caspase3新上映_caspase3是多少KDa(2024年11月抢先看)
大秦艽汤新发现!治脑病? 中医药学,历经千年沉淀,如今在网络药理学的助力下,正焕发出新的活力。网络药理学,这一交叉学科的结晶,为传统中药研究带来了前所未有的机遇。ኊ疾病的发生与治疗同样复杂多样,而中医药的多成分、多靶点、多途径特点,使其能够针对疾病发展过程中的多个关键分子或信号通路进行干预,从而实现更全面的治疗效果。 在这场探索的旅程中,上海中医药大学的研究团队发现了一个令人兴奋的点——中药名方大秦艽汤在治疗脑血管病中的潜在作用机制。 1️⃣ 网络药理学与分子对接技术的结合:研究团队利用网络药理学筛选了大秦艽汤的活性成分和潜在靶点,并通过分子对接技术验证了这些成分与靶点的相互作用。찟 2️⃣ 实验与生物信息学分析的整合:利用生物信息学预测和实验验证,研究团队使用BCCAO大鼠模型进行Morris水迷宫等测试,增强了研究的可信度,为中药临床应用提供了有力支持。 3️⃣ 多靶点治疗机制的探索:大秦艽汤通过作用于Caspase3、P53等关键靶点,调节信号通路,为CSVD治疗提供了新的视角,促进了对中药复方作用原理的理解。ﰟ슊这项研究不仅为中药现代化提供了新的技术路径,也为中医药治疗脑血管病提供了坚实的科学依据。 随着国家对中医药扶持政策的不断加强,相信中医药研究在未来将迎来更加广阔的前景。𑀀
USP7新发现:促GBM凋亡 泛素化修饰在蛋白质翻译后修饰中扮演着重要角色,其中USP7抑制剂P5091对GBM细胞的凋亡具有显著影响。通过不同浓度的P5091处理GBM细胞,发现细胞活力随时间和浓度呈现依赖性下降。在处理48小时后,SHG-140和T98G细胞的半抑制浓度分别为1.2和1.59。随着P5091浓度的增加,GBM细胞的早期、晚期凋亡和总凋亡均显著增加。 젨🛤𘀦研究表明,P5091处理后,GBM细胞中BCL2蛋白表达显著降低,而BAX和caspase3蛋白表达则显著增加。这些结果与免疫荧光的结果一致,表明P5091对GBM细胞具有明显的促凋亡作用,且其凋亡作用随浓度的增加而增加。 为了探究USP7诱导GBM细胞凋亡的机制,作者使用Co-IP和LC-MS/MS结合的方法鉴定了SHG-140细胞中的USP7结合蛋白。鉴定出的蛋白与KEGG通路分析显示,USP7与蛋白酶体功能高度相关。通过对蛋白提取物进行TMT蛋白质组学分析,发现368种蛋白质的含量发生了变化,其中227种蛋白质增加,141种蛋白质减少。 最终,作者成功筛选了ARF4,一种与USP7抑制剂结合的蛋白,并提出了USP7通过蛋白酶体途径感染ARF4的假设。这些发现为泛素化修饰在GBM细胞凋亡中的机制研究提供了新的线索。
科研小白必看:蛋白提取与电泳全攻略 젥ꌦ᤻ 分离小鼠胰脏T细胞,体外分化培养Th1细胞。收集1x10^6个细胞,提取蛋白。蛋白裂解过程中,建议使用超声或注射器针头反复抽吸,以促进蛋白裂解。裂解后,加入Loading Buffer,充分溶解蛋白质后进行蛋白变性。最后,使用12000g离心15分钟,弃去沉淀,收集上清液。小分子量蛋白检测可使用高浓度蛋白胶(12%),90v电压慢跑可使小分子条带更整齐。 抗体选择: 使用Abmart的LC3B抗体(稀释比1:2000),货号:T55992,可清晰检测到LC3B的两个条带(LC3I和LC3II)。Caspase3抗体(货号:T40044)、Full-Caspase3和Cleaved-Caspase3也都能成功跑出条带。 ᠥ㫯Abmart提供了许多小样供课题组使用,尚未跑出的抗体可以尝试申领! 【Tag】:
细胞凋亡检测的五大方法及其原理 细胞凋亡是生物学中的重要过程,了解其检测方法对于研究细胞命运至关重要。以下是五种常用的细胞凋亡检测方法及其作用原理: 1️⃣ Hoechst33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双标记法 作用原理:当细胞坏死时,质膜不完整,PI进入细胞内部,嵌入DNA或RNA中,使坏死细胞着色(红色)。Hoechst33342是一种亲脂性荧光染料,可跨膜进入活细胞并与DNA特异结合,显示活细胞(蓝色)。凋亡细胞和活细胞不着色。 2️⃣ Annexin V/PI双染色法 作用原理:磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡早期,PS翻转到细胞膜表面。Annexin-V是一种Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。标记后的Annexin-V作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜检测细胞凋亡。 3️⃣ TUNEL法 作用原理:脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,掺入凋亡细胞DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶的抗地高辛抗体结合。过氧化物酶在适合底物存在下产生颜色反应,特异定位正在凋亡的细胞。 4️⃣ Caspase-3活性检测法 作用原理:Caspase家族在介导细胞凋亡中起重要作用,其中caspase-3为关键执行分子。正常状态下,caspase-3以酶原形式存在于胞浆中。在凋亡早期,它被激活,活化的caspase-3裂解相应底物,最终导致细胞凋亡。在细胞凋亡晚期和死亡细胞中,caspase-3活性下降。通过Western blot分析Procaspase-3的活化及对底物的裂解来检测细胞凋亡。 5️⃣ 形态学检测法 作用原理:根据凋亡细胞的形态特征,使用透射电镜检测凋亡细胞的形态变化。凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期细胞核内染色质高度盘绕,出现空泡结构;Ⅱa期细胞核染色质高度凝聚、边缘化;晚期细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。 这些方法提供了检测细胞凋亡的不同角度,帮助研究者更好地理解细胞的命运和调控机制。
젥子蛋白跑WB的技巧与注意事项 在实验室工作中,小分子蛋白如Bcl2、Caspase-3、Bax以及自噬相关蛋白LC3B等非常常见。以下是跑WB时需要注意的几个关键点: 1️⃣ 配胶: 小分子蛋白的分离胶浓度一般为12%-15%,这样可以使条带更加清晰。在倒胶时,浓缩胶的比例可以适当增加到4:6,有助于充分浓缩蛋白,减少电泳过程中的弥散。 2️⃣ 上样: 建议增加1倍的上样量,以防蛋白弥散过多。选择适用于小分子蛋白的marker,这样在敷抗体时可以更清楚地裁膜。电泳开始前,可以用1oading buffer补齐未点样的胶孔,防止两边不齐跑成“八”字。 3️⃣ 电泳: 在浓缩胶部分设置恒压70V、30分钟左右,使蛋白浓缩到一条线上后,调大电压至110V,直至所需蛋白区域全部分开。避免长时间低电压跑胶,以防蛋白弥散过多。同时,整个电泳过程中要注意降温。 4️⃣ 转膜: 由于小分子蛋白分子量小,吸附能力弱,因此转膜时选择0.22的PVDF膜。常规0.45膜容易穿透,剩余条件同正常蛋白一般可以满足条件。 5️⃣ 封闭: 使用快速封闭液或脱脂牛奶按正常条件封闭即可。裁膜时根据marker上下留出足够多的空间。 6️⃣ 一抗孵育: 在保证上述条件的基础上,一抗是出好结果的关键一步。若没有前期实验经验,一抗的稀释比一般按照说明书配置。若有前期实验经验,可适当调整比例。一抗浓度过高可能导致显影阶段出现杂带,过低则可能看不到条带。使用1ⴔBST缓冲液稀释,4℃孵育过夜。 7️⃣ 后续步骤: 二抗比例及孵育时间、显影按常规操作即可。若抗体不好用或蛋白难出结果,可适当延长洗膜时间及次数。 注意事项: 转膜时,若蛋白分子量过小,可适当提高甲醇比例(30%左右)改善吸附能力。 跑小分子蛋白时marker尽量不跑到一张膜上,对于常见内参GAPDH、Actin及Tubulin等来说,分离胶浓度大上述蛋白区域一般分不开或分离不完整,易导致内参不齐。
常滋堂复合多糖是肿瘤患者最智慧的选择 常滋堂复合多糖的六大途径 一、特异与内皮细胞表面受体结合,抑制肿瘤细胞转移。 二、抑制肿瘤新生血管生成,缩小肿块,最终杀死肿瘤细胞。 三、激活肿瘤细胞结束关键蛋白 Caspase-3,促进肿瘤细胞结束。 四、促进细胞 DNA、 RNA 、蛋白合成,减少化疗和放疗的毒性,具有升白、止吐、生发、等作用。 五、和免疫细胞表面活性多糖受体结合,激活DC、CTL、M𐤣NK等免疫细胞(打开免疫细胞开关),靶向沙伤肿瘤细胞。开创肿瘤生物调养全新方向。 六、常滋堂复合多糖具有生物载体作用,杀死肿瘤效果提升5~7倍。 常滋堂复合多糖针对肿瘤发生的根本机理而研发,因此适合于各种癌症病人。能促进巨噬细胞的增殖,并且提高其吞噬能力,有显著提高机体免疫力、对抗肿瘤细胞的作用。吴秋芳高级健康管理师的微博视频
aespa 回归 收录曲 磀aespa回归」「whiplash」 1. Just Another Girl 2. Pink Hoodie 3. Flights, Not Feelings 4. Flowers 5. Kill It
阿尔茨海默病大鼠模型建立及行为学检测 补建立: 采用SD大鼠,通过1%戊巴比妥钠40/g腹腔内注射麻醉,固定于脑立体定位仪上。根据大鼠脑立体定位图谱,以前囟为零起点,前囟后3.5 mm处为穿刺点,中线右侧旁开2mm,使用牙科钻钻开颅骨。采用微量注射器自脑表面垂直进针3mm,即(AP= -3.5 mm, ML=2.0 mm, DV=3.0 mm),双侧海马CA1区缓慢匀速注射A-40各10 (1 ),留针5 min,退针后缝合伤口。 造模后3天,开始尾静脉注射生理盐水,大鼠每只给药100/次/d,连续给药21天。 頨ጤ〦在给药后21天,进行Morris水迷宫试验,分为定位航行实验和空间探索实验。 定位航行实验:大鼠连续接受5天训练,每天4次,每次时间间隔30min,记录下大鼠从4个入水点和入水并找到平台所需要的时间,即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果。 空间探索实验:实验第6天,撤去平台,从距离平台的最远端入水后,将大鼠放入水中,记录下30s内大鼠的游泳轨迹,观察分析大鼠在目标象限的停留时间及穿越平台的次数。 젧𛇧 理学: 尼氏染色:海马组织固定后石蜡切片,进行尼氏染色,观察海马区神经细胞形态和数量。光学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的神经元数量。 免疫荧光染色:观察海马区A-40染色情况。荧光显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性斑块数量。 TUNEL染色:观察神经元凋亡情况。荧光学显微镜下计数视野下每组大鼠同一部位的阳性染色数量。 젦 志因子水平: RT-qPCR检测:收集海马组织,提取RNA,反转录cDNA,PCR检测caspase-3,Bcl-2和Bax的表达。 Western-blot检测:收集海马组织蛋白,检测active-caspase-3,Bcl-2和Bax的蛋白表达。
多肽Ac-DEVD-AFC;201608-14-2
GSDM家族在细胞焦亡中发挥关键作用,其中GSDMD作为炎性体的共同协同效应物,在炎症性疾病中具有重要功能,其调控机制正在深入研究中。 1.GSDM家族 GSDM家族成员广泛表达,参与细胞分化、增殖、死亡等生物过程,并在病理过程中起作用。 2.GSDMD功能 GSDMD是GSDM家族的重要成员,通过Caspase酶切加工激活,参与细胞焦亡过程,影响离子稳态和细胞死亡。 3.GSDMD调控 GSDMD的转录受多种分子调控,活性受自身抑制结构、蛋白水解切割事件等调节,以防止自发孔形成并控制细胞表面孔的丰度。 4.疾病治疗 GSDMD在自身免疫性疾病或炎症性疾病中发挥关键功能,深入了解其调节机制和执行功能,有助于开发新型和更特异的抑制剂,为针对GSDMD相关疾病的机体进行治疗干预打开新窗口。 以上内容由AI检索 生成,你也可以捏合屏幕生成属于你的专属内容 @捏一下小助手
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caspase 1 inhibitor i,cas号:290814
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