什么是感受态细胞。简单来说，感受态细胞就是那些特别容易接受外源DNA片段的细胞。它们就像一群爱学习的小学生，只要你有好故事（外源DNA），它们就会迫不及待地吸收进去。要制备感受态细胞，通常需要用到一些化学试剂，比如CaCl2或者RuCl3。这些试剂能让细胞膜的通透性变大，就像是给细胞打开了一扇门，让外源DNA更容易进入。基本要求感受态细胞有几个基本要求：没有质粒：或者有与待转质粒兼容的质粒。容易被转进去：一般是G-细菌，细胞壁薄。营养条件一般：不是那种特别娇气的细菌。转化原理在基因克隆技术中，转化就是把质粒DNA或以其为载体构建的重组DNA导入细菌体内，让它获得新的遗传特性。这个过程就像是给细菌换了个新衣服，让它变得更强大。感受态细胞的制备方法有很多，比如电击法、化学试剂法等等。今天咱们主要聊聊化学制备法，特别是CaCl2法。这个方法最早是由Cohen在1972年发现的，简单、快速、稳定，还被广泛用于外源基因的转化。化学制备法 CaCl2法的原理其实很简单。首先，把大肠杆菌放在0℃的CaCl2低渗溶液中，让细胞膨胀成球形。然后，把DNA和CaCl2混合，形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物，这个复合物会粘附在细胞表面。接着，用42℃的热冲击处理一下，细胞就会吸收这个复合物。最后，把细胞放在丰富培养基上生长数小时，球状细胞会复原并分裂增殖。这样，被转化的细菌中，重组子的基因就会得到表达，你可以在选择性培养基平板上选出你需要的转化子。小贴士用CaCl2处理的感受态细胞，转化率一般能达到5㗱06~2㗱07转化子/ug质粒DNA，完全能满足一般的基因克隆实验。如果你想要更高的转化率，可以试试联合其他的二价金属离子（比如Mn2+、Co2+）、DMSO或者还原剂等物质处理细菌。总结化学法制备感受态细胞虽然简单，但非常实用。它不仅稳定、重复性好，而且菌株适用范围广。制备好的感受态细菌可以在-70℃保存，非常方便。所以，如果你在做基因克隆实验，不妨试试这个方法！𐟧슊希望这篇指南能帮到你，祝你实验顺利！𐟚€

分子克隆实验指南：从零开始到成功大家好！首先，非常感谢你们的关注和喜欢，真的很开心我的笔记能帮到大家。还记得最开始的那篇笔记，记录了我那次离谱的分子克隆实验，4个片段的同源重组竟然花了两个月！后来我慢慢发现，分子克隆其实非常微妙，有点像高中时的数学，学霸们轻而易举考100分，而我这种小学渣每次都在及格边缘反复横踩。所以，我想用这个账号记录我的科研日常，希望能和大家一起学习。之前的几篇笔记中，我分享过引物设计、载体酶切、同源重组等非常具体的实验方法。但最近我发现，很多粉丝朋友们刚开启自己的科研之旅，或者是偏向临床的科研大佬们，对分子克隆实验整体了解比较少。所以今天，我想跟大家分享一下质粒构建的大体流程。明确你的目标 𐟎斥…ˆ，在构建质粒之前，你需要有一个清晰的计划。明确你要使用哪种克隆方法，比如同源重组、TOPO克隆还是T4连接。TOPO/TA克隆不需要同源臂，而同源重组和T4连接是需要同源臂的。选择合适的载体 𐟚€ 根据你的实验目的，选择合适的表达载体。例如，常用的原核表达载体有pET28a，真核表达载体有pcDNA3.1，CRISPR/Cas9表达载体有Lenti-V2等等。载体可以通过酶切或者环形PCR后，跑胶回收所需的载体片段。设计引物并扩增片段 𐟔슦 𙦍€选的构建方法，设计并合成引物。PCR扩增需要插入的目的片段，PCR的产物也需要通过跑胶回收。连接与转化 𐟔„ 将载体和目的片段连接后，转入合适的感受态细胞内。例如，DH5˜“产生突变或者缺失，而Stable3相对更加稳定。但提质粒时需要使用试剂盒中的去蛋白液洗3遍，以充分去除核酸酶，减少后续对质粒酶切等实验的影响。通常连接产物的用量不超过总体积的1/20。然后在冰上静止20分钟，热激1分钟，再冰上静置3分钟，加入无抗的LB培养基，摇床摇40-60分钟，最后涂在合适抗性的LB平板上。培养与鉴定 𐟧ꊌB板子放在37度培养箱内过夜生长，第二天挑取单克隆细胞，置于合适抗性的LB培养基中摇菌，然后提质粒送测序公司测序。如果你想偷懒的话，也可以直接送菌液到公司哦，菌液和质粒的测序价格是一样的。今天就分享到这啦，希望这些内容对大家有用！如果有什么问题或者要补充的，欢迎评论或者私信哦！𐟘Š

实验外包避坑指南：这些你必须知道！在开始之前，先明确一点：实验外包并不等于学术不端！其实，很多课题组都会选择将实验外包出去，尤其是那些需要大量时间和资源的实验。比如，像Elisa、分子克隆、切片等实验，甚至引物和质粒设计也可以外包。这样一来，你可以同时研究多个课题，只需要等待数据结果，大大节省了时间，也提高了论文产出效率。为什么选择外包实验？实验数据不精确：有时候，自己做的实验数据可能不太准确，外包给专业实验室可以避免这个问题。实验室条件不足：有些实验室条件有限，无法满足实验需求。外包给专业实验室可以更好地控制实验条件。时间紧迫：有时候，实验需要很长时间才能完成，如果结果出错，还得花更多时间弥补。外包给专业实验室可以节省时间。外包实验需要注意什么？选择靠谱的实验室：一定要打听好实验室的实力和信誉，确保他们能够提供高质量的服务。价格透明：记得询问所需品牌试剂的价格，并要求对方保证试剂等耗材为正品。关注进展：时刻关注实验进展，确保数据出来后可以用。结果真实：强调要的是合理的真实结果，如有不合常理的结果，要及时沟通处理。个人经验分享我们实验室也接过很多次外包实验，包括医学生物领域的各种实验，比如二代测序、转录组等。如果你的实验室实验设备条件不允许，或者大量数据来不及反复落实，综合考量实验成本过高等，都可以考虑外包。总之，实验外包虽然有优势，但也要注意细节。希望这些建议能帮到你！𐟒쀀

寒假科学实验：DNA提取与未来科技探索 𐟎‰ 初中学生们注意啦！想要了解如何撰写科学探究报告吗？寒假期间，上海草心科创教育基地为你提供了一个绝佳的机会！在这里，你可以接触到上海双一流大学的科学探究报告，并且有机会与生命科学专业的研究人员进行交流。 𐟔젦Ž⧴⥟𚥛 在日常生活中的奥秘，以及它们对未来的影响。例如，通过犯罪现场留下的蚊子血液残留，科学家们能够追踪到犯罪凶手，这就是DNA技术的应用之一。 𐟓… 活动主题：大肠杆菌质粒DNA的抽提 𐟑堩€‚合对象：5-9年级的学生 𐟓 地点：上海草心科创教育基地 𐟌Ÿ 寒假期间，快来加入我们，体验科学探究的乐趣，开启你的科技之旅吧！

学校上课的那些幸福时光 𐟎“ 最近帮小师姐处理了五十份发票，提前一天回到学校，感觉整个人都轻松了不少。晚上在万达吃晚饭的时候，突然收到那两口子的消息，瞬间觉得嘴里的香蕉都不香了。可能我还是太笨了吧，没能领悟到让我做阳转还包括提质粒的深意。周一那天，我问了大师姐，她说先挑一两个菌送去测序（记得很清楚，她没提提质粒的事）。当时忙着提那178份RNA，挑完放到摇床就没管了，晚上回学校上课。可能也怀着一种侥幸心理：我走了，后面有啥他俩肯定会安排别人吧？这次算是长教训了，做事得多往后想一步。完美的周四是早上正报发票，被大师兄叫去胶回收测浓度，然后插枪头。大师姐让我洗锥形瓶、配培养基，接着配核酸胶。下午倒平板、报发票，晚上组会。快下班了突然让阳转，十一点才下班。总的来说，我们小组还是非常友爱和谐的，虽然有时候任务重得让人喘不过气来，但大家互相帮助，一起度过难关。在学校上课的日子，真的是既幸福又充实。

DAP-seq常见问题解答，一文搞定！ 1. 𐟔 DAP-seq技术原理与流程技术原理：DAP-seq通过体外表达蛋白与DNA进行亲和纯化，洗脱后进行高通量测序，从而找到转录因子的结合位点。技术流程：构建含有亲和标签的载体，体外表达转录因子与亲和标签的融合蛋白，提取基因组DNA并构建DNA文库。将体外表达的转录因子与DNA文库结合，洗脱后上机测序。解决的问题：快速定位转录因子的结合位点，发现转录因子调控的靶基因。 𐟓š 所需材料组织材料或提取好的基因组DNA 目标蛋白质粒（含有完整目标蛋白序列的质粒，如转录因子） 𐟓ˆ 实验成功率不同转录因子家族的成功率有所不同，具体成功率可参考相关资料。 𐟔„ 重复次数实验包含两个技术重复，以确保结果的可靠性。 𐟌𑠦䍧‰駻„织样本要求植物组织样本的取样时期和部位根据研究需求确定，不同组织和时期DNA的修饰可能影响蛋白与DNA的结合。 𐟔전AP-seq与ChIP-seq的区别 DAP-seq不需要针对每个转录因子制备特异性抗体，具有快速、高通量和节约时间成本的优势。 𐟓Š Input对照 Input对照用于降低背景噪音，是亲和纯化前的文库。 𐟓Œ Peak数目少的结果可用吗？虽然DAP-seq的peak数目较少，但建议仍然对现有结果进行分析，可能挖掘出亮点结果。 𐟔젩ꌨAP-seq结果 DAP-seq结果一般需要验证，验证手段包括EMSA、酵母单杂等实验。如果通过前期大量转录因子筛选出候选转录因子，也可以考虑体内ChIP等验证。