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流式分选最新视觉报道_流式分选细胞处理步骤(2024年11月全程跟踪)

内容来源：卡姆驱动平台所属栏目：热点更新日期：2024-11-28

流式分选

「贵州茅台—茅苹投资」酱香型科技也是科技！茅台如果开始开发微生物，向医疗进军，想象空间有多大？ 11月28日，国家重点研发计划“基础科研条件与重大科学仪器设备研发”重点专项“高通量拉曼流式细胞分选仪”年度进展推进会在茅台会议中心举行。高通量拉曼流式细胞分选仪”项目由中国科学院青岛生物能源与过程研究所、青岛星赛生物科技有限公司、中国科学院长春光学精密机械与物理研究所、中国科学院城市环境研究所、中国科学院天津工业生物技术研究所、中国科学院深圳先进技术研究院、贵州茅台酒股份有限公司、山东第一医科大学、青岛瑞思德医学检验实验室有限公司、青岛国际旅行卫生保健中心（青岛海关口岸门诊部）共同建设。评审专家组组长李培武院士指出，本项目水平高、潜力大、前景广，与其他项目最大的不同在于研究对象复杂，因为环境中微生物种类数量庞大。茅台作为利用微生物发酵的典型代表，在建立拉曼流式分选仪示范上具备独特的优势，具有战略发展的眼光。他期望茅台能够利用拉曼技术结合组学技术助力拓展生物经济赛道，共同推动生命科学和微生物组学技术发展。王莉对各位专家的到来表示欢迎。她说，茅台酒的独特性源于15.03平方公里核心产区内自然生态、微生态和人文生态共同组成的独特性。自然生态即山水林土气；微生态是长期的酿酒历史选育出的大量特殊的微生物菌群；人文生态则是敬业、精业、乐业的工匠精神。而这当中的核心就是微生态，目前已发现在核心产区存在超过600个科、2800个属的原核微生物，及超过200个科、500个属的真核微生物。与世界上其他的烈酒相比，茅台酒有着以谷物为主要原料、自然混菌接种、开放式固态发酵、甑桶固态蒸馏、陶坛长期储存及以酒勾酒等工艺特点。由独特工艺组合时空要素形成的基酒多样性正是造就最终茅台酒产品丰富典型风格的基础，基酒多样性的根本则在于开放式固态发酵带来的酿造微生物的多样性。开放、固态都给微生物研究带来极大复杂性，造成很多酿造过程机理仍是“黑箱”。本项目从软硬件研究、开发到示范应用系统衔接，已在茅台酒堆积发酵过程功能酵母的快检取得突破性进展，将原来需用2到3天检测时间缩短到3小时以内，使得用微生物检测数据辅助工艺过程控制成为可能。王莉表示，随着高通量拉曼流式细胞分选技术和装备的进一步研发深入，将协同其他先进组学技术，在茅台酒酿造机理“黑箱”解析、酿造微生物互作、制曲制酒更多功能微生物快检、菌群质量评价、代谢产物生成路径解析、原位选育微生物用于废弃物处理等方面有新的应用示范。茅台愿意为本项目研究做出更大贡献，非常乐见先进技术在传统产业中深度应用，让科技创新赋能传统产业转型升级，并将大力促进新的装备制造、生物经济新兴产业诞生。

上海富衡｜原代细胞消化后流式分选细胞代数的界定

浙江大学流式细胞分选技术分享大家好，今天我想和大家分享一些来自浙江大学生命科学研究院姬峻芳教授实验室的流式分析分选实验技术。这个实验室在细胞分选方面有着丰富的经验和独特的见解，我觉得非常值得大家参考和学习。分选前的准备工作 𐟧ꊊ首先，大家都知道，流式细胞分选是一种非常精确的技术，但有时候也会遇到一些挑战。比如，低含量的细胞分选可能会导致纯度不高和回收率低的问题。为了解决这个问题，实验室建议我们事先对感兴趣的细胞进行富集。富集的方式有两种：正选和负选。正选可以用磁珠法，而负选则可以利用nylon wool去除B细胞，或者用磁珠法去除不需要的细胞。分选时使用的管子 𐟓把在分选过程中，选择合适的管子也非常重要。上样一般使用5ml带盖流式管（BDFalcon tube #352003），而收集则可以使用14ml圆底离心管（BDFalcon tube #352059）或者5ml带盖流式管（Falcon tube #352003）。最多可以做到四路分选，非常方便。失败案例分析 𐟚늊在实验过程中，我们也遇到了一些失败案例。比如，有一次分选回来的细胞做表型实验时，发现细胞破碎，培养基里漂浮着细胞碎片，基本死亡。后来发现，这是因为细胞粘连严重，没有制备成单细胞悬液。即便通过喷嘴，细胞也会被切割力破坏。如果是HCC干性biomarker的检测，建议在细胞密度60-70%的时候收获较好。另一次失败是因为FITC通道分选得到的细胞，阴性里有阳性，阳性里有阴性。这可能是因为细胞浓度过高，上样过程中多次重新过滤吹打重悬，导致浓度不均，evt/s波动剧烈（1000-8000），这会严重影响FITC通道的结果，但对APC通道影响较小。参考文献 𐟓š 最后，给大家推荐几篇参考文献：[1]生研院-流式分选细胞注意事项 [2] 如何选择合适的流式抗体。希望这些信息对大家有所帮助！希望这些分享能对大家在流式细胞分选方面的实验有所帮助！如果有任何问题，欢迎大家留言讨论！

单核/巨噬细胞流式分析：新手必读指南 𐟑‹大家好，今天我们来聊聊单核/巨噬细胞流式分析的基础知识，适合新手小白哦！单核细胞的基本知识 𐟧 单核细胞在人体内可是个勤奋的小家伙，它们在脉管系统、骨髓和脾脏中不停地循环。在正常情况下，它们不会增殖，但一旦迁移到外周组织，就会分化成树突状细胞或巨噬细胞。单核细胞的特性是它们具有可塑性和异质性，能够快速调整功能表型来适应环境的变化。单核细胞的培养 𐟧늊想要研究单核细胞，首先得把它们从血液或其他组织中分离出来。你可以用阴选试剂盒从 PBMC 中分离出有活性的单核细胞，也可以用 CD14、CD64 和 CD192 作为标志物进行流式分选。原代人单核细胞可以在体外培养，但在 5 天内会在血清或 M-CSF 存在下开始分化为巨噬细胞。单核细胞以粘附和非粘附细胞混合形式生长，比例取决于培养基和刺激因子。除了原代单核细胞，THP-1 细胞系也常用于研究。它们特别依赖细胞浓度，ATCC 建议的浓度是 10E5~10E6/mL。状态不好的 THP-1 培养 3 天后数量不多，继续培养 1~2 天，培养基会严重泛黄。THP-1 适合在 pH 偏酸性环境生长，对培养基很敏感，不宜频繁换液，尽量用相同酸碱度的 1640 培养基。复苏 THP-1 细胞有难度，建议冻存时密度大些，复苏时用小培养瓶。流式分析巨噬细胞的注意事项 𐟎在分析巨噬细胞时，首先要处理组织，比如解剖、研磨、剪碎等，然后酶消化制备单细胞悬液。在上机检测前建议将样本过滤，保证准确性，还能避免堵管。单核细胞可以用特殊分化培养基分化为巨噬细胞，用 GM-CSF 和 M-CSF 能让单核细胞分化。在 1640 培养基中刺激单核细胞，添加相应物质能导致 M1 或 M2 极化。还可以用不同细胞因子先后刺激单核细胞来获得 M1 和 M2 极化。用 PMA 刺激 6 小时能诱导 THP-1 来源的巨噬细胞，然后继续培养能让其向 M1 或 M2 极化。希望这些基础知识能帮到你们，赶紧动手试试吧！𐟒ꀀ

2024采招-西湖大学流式细胞分选仪两套设备公开招标公告

整体课题实验包括动物实验、CCK8检测、划痕测试、流式细胞分选、耐药株构建、线粒体膜电位测定、Transwell实验和平板计数等。通过动物饮食建模，诱导模型生成，并进行转录组分析、细胞测序、小管形成及克隆形成实验。采用WB、ELISA、蛋白质双向电泳、荧光定量PCR、质粒构建、免疫荧光共定位和免疫共沉淀技术。此外，还运用HE染色、Masson染色、PAS染色、共聚焦显微镜、透射电镜、Tunel荧光和ros荧光等多种方法。实验室日常、科研之路、读博的日子、研究生生活、医学生日常、生物实验室探索、医学之路、科研日常、医学研究生实验。「双胞胎生一个代一个」「张three」探索科学的奥秘的微博视频

手把手教学｜如何用流式细胞仪分选T细胞

浅谈三种细胞分选技术——流式、拉曼光谱、光电镊

流式细胞分选需要新鲜样本，重庆哪里可以做啊？我的样本里有细菌，很多地方都做不了

流式细胞术实验全攻略：从准备到分析流式细胞技术是一种利用流式细胞仪进行单细胞定量分析和分选的方法。它结合了单克隆抗体、免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高科技手段，能够从单细胞水平区分异质性细胞群体。检测对象包括悬浮细胞、贴壁细胞、从实体组织分离的单细胞悬液以及其他生物颗粒。 𐟔 细胞表面染色步骤样本准备采集全血或组织（如脾、淋巴结、胸腺和骨髓），用细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）制成单细胞悬液。对于体外刺激的细胞，直接将刺激后的细胞悬浮在细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）中，然后进行下一步。加满细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS），300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。红细胞裂解如需裂解红细胞（如脾脏），将10x红细胞裂解液（ACK buffer）用去离子水稀释到1x，放置到室温。将细胞重悬于3mL的1x ACK buffer中，室温孵育2-3分钟。如不需要裂解红细胞，直接进入下一步。加入10mL细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）终止红细胞裂解，300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。重复洗涤一次，加满细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）至15mL，300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。细胞计数，用细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）将细胞制成1x107/mL悬液。将100细胞悬液加入2mL EP管中备用。封闭Fc受体封闭Fc受体能减少染色过程中的非特异性染色。在小鼠中，纯化的CD16/CD32单抗能和FcⅢ/Ⅱ结合，封闭非特异性染色，使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入0.5-1纯的抗小鼠CD16/32单克隆抗体，室温孵育10分钟。对于人和大鼠，可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型的纯化Ig或者相同来源血清进行阻断，或者用商业化的Fc受体阻断剂。细胞染色按照说明书的推荐用量加入荧光标记的抗体，混匀后置于4℃，避光孵育30分钟。加入适量细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）重悬细胞，300g离心细胞悬液5分钟，弃掉上清。加入0.2 mL细胞染色buffer（或含1%BSA的PBS）重悬细胞，用流式细胞仪进行检测和分析。通过以上步骤，你可以有效地从单细胞水平区分异质性细胞群体，检测各种细胞类型。希望这篇攻略能帮助你顺利完成流式细胞术实验！

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