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液体培养基前沿信息_液体培养基主要用于(2024年12月实时热点)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：教程更新日期：2024-12-02

液体培养基

2216E琼脂培养基制备全攻略 2216E琼脂培养基是一种专为海生细菌培养和计数设计的培养基。以下是详细的制备步骤和注意事项：培养基配方（固体）蛋白胨：5克酵母膏：1克磷酸高铁：0.01克琼脂：15-20克陈海水：1000毫升培养基配制步骤配料根据配方换算，在容器中加入少量水（蒸馏水或自来水）。按照配方称取各种药品，依次加入。加足所需水量（一药一勺，取药后立即盖上瓶盖）。溶解淀粉溶解：少量冷水调成糊状。加热溶解，特别是含有琼脂的培养基，一定要煮沸。琼脂的熔解温度为95-97℃，需要边加热边搅拌以防止烧焦。调pH 用煮沸的5%氢氧化钠溶液调节pH至7.6Ɒ.2，25℃。过滤用滤纸或棉花进行过滤（有时可以省去）。分装一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角瓶静置培养：100ml培养基/250ml的三角瓶，最多不能超过150ml。摇瓶培养：15-20ml培养基/250ml的三角瓶，保证通气良好。试管分装液体培养基一般装4-5ml，约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3-4ml，约试管的1/5高度。包扎分装好后，塞上棉塞，再用牛皮纸将棉塞包裹好，防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌置高压蒸气灭菌器中，在121℃（约105kPa）下灭菌20min。如果灭菌的温度太高，营养成分会被破坏，培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。倒平板将冷至50℃培养基分别倒入经灭菌的各平皿中，每平皿约15mL，待其冷却凝固，置2-8℃冰箱内保存备用。注意事项该培养基无机盐成分较多，在高温高压灭菌后容易产生沉淀。为了更好的倒平板，灭菌前的溶解很关键，先加入水，边搅拌边缓慢加入干粉，不要让干粉成团。倒平板之前，应充分摇匀，尽量让沉淀分散开来，避免聚集在一起影响计数。通过以上步骤，您就可以成功制备2216E琼脂培养基，为海生细菌的培养和计数提供良好的环境。

测MIC秘籍！轻松搞定 𐟧젦 𗥓溶解首先，将样品用液体培养基配置成1024/mL或1024mg/mL。如果称量不便，可以选择配置成10240/10mL或10240mg/10mL。如果样品不溶于液体培养基，可以先用有机溶剂溶解，然后再用培养基定容。 𐟔젦“作过程在96孔板的ABC三行中，每个蜂窝孔中加入100液体培养基。在A1、B1、C1中各加入100样品，相当于三个平行。用100量程的排枪在A1、B1、C1中反复吹吸混匀。从混匀的A1、B1、C1中吸100混合液至A2、B2、C2中吹吸混匀，再从A2、B2、C2中吸100至A3、B3、C3中吹吸混匀，依次2倍梯度稀释至A12、B12、C12后，从A12、B12、C12中吸100弃去。在A、B、C三行所有孔中加入100 1.0x10^6 CFU/mL的菌悬液并吹吸混匀。同时设置阴性对照（100培养基+100菌液）和阳性对照（100抗生素+100菌液）。将96孔板放入37℃培养箱中培养16-20小时。 𐟓Š 判定结果根据加菌液后的样品浓度计算MIC。肉眼观察浊度变化，或用酶标仪测定OD600变化。一般以OD600变化＜0.05为判定结果。 𐟓Œ 注意事项 96孔板最外一圈可以选择不用。通过以上步骤，你就可以轻松测定最小抑菌浓度（MIC）啦！

超净工作台紫外灯使用全攻略 𐟌Ÿ 菌落PCR与摇菌全流程 1️⃣ 准备工作打开超净工作台，启动紫外灯进行灭菌20~30分钟。将枪头、酒精灯、离心管等放入超净工作台，确保无菌环境。 2️⃣ 配制PCR预混液根据所需菌落数量，计算并配制PCR体系。例如，若要验证16个菌，可先配制20ul体系，再分装至八联管中。 3️⃣ 挑取菌落用10ul枪头轻轻沾取菌落，注意不要沾太多。将沾有菌落的枪头放入PCR预混液中，反复吹打后弃去枪头。 4️⃣ PCR反应将混合好的PCR液体放入PCR仪中进行反应。反应完成后，进行跑胶验证条带大小是否正确。 5️⃣ 摇菌流程将离心管架、50ml离心管、液体培养基LB、枪头等放入超净工作台，再次进行紫外消毒。根据挑菌数量，摆放相应的50ml离心管，并加入5-10ml LB和对应抗生素。打开培养皿，挑选PCR正确的菌落，用白色枪头挑菌，放入离心管中反复吹打后弃去枪头。将离心管放入摇床继续培养，第二天可进行保菌、提质粒或送测。 𐟌Ÿ 超净工作台操作注意事项所有操作均在超净工作台中进行，确保无菌环境。使用紫外灯时，注意安全，避免直视灯光。操作过程中，保持手部稳定，避免污染。

口罩微生物检测全攻略：从基础到实践口罩在我们的日常生活和医疗环境中扮演着重要角色，特别是在新冠肺炎疫情全球蔓延的背景下，佩戴口罩已成为预防传染的关键措施。市面上的口罩种类繁多，按用途可分为工业用、医用和民用三种。口罩的质量检验至关重要，其中微生物检验是确保使用者健康的关键指标。本文将介绍口罩微生物检测的相关方法、培养基以及结果判断。 𐟔젥䧨‚ 菌群检测流程：见图1。结果报告：若乳糖胆盐发管产酸产气，乳糖发酵管产酸产气，且在伊红美蓝平板上有典型大肠菌落，革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌，则可报告被检样品检出大肠杆菌。 𐟒š 绿脓杆菌检测流程：见图2。结果报告：若被检样品经增菌分离培养后，证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓杆菌试验均为阳性，即可报告被检样品中检出绿脓杆菌。如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。 𐟍‡ 金黄色葡萄球菌检测流程：见图3。结果报告：若在琼脂平板上有可疑菌落生长，镜检为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。 𐟒‰ 溶血性链球菌检测流程：见图4。结果报告：若镜检革兰氏阳性链状排列球菌，血平板上呈现溶血圈，链激酶和杆菌肽试验阳性，可报告被检样品检出溶血性链球菌。 𐟌𑠧œŸ菌菌落总数检测流程：见图5。结果报告：按照以下算式计算： X2=B㗋/5 式中：X2----真菌菌落总数，CFU/g或CFU/mL B-----5块沙氏琼脂培养基平板上的真菌菌落总数 K-----稀释度当菌落数在100以内，按照实有数报告，大于100时采用二位有效数字。如果样品菌落总数超过标准规定，则进行复检。 𐟌🠧œŸ菌定性检测流程：见图6。结果报告：若培养管混浊应转种沙氏琼脂培养基，证实有真菌生长，可报告被检样品检出真菌。 𐟧젤𘭥›𝨍聾𘲰20版1101无菌检查法流程：见图7。要求：接种供试品体积不大于培养基体积的10%，硫乙醇酸盐流体培养基（FTM）每管装量不少于15mL，胰酪大豆胨液体培养基（TSB）每管装量不少于10mL。结果判定：阳性对照管应生长良好，阴性对照管不得有菌生长。供试品管若均无菌生长，判定供试品符合规定；若供试品管中任何一管有菌生长，判定供试品不符合规定。通过这些检测方法和流程，可以有效确保口罩的质量和安全性，保障使用者的健康。

𐟧ꦊ‘菌圈实验：牛津杯法详解𐟥䊧‰›津杯法，也被称为管碟法，是一种利用双层琼脂进行抑菌圈实验的方法。虽然操作稍显复杂，但结果准确可靠。今天，我们将来介绍一种更简便的单层琼脂牛津杯法。𐟑‡ 首先，准备好菌悬液，浓度控制在1.0㗱0^7-8CFU/mL。你可以使用生理盐水、PBS或液体培养基进行稀释。接下来，在琼脂板背面做好标记，并用100的菌悬液均匀涂布于平板上。𐟧𞊊之后，将含菌平板放入框子中，便于后续操作。牛津杯经过灭菌并烘干后，用镊子轻轻放置在含菌平板上，并注入100-150的样品。同时，以溶解样品的溶剂作为空白对照。𐟥䊊最后，盖上培养皿盖子，并将框子置于37℃的恒温培养箱中培养16-20小时。培养结束后，用镊子取出牛津杯，倒置平板，采用十字交叉法测量抑菌圈的直径。𐟓 通过这种方法，你可以有效地评估样品的抑菌效果，为科研工作提供有力支持！𐟒ꀀ

化验员必学：鉴定类培养基的制备指南 𐟧ꊥ˜🯼Œ化验员们！今天我们来聊聊鉴定类培养基的制备方法。鉴定类培养基主要用于检验微生物的各种生化特性，很多分离类的培养基也具有鉴定效果，被称为分离鉴别培养基。这些培养基的形式多种多样，按状态可分为液体、固体、半固体。每种类型的培养基配制方法也不尽相同。液体类鉴定培养基 𐟌Š 液体类培养基，比如糖发酵、MR-VP、氨基酸代谢试验等，通常需要分装到试管中。如果你需要观察产气现象，可以在试管中放入倒管。灭菌后要进行排气；如果是厌氧培养，可以在培养基上方覆盖约3mm的液体石蜡。半固体类培养基 𐟍Š固体类培养基中通常含有少量的琼脂，需要先加热煮沸溶解均匀，然后分装到试管中。灭菌后摆直立，待凝固后备用。固体类培养基 𐟍𐊥›𚤽“类培养基有几种常见的制备方式：倒平板：将灭菌后冷却至50Ⰳ左右的完全培养基倾入无菌平皿即可。如果需要观察透明圈等现象，倾注平板不宜过厚。摆直立：适用于观察需氧条件下的单项生化反应。灭菌后一般摆成长斜面（斜面：底层≈3:2），底层也可以更短，主要起固定作用。高层斜面：适用于观察复合生化反应结果，同时需观察有氧和缺氧部分。灭菌后需摆高层斜面（斜面：底层≈2:3），使用的试管塞必须具有良好的透气性。小贴士 𐟒እ葉Œ全灭菌的培养基，通常建议先加热溶解分装，再进行灭菌处理。对于灭菌后还需添加不稳定成分的培养基，则需先灭菌，冷却后加入不稳定成分，再分装至无菌器皿。希望这些小技巧能帮到你们，祝大家在化验员的道路上越走越远！𐟚€

𐟍𒌂肉汤培养基制作指南𐟧슰Ÿ”쌂培养基，全称Luria-Bertani Medium，是微生物学实验室的明星培养基！它特别适合培养大肠杆菌等常见菌种哦。 𐟥㥮ƒ的名字来源于lysogeny broth，意为“溶源肉汤”，最初是用来研究溶源性噬菌体与宿主的关系的。 𐟓配方来啦： - Tryptone（胰蛋白胨）10g/L，提供氮源和氨基酸。 - Yeast Extract（酵母膏）5g/L，提供氮源、维生素、生长因子和少量碳源。 - Sodium Chloride（氯化钠）10g/L，维持渗透压平衡和细胞稳定。 𐟒ጂ培养基可以做成液体或固体形式哦： - 液体LB培养基适合细菌大量扩增和表达外源基因。 - 固体LB培养基则是在液体基础上加了琼脂，用于菌落培养、筛选和计数。 𐟒‰想要筛选特定菌种？没问题！在LB培养基中加入抗生素如氨苄青霉素，就能筛选出携带抗性基因的转化子啦。加入伊红美蓝还能鉴定大肠杆菌等菌种呢！

细胞复苏实验全攻略：从准备到培养细胞复苏是实验室中的一项重要技术，以下是详细的实验步骤和所需器材： 𐟧𜠥ꌥ™覝准备 1ml枪头移液枪 15ml离心管培养皿超净台水浴箱离心机 CO2培养箱一次性透明药膜 𐟔젥ꌦ�ꤊ打开超净台，用75%酒精擦拭消毒，将实验器材放入超净台内，打开紫外灯照射消毒30分钟。将水浴锅打开调至37℃，将HepG2完全培养基从-80℃冰箱中取出，放入预热的水浴锅中。从-80℃冰箱中取出HepG2细胞，套上一次性薄膜手套，快速放入预热的水浴锅中，晃动使其迅速解冻，目测无肉眼可见的水晶。用移液器将冻存管中的细胞原液转移到15ml离心管中，缓慢加入4ml的完全培养基。设置离心机1000rpm，离心5分钟，弃上清，吸去液体。加入1ml完全培养基至离心后的5ml离心管中，重新悬浮细胞，来回吸吹打，使细胞充分混合，无团块，吹打约60下。将吹打好的细胞悬液吸至T25培养瓶中，用“8”字法晃匀，使细胞充分混合。标记细胞名称和代数，放入37℃，5%CO2培养箱中培养。 ⚠️ 注意事项细胞复苏时要快，细胞容易成团块状，要吹打混匀。冻存管中的DMSO对细胞有毒，快速解冻可以避免细胞受损。取出细胞后放入常温水中保持温度，迅速将小瓶从水中取出，将水块移到生物安全柜中。用移液器迅速将冻存管中的细胞原液转移到一个15ml离心管中，向试管中小心加入预热的培养基。离心后弃上清，加入完全培养基，重新悬浮细胞，来回吸吹打，使细胞充分混合，无团块。通过以上步骤，你就可以成功复苏细胞并进行后续实验了。记得在实验过程中保持无菌操作，确保实验结果的准确性。

𐟧륌𛥭楾Ÿ物实验报告𐟔슰Ÿ“š 实验报告一：细菌生长反应观察 𐟔젧𛆨Œ在各种培养基中的生长情况：液体培养基、半固体培养基、固体平板培养基。观察菌落的大小、形状、透明度及有无色素等特性。 𐟧렧𚯧獧𛆨Œ接种后的生长现象：记录1号和2号菌落的描述。 𐟧젦𗷥ˆ菌液在固体平板培养基中的分区划线结果：注意菌落的大小、形状、透明度及有无色素等。 𐟓Œ 实验报告二：微生物的分布与染色观察 𐟔Ž 革兰染色观察：记录初染、脱色、复染及冲洗步骤。 𐟔 细菌特殊结构的绘制：用双球菌作为模型，观察并绘制细菌的特殊结构。 𐟓Œ 实验报告三：化学消毒剂杀抑菌力试验 𐟧꠨‘ᨐ„球菌和大肠杆菌对化学消毒剂的敏感试验：记录抑菌圈直径和杀菌能力程度。 𐟓Œ 实验报告四：紫外线的消毒作用 ☀️ 紫外线的消毒原理：讨论影响紫外线杀菌的因素。 𐟔젧𛆨Œ名称：记录不同菌株对紫外线的敏感程度。 𐟓Œ 实验报告五：脓标本分离与初步判断 𐟒‰ 脓标本的分离方法：加入0号阳性对照血浆，观察结果。 𐟔 描述菌落的特性及初步判断：记录不同菌落的形态和初步判断结果。 𐟓Œ 实验报告六：粪便标本分离鉴定步骤 𐟒頧𒪤𞿦 ‡本的接种方法：作血清学鉴定，记录下层呈强包上红包有暖也沉性武动加扭性。 𐟧젤𘉧獨‚ 道杆菌主要生化反应：记录大肠杆菌在SS平板上的生化反应结果。

如何配置和使用液体培养基 𐟌𑊦𖲤𝓥Ÿ𙥅𛥟𚯼ˆliquid culture medium）是微生物和动植物细胞的液状培养基，与固体培养基相对应。它具有通气培养和振荡培养的优点，有利于细胞的生长和提高生产量。以下是液体培养基的配置方法：配料 𐟥㊩…方换算：根据配方计算所需药品的量。加水：在容器中加入少量水（蒸馏水或自来水）。称取药品：按照配方称取各种药品，依次加入。加足水量：加足所需水量，一药一勺，取药后立即盖上瓶盖。溶解 𐟔劦𗀧𒉦𚶨磯𜚧”襰‘量冷水调成糊状。加热溶解：特别是含有琼脂的培养基，需要煮沸。琼脂的熔解温度为95～97℃，加热时需要边搅拌边防止烧焦。调PH 𐟌᯸ 用1N的盐酸或1N的NaOH将培养基调节到所需PH值。过滤 𐟧𜊧”覻䧺𘦈–棉花进行过滤。分装 𐟧𔊤𘉨璧“𖥈†装：静置培养：100 ml培养基/250 ml的三角瓶，最多不超过150 ml。摇瓶培养：15～20 ml培养基/250 ml的三角瓶，保证通气良好。试管分装：液体培养基一般装4～5 ml，约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3～4 ml，约试管的1/5高度。包扎 𐟓报ˆ†装好后，用棉塞塞好，再用牛皮纸包裹好，防止灭菌时水份进入。灭菌 𐟔劦Œ‰配方上要求的温度和压力进行高压蒸汽灭菌。注意温度过高会破坏营养成分，培养基中的糖和氨基酸会使颜色变深。摆斜面 𐟧튧�Œ后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放，使其凝固成一个斜面，约占试管长度的1/2。贮存 𐟧Š 培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。通过以上步骤，你就可以成功配置和使用液体培养基啦！